| 摘要 | 第8-10页 |
| Summary | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-17页 |
| 第一部分 文献综述 HSPs对睾丸发育及精子调控的研究进展 | 第17-45页 |
| 1 热休克蛋白(HSPs) | 第17-20页 |
| 1.1 热休克蛋白的发现 | 第17-18页 |
| 1.2 热休克蛋白的生成诱因 | 第18-19页 |
| 1.3 热休克蛋白的分类 | 第19页 |
| 1.4 热休克蛋白的基因序列特征及表达 | 第19-20页 |
| 1.4.1 热休克蛋白家族成员的基因序列特征 | 第19-20页 |
| 1.4.2 热休克蛋白的基因表达 | 第20页 |
| 2 HSPs对不同器官的影响 | 第20-22页 |
| 2.1 HSPs与疾病的关联性 | 第20页 |
| 2.2 HSPs对器官组织适应的作用 | 第20-22页 |
| 3 影响睾丸发育的因素 | 第22-32页 |
| 3.1 外界因素 | 第23-25页 |
| 3.1.1 物理因素 | 第23页 |
| 3.1.2 化学因素 | 第23-24页 |
| 3.1.3 环境因素 | 第24-25页 |
| 3.1.4 生物因素 | 第25页 |
| 3.2 自身因素 | 第25-32页 |
| 3.2.1 基因突变 | 第25-26页 |
| 3.2.2 蛋白质变异 | 第26-28页 |
| 3.2.3 自身免疫性疾病 | 第28-30页 |
| 3.2.4 其他疾病 | 第30-32页 |
| 4 HSPs对精子发生调控 | 第32-34页 |
| 4.1 大分子热休克蛋白(HSPs)与精子发生 | 第32-33页 |
| 4.1.1 HSP40/90/110与雄性不育 | 第32-33页 |
| 4.1.2 HSP60/70与雄性不育 | 第33页 |
| 4.2 小分子热休克蛋白(HSPs)与雄性不育 | 第33-34页 |
| 4.2.1 小分子热休克蛋白与雄性不育。 | 第33页 |
| 4.2.2 热休克蛋白10与雄性不育。 | 第33-34页 |
| 5 HSPs/HSFs与雄性不育 | 第34-36页 |
| 5.1 HSPs/HSFs对精子凋亡的调控 | 第34-35页 |
| 5.1.1 HSPs/HSFs与精子发育 | 第34页 |
| 5.1.2 HSPs/HSFs与雄性不育 | 第34-35页 |
| 5.2 HSFs对雄性不育精子的作用 | 第35-36页 |
| 5.2.1 HSF1与雄性不育 | 第35页 |
| 5.2.2 HSF2与雄性不育 | 第35-36页 |
| 6 牦牛和犏牛HSPs的生物信息学特征 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-45页 |
| 第二部分 研究内容 | 第45-123页 |
| 第一章 牦牛HSPs克隆及在不同器官组织中的表达 | 第45-69页 |
| 前言 | 第45-47页 |
| 1.材料与方法 | 第47-54页 |
| 1.1 试验动物 | 第47页 |
| 1.2 主要试剂和仪器设备 | 第47-48页 |
| 1.3 组织样品mRNA的制备和质量检测 | 第48页 |
| 1.4 样品RNA的反转录 | 第48-49页 |
| 1.5 基因克隆引物设计及PCR扩增 | 第49-50页 |
| 1.6 牦牛HSP40/60/90/110基因克隆 | 第50-51页 |
| 1.7 蛋白空间结构的模拟 | 第51页 |
| 1.8 荧光定量PCR引物设计及扩增 | 第51-53页 |
| 1.9 蛋白的提取及检测 | 第53页 |
| 1.10 HSP70/90免疫组化和免疫荧光的阳性检测 | 第53-54页 |
| 1.11 数据统计与分析 | 第54页 |
| 2.结果 | 第54-61页 |
| 2.1 牦牛HSP40/60/90/110cDNA基因克隆 | 第54页 |
| 2.2 牦牛 HSP40/60/90/110 基因同源性分析 | 第54-57页 |
| 2.3 HSP70和HSP90在牦牛不同器官组织的表达和分布 | 第57-60页 |
| 2.4 HSPs在成年牦牛心血管不同部位的表达 | 第60-61页 |
| 3.讨论 | 第61-63页 |
| 4.小结 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 第二章 HSP70/90对雌牦牛生殖系统及泌乳不同阶段乳腺组织的影响 | 第69-83页 |
