| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 免疫磁珠结合抗泛素化蛋白在奶牛性别控制技术中去除无效精子的筛选研究 | 第12-49页 |
| 1 材料 | 第13-15页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 1.2 药品和试剂 | 第14页 |
| 1.3 实验所需溶液配制 | 第14-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-22页 |
| 2.1 精液采集 | 第15页 |
| 2.2 精子活力检测 | 第15-16页 |
| 2.3 精子畸形率检测 | 第16页 |
| 2.4 精子蛋白提取 | 第16页 |
| 2.5 精子蛋白浓度测定 | 第16-17页 |
| 2.6 Westernblotting分析精子泛素化水平 | 第17页 |
| 2.7 单通道流式细胞仪荧光强度检测精子泛素化水平 | 第17页 |
| 2.8 双通道流式细胞仪荧光强度检测精子泛素化水平和DNA缺陷水平的关系 | 第17-18页 |
| 2.9 免疫磁珠法分选精子条件优化 | 第18页 |
| 2.10 免疫组化 | 第18页 |
| 2.11 免疫磁珠法去除不同活力种公牛精子中无效精子 | 第18-19页 |
| 2.12 精子膜完整性检测 | 第19-20页 |
| 2.13 精子线粒体活性检测 | 第20页 |
| 2.14 精子顶体完整率检测 | 第20-22页 |
| 2.15 分选后精子流式细胞仪性控分离 | 第22页 |
| 2.16 性控冷冻精液制备 | 第22页 |
| 2.17 性控冷冻精液解冻和解冻后性控冷冻精液相关指标检测 | 第22页 |
| 2.18 数据分析 | 第22页 |
| 3 结果 | 第22-39页 |
| 3.1 牛精子泛素化水平同畸形率相关性研究结果 | 第22-29页 |
| 3.2 双通道流式细胞法荧光强度检测精子泛素化水平和DNA缺陷水平关系研究结果 | 第29-34页 |
| 3.3 免疫磁珠法分选精子条件优化研究结果 | 第34-36页 |
| 3.4 免疫磁珠法去除不同活力种公牛精子中无效精子研究结果 | 第36-37页 |
| 3.5 不同活力种公牛精子分选后性控冷冻精液相关指标检测研究结果 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| 4.1 种公牛精子泛素化水平同畸形率相关性 | 第39-40页 |
| 4.2 种公牛精子泛素化水平同DNA缺陷水平相关性 | 第40页 |
| 4.3 免疫磁珠法去除不同活力种公牛精子中无效精子 | 第40-42页 |
| 4.4 不同活力种公牛精子分选后性控冷冻精液品质 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 第二章 免疫磁珠结合膜联蛋白V在奶牛性别控制技术中去除死精子的筛选研究 | 第49-69页 |
| 1 材料 | 第49-51页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第49-50页 |
| 1.2 药品和试剂 | 第50页 |
| 1.3 实验所需溶液配制 | 第50-51页 |
| 2 方法 | 第51-52页 |
| 2.1 精液采集 | 第51页 |
| 2.2 精子活力检测 | 第51页 |
| 2.3 精子畸形率检测 | 第51页 |
| 2.4 精子AnnexinV-FITC染色 | 第51页 |
| 2.5 免疫磁珠法去除不同活力种公牛精子中死精子 | 第51-52页 |
| 2.6 精子膜完整性检测 | 第52页 |
| 2.7 精子线粒体活性检测 | 第52页 |
| 2.8 精子顶体完整率检测 | 第52页 |
| 2.9 分选后精子流式细胞仪性控分离 | 第52页 |
| 2.10 性控冷冻精液制备 | 第52页 |
| 2.11 性控冷冻精液解冻和解冻后性控冷冻精液相关指标检测 | 第52页 |
| 2.12 数据分析 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-62页 |
| 3.1 死、活牛精子结合AnnexinV-FITC研究结果 | 第52-53页 |
| 3.2 免疫磁珠去除不同活力种公牛精子中死精子研究结果 | 第53-56页 |
| 3.3 免疫磁珠分选不同活力种公牛精子后上机性控分离死精率研究结果 | 第56-61页 |
| 3.4 不同活力种公牛精子分选后性控冷冻精液相关指标检测研究结果 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| 4.1 AnnexinV特异结合死精子 | 第62-63页 |
| 4.2 免疫磁珠法去除不同活力种公牛精子中死精子 | 第63-64页 |
| 4.3 不同活力种公牛精子分选后性控冷冻精液品质 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 文献综述 | 第70-92页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
