摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第16-26页 |
1.1 微孢子虫的结构特征 | 第16-17页 |
1.2 微孢子虫的侵染机制 | 第17-18页 |
1.3 微孢子虫蛋白质研究进展 | 第18-23页 |
1.3.1 微孢子虫总蛋白的研究 | 第18-19页 |
1.3.2 微孢子虫微管蛋白的研究 | 第19页 |
1.3.3 微孢子虫极丝蛋白的研究 | 第19-20页 |
1.3.4 微孢子虫孢壁蛋白的研究 | 第20-23页 |
1.4 研究目的及意义 | 第23-24页 |
1.5 研究内容 | 第24-26页 |
第2章 家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25在家蚕细胞BmN中的表达 | 第26-42页 |
2.1 前言 | 第26页 |
2.2 材料与主要试剂 | 第26-29页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第26-27页 |
2.2.2 主要实验仪器和设备 | 第27页 |
2.2.3 主要试剂的配置 | 第27-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-36页 |
2.3.1 家蚕微孢子虫基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
2.3.2 孢壁蛋白SWP25基因的PCR扩增 | 第30-31页 |
2.3.3 重组质粒PMD-19T-SWP25和PMD-19T-EGFP的构建 | 第31-32页 |
2.3.4 重组转移载体的构建及鉴定 | 第32-33页 |
2.3.5 构建及鉴定重组家蚕杆状病毒质粒 | 第33-34页 |
2.3.6 转染与感染家蚕BmN细胞 | 第34页 |
2.3.7 EGFP-SWP25融合蛋白在BmN细胞中的表达及鉴定 | 第34-36页 |
2.4 结果与分析 | 第36-40页 |
2.4.1 孢壁蛋白SWP25基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
2.4.2 构建并鉴定重组家蚕杆状病毒质粒 | 第37-38页 |
2.4.3 EGFP-SWP25融合蛋白在BmN细胞中的表达及鉴定 | 第38-40页 |
2.5 讨论 | 第40-42页 |
第3章 家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25互作蛋白的筛选 | 第42-50页 |
3.1 前言 | 第42页 |
3.2 材料与主要试剂 | 第42页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第42页 |
3.2.2 主要实验设备仪器 | 第42页 |
3.2.3 主要试剂的配制 | 第42页 |
3.3 实验方法 | 第42-43页 |
3.3.1 细胞裂解 | 第42-43页 |
3.3.2 免疫共沉淀 | 第43页 |
3.3.3 SDS-PAGE电泳与质谱分析 | 第43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-45页 |
3.4.1 免疫共沉淀和SDS-PAGE分析 | 第43-44页 |
3.4.2 质谱分析结果 | 第44-45页 |
3.5 讨论 | 第45-50页 |
第4章 一种内网虫属微孢子虫 α-微管蛋白全长克隆及分子鉴定 | 第50-64页 |
4.1 前言 | 第50页 |
4.2 材料与主要试剂 | 第50-51页 |
4.2.1 材料 | 第50页 |
4.2.2 主要试剂 | 第50-51页 |
4.3 实验方法 | 第51-55页 |
4.3.1 Endoreticulatus sp. Zhenjiang总RNA的提取与浓度测定 | 第51页 |
4.3.2 Endoreticulatus sp. Zhenjiang α-微管蛋白基因cDNA全长的获得 | 第51-54页 |
4.3.3 微管蛋白基因序列的分析 | 第54页 |
4.3.4 特异性检测 | 第54-55页 |
4.4 结果与分析 | 第55-59页 |
4.4.1 Endoreticulatus sp. Zhenjiang α-微管蛋白基因的克隆与序列分析 | 第55-57页 |
4.4.2 微管蛋白基因的序列比对与同源性分析 | 第57页 |
4.4.3 系统发育树分析 | 第57-58页 |
4.4.4 特异性PCR诊断 | 第58-59页 |
4.5 讨论 | 第59-64页 |
结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
附录 | 第76-80页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第80-82页 |
致谢 | 第82页 |