摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一部分 研究背景和文献综述 | 第10-34页 |
第一章 结直肠癌的研究进展 | 第10-21页 |
1.1 结直肠癌现状 | 第10-11页 |
1.2 结直肠癌概述 | 第11-12页 |
1.3 结直肠癌机理研究以及相关信号通路 | 第12-18页 |
1.4 研究结直肠癌的动物模型 | 第18-21页 |
第二章 Gpr55基因研究背景 | 第21-28页 |
2.1 Gpr55基因概述 | 第21页 |
2.2 Gpr55参与的信号通路 | 第21-23页 |
2.3 Gpr55基因的生物学功能 | 第23-28页 |
第三章 TALEN技术概述 | 第28-34页 |
3.1 TALEN的结构 | 第28-29页 |
3.2 TALEN技术的作用原理 | 第29-31页 |
3.3 TALEN技术靶点的预测和选择 | 第31-32页 |
3.4 TALEN技术的实验流程 | 第32页 |
3.5 TALEN技术的应用 | 第32-34页 |
第二部分 实验材料和方法 | 第34-51页 |
1 实验材料 | 第34-40页 |
1.1 实验动物 | 第34页 |
1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
1.3 实验耗材 | 第35页 |
1.4 实验试剂和试剂盒 | 第35-36页 |
1.5 主要抗体 | 第36页 |
1.6 细胞株及质粒 | 第36页 |
1.7 主要实验试剂配方 | 第36-40页 |
2 实验方法 | 第40-50页 |
2.1 基因组DNA的提取 | 第40页 |
2.2 RNA提取 | 第40-41页 |
2.3 RNA反转录cDNA | 第41页 |
2.4 常规PCR | 第41-42页 |
2.5 实时定量PCR(Quantitative Realtime-PCR,Q-PCR) | 第42页 |
2.6 载体构建 | 第42-44页 |
2.7 SP6体外转录RNA | 第44-46页 |
2.8 胚胎显微注射 | 第46页 |
2.9 苏木精-伊红染色 | 第46-47页 |
2.10 免疫组织化学染色 | 第47-48页 |
2.11 Western blot(WB) | 第48-50页 |
3 主要软件与数据库 | 第50-51页 |
第三部分 实验结果与讨论 | 第51-74页 |
第一章 利用TALEN技术构建Gpr55基因敲除小鼠 | 第51-57页 |
1、引言 | 第51-52页 |
2、实验结果 | 第52-55页 |
3、小结与讨论 | 第55-57页 |
第二章 Gpr55在小鼠肠道中的表达分析以及Gpr55基因敲除后对肠发育的影响 | 第57-61页 |
1、引言 | 第57页 |
2、实验结果 | 第57-60页 |
3、小结与讨论 | 第60-61页 |
第三章 Gpr55基因在小鼠肠炎肠癌中的作用 | 第61-69页 |
1、引言 | 第61页 |
2、实验结果 | 第61-67页 |
3、小结与讨论 | 第67-69页 |
第四章 Gpr55基因在人结直肠癌细胞中的表达以及激动剂LPI刺激SW | 第69-72页 |
1、引言 | 第69页 |
2、实验结果 | 第69-71页 |
3、小结与讨论 | 第71-72页 |
第五章 全文总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
附录 | 第80-81页 |
硕士在读期间参与的课题和发表的文章 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |