| 英文缩略词表(Abbreviation) | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-15页 |
| Abstract | 第15-20页 |
| 1.前言 | 第21-23页 |
| 2 材料与仪器 | 第23-25页 |
| 2.1 动物 | 第23页 |
| 2.2 药物 | 第23页 |
| 2.3 试剂 | 第23-24页 |
| 2.4 仪器与设备 | 第24-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-37页 |
| 3.1 大鼠佐剂性关节炎(AA)模型的建立 | 第25页 |
| 3.2 动物分组及给药方法 | 第25页 |
| 3.3 胸腺指数和脾脏指数测定 | 第25页 |
| 3.4 脾脏病理组织学检查 | 第25-26页 |
| 3.5 免疫组化法检测AA大鼠脾脏和胸腺组织中G蛋白偶联受体激酶亚型(GRKs)和前列腺素受体亚型(EPs)的表达 | 第26-27页 |
| 3.5.1 样本收集 | 第26页 |
| 3.5.2 免疫组化 | 第26-27页 |
| 3.6 Westernblot法检测AA大鼠脾脏和胸腺组织中G蛋白偶联受体激酶亚型(GRKs)和前列腺素受体亚型(EPs)的表达 | 第27-30页 |
| 3.6.1 正常组、AA模型组及CP-25给药组大鼠脾脏、胸腺组织蛋白提取 | 第27页 |
| 3.6.2 蛋白定量(BCA法) | 第27-28页 |
| 3.6.3 Westernblot法 | 第28-30页 |
| 3.7 AA大鼠脾脏和胸腺组织中GRKs和EPsmRNA水平的检测 | 第30-34页 |
| 3.7.1 大鼠脾脏组织总RNA的提取 | 第30页 |
| 3.7.2 RNA逆转录成cDNA | 第30-31页 |
| 3.7.3 大鼠脾脏组织GRKs和EPsmRNA的引物设计 | 第31-32页 |
| 3.7.4 Q-PCR检测AA大鼠脾脏组织上GRK2,GRK3,GRK5,GRK6,EP1,EP2,EP3,EP4mRNA的水平 | 第32-34页 |
| 3.8 免疫共沉淀法检测GRK2-EP2和GRK2-EP4的共表达 | 第34-35页 |
| 3.8.1 试剂配制： | 第34页 |
| 3.8.2 样本制备： | 第34-35页 |
| 3.9 激光共聚焦显微镜法检测脾脏组织中GRK2和EP4的共表达 | 第35-36页 |
| 3.10 脾脏T细胞功能研究 | 第36-37页 |
| 3.10.1 CCK8法检测脾脏来源T细胞的增殖 | 第36页 |
| 3.10.2 ELISA检测T细胞中炎性因子的分泌水平 | 第36-37页 |
| 3.10.3 流式细胞术检测脾脏T细胞中EP4表达 | 第37页 |
| 3.10.4 T细胞中cAMP水平检测 | 第37页 |
| 3.10.5 激光共焦检测来源于脾脏T细胞中GRK2和EP4的表达 | 第37页 |
| 3.11 统计学分析 | 第37页 |
| 4 实验结果 | 第37-56页 |
| 4.1 CP-25对AA大鼠整体指标的影响 | 第37-40页 |
| 4.1.1 CP-25对AA大鼠足爪肿胀度的影响 | 第37-39页 |
| 4.1.2 CP-25对AA大鼠脾脏组织病理学的影响 | 第39页 |
| 4.1.3 CP-25对AA大鼠胸腺指数和脾脏指数的影响 | 第39-40页 |
| 4.2 CP-25对AA大鼠胸腺、脾脏组织中GRKs和EPs蛋白表达的影响 | 第40-46页 |
| 4.2.1 CP-25对AA大鼠胸腺组织中GRKs和EPs蛋白表达的影响 | 第40-43页 |
| 4.2.2 CP-25对AA大鼠脾脏组织中GRKs和EPs蛋白表达的影响 | 第43-46页 |
| 4.3 AA大鼠脾脏GRKs和EPsmRNA的表达 | 第46-48页 |
| 4.4 CP-25对AA大鼠胸腺和脾脏中GRK2和EP2共表达以及GRK2和EP4共表达的影响 | 第48-51页 |
| 4.4.1 CP-25对AA大鼠胸腺和脾脏组织中GRK2和EP2共表达的影响 | 第48-49页 |
| 4.4.2 CP-25对AA大鼠胸腺和脾脏组织中GRK2和EP4共表达的影响 | 第49-51页 |
| 4.5 CP-25对脾脏T细胞功能的影响 | 第51-56页 |
| 4.5.1 CP-25对脾脏来源的T细胞的增殖的影响 | 第51-52页 |
| 4.5.2 CP-25对T细胞分泌的炎症因子的影响 | 第52页 |
| 4.5.3 CP-25对T细胞内cAMP水平的影响 | 第52-53页 |
| 4.5.4 CP-25对AA大鼠脾脏来源T细胞中GRK2和EP4表达的影响 | 第53-56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| 5.1 T细胞异常活化参与RA的发病过程 | 第56-57页 |
| 5.2 PGE2/EP4-cAMP信号异常参与AA炎症免疫反应 | 第57-58页 |
| 5.3 CP-25通过调节T细胞功能发挥AA治疗作用 | 第58页 |
| 6 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 综述 | 第68-94页 |
| References | 第83-94页 |
