| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 β-葡萄糖苷酶 | 第13-20页 |
| 1.1.1 β-葡萄糖苷酶分类与催化机制 | 第13-15页 |
| 1.1.2 β-葡萄糖苷酶的表达与理化性质 | 第15-16页 |
| 1.1.3 β-葡萄糖苷酶的应用 | 第16-20页 |
| 1.2 毕赤酵母表面展示系统 | 第20-24页 |
| 1.2.1 毕赤酵母表达系统的优点 | 第20-21页 |
| 1.2.2 毕赤酵母表面展示系统的细胞壁蛋白 | 第21-23页 |
| 1.2.3 毕赤酵母表面展示系统的应用 | 第23-24页 |
| 1.3 填充床反应器 | 第24-26页 |
| 1.4 本课题的研究意义和主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 泰国红木β-葡萄糖苷酶在毕赤酵母的表面展示 | 第28-54页 |
| 2.1 引言 | 第28-29页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第29-33页 |
| 2.2.1 主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| 2.2.2 菌株与质粒 | 第30页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.4 培养基的配制 | 第31-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.3.1 菌株的培养 | 第33页 |
| 2.3.2 菌株的保存 | 第33页 |
| 2.3.3 重组质粒 pKDCBGL-GCWn（n=12,19,21,49,51,61）的构建 | 第33-40页 |
| 2.3.4 重组毕赤酵母菌株的构建和筛选 | 第40-45页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第45-52页 |
| 2.4.1 泰国红木β-葡萄糖苷酶展示型重组质粒的构建 | 第45-47页 |
| 2.4.2 重组毕赤酵母表面展示菌株的构建及筛选 | 第47-48页 |
| 2.4.3 重组毕赤酵母表面展示菌株的甲醇诱导表达 | 第48页 |
| 2.4.4 重组毕赤酵母表面展示菌株的免疫荧光分析 | 第48-51页 |
| 2.4.5 重组毕赤酵母表面展示菌株 DCBGL 酶活力的测定 | 第51-52页 |
| 2.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 第三章 多个锚定蛋白共展示重组菌株的构建及应用 | 第54-77页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第54-56页 |
| 3.2.1 主要仪器与设备 | 第54-55页 |
| 3.2.2 菌株和质粒 | 第55页 |
| 3.2.3 实验试剂 | 第55页 |
| 3.2.4 培养基的配制 | 第55-56页 |
| 3.2.5 试剂的配制 | 第56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-63页 |
| 3.3.1 菌株的培养与保存 | 第56页 |
| 3.3.2 基于 pPICZαA 的一拷贝展示型表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 3.3.3 体外串联表达盒构建多拷贝质粒 | 第57-58页 |
| 3.3.4 共表达展示重组毕赤酵母菌株的构建 | 第58页 |
| 3.3.5 共表达展示重组毕赤酵母菌株拷贝数的鉴定 | 第58-61页 |
| 3.3.6 共表达重组毕赤酵母菌株 DCBGL 的诱导表达 | 第61页 |
| 3.3.7 填充床反应器连续化合成烷基糖苷 | 第61-62页 |
| 3.3.8 HPLC 检测产物 | 第62-63页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第63-75页 |
| 3.4.1 基于 pPICZαA 的一拷贝重组质粒的构建 | 第63-64页 |
| 3.4.2 多拷贝重组质粒的构建 | 第64-66页 |
| 3.4.3 共展示重组菌拷贝数的鉴定 | 第66-72页 |
| 3.4.4 填充床反应器合成 BG 的初步研究 | 第72-75页 |
| 3.5 本章小结 | 第75-77页 |
| 结论与展望 | 第77-79页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 附件 | 第90页 |
