| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 0. 前言 | 第10-13页 |
| 一. 研究背景 | 第10-12页 |
| 二. 研究目的与意义 | 第12页 |
| 三. 实验创新点 | 第12-13页 |
| 第一部分 MMP9转基因兔的制备及其动脉硬化病变特点的分析 | 第13-36页 |
| 1. 实验材料及主要仪器 | 第13-15页 |
| 1.1 实验动物 | 第13页 |
| 1.2 实验主要仪器 | 第13-14页 |
| 1.3 实验主要试剂 | 第14-15页 |
| 1.4 常用溶液配制 | 第15页 |
| 2. 实验方法 | 第15-23页 |
| 2.1 制备MMP9转基因兔 | 第15页 |
| 2.2 高胆固醇饲料的制作 | 第15-16页 |
| 2.3 测量TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、HDL-C(高密度脂蛋白胆固醇)浓度 | 第16页 |
| 2.4 激光显微切割采集目标细胞 | 第16页 |
| 2.5 Southern Blot | 第16-17页 |
| 2.6 蛋白样品的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(Western Blot) | 第17-20页 |
| 2.7 苏木素-伊红染色(HE染色) | 第20-21页 |
| 2.8 免疫组织化学染色(IHC染色) | 第21页 |
| 2.9 苏丹Ⅳ染色 | 第21-22页 |
| 2.10 明胶酶谱 | 第22-23页 |
| 2.11 细胞趋化实验 | 第23页 |
| 3. 实验结果 | 第23-36页 |
| 3.1 巨噬细胞特异性表达MMP9转基因兔的制作 | 第23-24页 |
| 3.2 监测动物体重变化情况 | 第24-25页 |
| 3.3 血浆脂质水平监测 | 第25-26页 |
| 3.4 MMP9在动脉粥样硬化早期病变中的作用 | 第26-27页 |
| 3.5 动脉切片染色分析早期病变内膜厚度以及特征 | 第27-29页 |
| 3.6 MMP9在动脉粥样硬化晚期病变中的作用 | 第29-31页 |
| 3.7 MMP9基因过表达造成动脉内膜出现钙盐沉积 | 第31-34页 |
| 3.8 病变区域内MMP9表达以及其家族的其他MMPs及其抑制剂的表达 | 第34-35页 |
| 3.9 MMP9促进了巨噬细胞的迁移并且水解细胞外基质(ECM) | 第35-36页 |
| 第二部分 过表达MMP9对脂质代谢的影响 | 第36-53页 |
| 1. 实验试剂与耗材 | 第36-37页 |
| 2. 主要仪器设备 | 第37-38页 |
| 3. 实验方法 | 第38-44页 |
| 3.1 目的基因过表达MMP9慢病毒载体构建与病毒包装 | 第38-42页 |
| 3.2 稳定表达MMP9的HepG2细胞系鉴定 | 第42-44页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第42-43页 |
| 3.2.2 带有MMP9基因的慢病毒感染HepG2细胞 | 第43-44页 |
| 4. 实验结果 | 第44-51页 |
| 4.1 MMP9过表达HepG2细胞株的构建 | 第44-49页 |
| 4.1.1 慢病毒载体的构建 | 第44-46页 |
| 4.1.2 慢病毒重组质粒的表达鉴定 | 第46-47页 |
| 4.1.3 MMP9过表达HepG2细胞株的构建与鉴定 | 第47-49页 |
| 4.2 HepG2细胞系中过表达MMP9对LDLR、PCSK9的影响 | 第49-51页 |
| 5. 讨论 | 第51-53页 |
| 小结与创新 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 文献综述 | 第58-69页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 攻读学位期间发表论文及科研情况 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