| 前言 | 第69-70页 |
| 1.材料与方法 | 第70-73页 |
| 1.1 试验动物 | 第70-71页 |
| 1.2 主要试剂和仪器设备 | 第71页 |
| 1.3 组织样品mRNA的制备,反转录cDNA | 第71页 |
| 1.4 引物设计及荧光定量RT-qPCR | 第71-72页 |
| 1.5 HSP70/90在雌性生殖系统和乳腺的基因表达 | 第72页 |
| 1.6 蛋白的提取及检测 | 第72-73页 |
| 1.7 HSP70/90免疫组化和免疫荧光的阳性检测 | 第73页 |
| 1.8 数据统计与分析 | 第73页 |
| 2.结果 | 第73-78页 |
| 2.1 HSP70/90雌牦牛生殖系统中的表达与定位 | 第73-76页 |
| 2.2 HSP70/90在乳腺泌乳期和非泌乳期的表达和定位 | 第76-78页 |
| 3.讨论 | 第78-79页 |
| 4.小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
| 第三章 HSP70/90在牦牛和犏牛不同器官中的表达及对睾丸发育的影响 | 第83-104页 |
| 前言 | 第83-85页 |
| 1.材料与方法 | 第85-88页 |
| 1.1 试验动物 | 第85页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第85页 |
| 1.3 组织样品mRNA的制备,反转录cDNA及PCR扩增 | 第85-86页 |
| 1.4 HSP27和P53蛋白空间结构的分析 | 第86页 |
| 1.5 引物的设计及荧光定量RT-PCR | 第86-87页 |
| 1.6 蛋白的提取及检测 | 第87页 |
| 1.7 HSP70/90免疫组化和免疫荧光的阳性检测 | 第87页 |
| 1.8 数据统计与分析 | 第87-88页 |
| 2.结果 | 第88-98页 |
| 2.1 犏牛HSP90基因的克隆 | 第88页 |
| 2.2 犏牛HSP90氨基酸序列分析 | 第88页 |
| 2.3 犏牛HSP90物理和化学性质分析 | 第88-89页 |
| 2.4 HSP90蛋白空间结构差异性分析 | 第89-91页 |
| 2.5 HSP70/90在不同器官组织中的表达和定位 | 第91-94页 |
| 2.6 HSP70/90在睾丸组织不同发育阶段的表达和分布 | 第94-98页 |
| 3.讨论 | 第98-100页 |
| 4.小结 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-104页 |
| 第四章 HSP27和P53对犏牛/牦牛睾丸发育和精子凋亡的影响 | 第104-123页 |
| 前言 | 第104-105页 |
| 1.材料与方法 | 第105-108页 |
| 1.1 试验动物 | 第105-106页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第106页 |
| 1.3 组织样品mRNA的制备,反转录cDNA及PCR扩增 | 第106页 |
| 1.4 HSP27和P53蛋白空间结构的分析 | 第106页 |
| 1.5 引物的设计及荧光定量RT-PCR | 第106-107页 |
| 1.6 蛋白的提取及HSP27和P53蛋白的检测 | 第107-108页 |
| 1.7 HSP27和P53免疫组化和免疫荧光的阳性检测 | 第108页 |
| 1.8 数据统计与分析 | 第108页 |
| 2.结果 | 第108-116页 |
| 2.1 犏牛HSP27和P53基因克隆 | 第108-109页 |
| 2.3 HSP27和P53蛋白结构分析 | 第109-111页 |
| 2.4 犏牛/牦牛HSP27和P53在睾丸组织的表达 | 第111-114页 |
| 2.5 HSP27和P53在不同发育阶段睾丸组织的定位 | 第114-116页 |
| 3.讨论 | 第116-119页 |
| 4.小结 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 论文创新点 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 作者简介 | 第125-127页 |
| 导师简介 | 第127-128页 |
