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汉麻籽粕降血糖肽的酶法制备及其分离纯化

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第13-28页
    1.1 汉麻概况第13-18页
        1.1.1 汉麻植物的生物学特征第13-14页
        1.1.2 汉麻生产的历史与现状第14-15页
        1.1.3 汉麻籽的营养成分和功能第15-17页
        1.1.4 汉麻籽的国内外研究现状第17-18页
    1.2 生物活性肽的研究现状第18-23页
        1.2.1 活性肽概述第18-20页
            1.2.1.1 降血压活性第18-19页
            1.2.1.2 降胆固醇活性第19页
            1.2.1.3 抑菌活性第19-20页
        1.2.2 酶法制备功能性短肽第20-21页
            1.2.2.1 蛋白酶种类的选择第20-21页
            1.2.2.2 酶解工艺的优化第21页
            1.2.2.3 酶解产物的活性评价第21页
        1.2.3 多肽的分离与结构鉴定第21-23页
            1.2.3.1 多肽的分离方法第21-22页
            1.2.3.2 多肽的结构鉴定第22-23页
    1.3 降血糖肽的研究进展第23-26页
        1.3.1 糖尿病概述第23-24页
        1.3.2 降血糖功能因子的研究现状第24-25页
        1.3.3 降血糖肽的研究现状第25-26页
    1.4 立题背景和研究意义第26页
    1.5 主要研究内容第26-28页
第二章 汉麻籽粕分离蛋白的制备第28-36页
    2.1 引言第28页
    2.2 实验材料与设备第28-29页
        2.2.1 实验材料第28页
        2.2.2 实验设备第28-29页
    2.3 实验方法第29-30页
        2.3.1 基本成分的测定第29页
        2.3.2 汉麻籽粕分离蛋白的制备工艺第29页
        2.3.3 酸沉 pH 的确定第29页
        2.3.4 蛋白提取率的计算第29-30页
    2.4 结果与讨论第30-34页
        2.4.1 脱脂汉麻籽粕的组分分析第30页
        2.4.2 酸沉工艺中 pH 值的确定第30-31页
        2.4.3 碱溶 pH 值对 HMPI 提取率的影响第31页
        2.4.4 提取时间对 HMP 提取率的影响第31-32页
        2.4.5 料液比对 HMP 提取率的影响第32-33页
        2.4.6 温度对 HMPI 提取率的影响第33页
        2.4.7 碱提酸沉工艺的优化第33-34页
    2.5 本章小结第34-36页
第三章 汉麻籽粕分离蛋白的酶解工艺第36-48页
    3.1 引言第36页
    3.2 实验材料与设备第36页
        3.2.1 实验材料第36页
        3.2.2 实验设备第36页
    3.3 实验方法第36-38页
        3.3.1 汉麻籽粕分离蛋白的提取第36-37页
        3.3.2 汉麻籽粕分离蛋白酶解工艺第37页
        3.3.3 蛋白质水解度的测定方法第37-38页
            3.3.3.1 pH-stat 法第37页
            3.3.3.2 甲醛滴定法第37-38页
            3.3.3.3 数据及统计分析第38页
    3.4 结果与分析第38-47页
        3.4.1 pH-stat 和甲醛滴定法测定不同商业蛋白酶酶解效果的比较第38-39页
        3.4.2 不同反应条件对 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 酶解效果的影响第39-43页
            3.4.2.1 加酶量对 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 酶解效果的影响第39-40页
            3.4.2.2 底物浓度对 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 酶解效果的影响第40-41页
            3.4.2.3 pH 值对 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 酶解效果的影响第41页
            3.4.2.4 反应温度对 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 酶解效果的影响第41-42页
            3.4.2.5 反应时间对 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 酶解效果的影响第42-43页
        3.4.3 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 水解条件的优化第43-47页
            3.4.3.1 响应面法优化 Alcalase 2.4L FG 催化 HMPI 的水解工艺第43页
            3.4.3.2 回归模型的建立及显著性检验第43-44页
            3.4.3.3 各因素交互作用分析第44-47页
            3.4.3.4 酶解最佳工艺条件的确定和验证实验第47页
    3.5 本章小结第47-48页
第四章 汉麻籽粕蛋白酶解产物体外活性的研究及其纯化第48-66页
    4.1 引言第48-49页
    4.2 实验材料与设备第49页
        4.2.1 实验材料第49页
        4.2.2 实验设备第49页
    4.3 实验方法第49-53页
        4.3.1 ACE 体外抑制活性的测定第49-50页
        4.3.2 胆固醇胶束溶解度抑制率的测定第50-51页
        4.3.3 抑菌活性的测定第51页
            4.3.3.1 菌悬液的制备第51页
            4.3.3.2 抑菌作用的测定第51页
        4.3.4 ɑ-葡萄糖苷酶体外抑制活性第51页
        4.3.5 半数抑制浓度(IC50值)第51页
        4.3.6 大孔吸附树脂梯度洗脱第51-52页
        4.3.7 氨基酸组成分析第52页
        4.3.8 汉麻籽粕蛋白酶解产物的分子量测定 MALDI-TOF/TOF MS/MS第52页
        4.3.9 Sephadex G-15 葡聚糖凝胶层析分离ɑ-葡萄糖苷酶抑制活性肽第52-53页
        4.3.10 半制备型 RP-HPLC 分离ɑ--葡萄糖苷酶抑制活性肽第53页
        4.3.11 产物活性肽的 ESI-MS 测定第53页
    4.4 结果与分析第53-64页
        4.4.1 不同水解度大小的汉麻籽粕酶解物对体外 ACE 的抑制活性评估第53-54页
        4.4.2 不同水解度大小的汉麻籽粕酶解物对胆固醇胶束溶解度的抑制活性评估第54-55页
        4.4.3 不同水解度大小的汉麻籽粕酶解物对抑菌活性评估第55页
        4.4.4 不同水解度大小的汉麻籽粕酶解物对ɑ-葡萄糖苷酶抑制活性评估第55-56页
        4.4.5 大孔吸附树脂分离汉麻籽粕多肽第56-60页
            4.4.5.1 大孔吸附树脂动态吸附第56页
            4.4.5.2 不同浓度乙醇洗脱组分得率分析第56-57页
            4.4.5.3 氨基酸组成分析及其疏水性第57-58页
            4.4.5.4 各组分的ɑ-葡萄糖苷酶抑制活性分析及其相对分子质量分布第58-60页
        4.4.6 D3组分的 Sephadex G-15 凝胶层析纯化分析第60-61页
        4.4.7 半制备型 RP-HPLC 分离 G4组分第61-62页
        4.4.8 R_7组分的 ESI MS 分析第62-64页
    4.5 本章小结第64-66页
结论与展望第66-68页
参考文献第68-75页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第75-76页
致谢第76-78页
附件第78页

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