| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 引言 | 第14-26页 |
| 1 露水草及 20-羟基蜕皮甾酮研究现状 | 第14-22页 |
| 1.1 露水草的研究现状 | 第14页 |
| 1.2 露水草中活性成分 20-羟基蜕皮甾酮简介 | 第14-16页 |
| 1.3 20-羟基蜕皮甾酮来源 | 第16-18页 |
| 1.4 植物甾酮的生物合成途径 | 第18-21页 |
| 1.4.1 5-磷酸-D-脱氧木酮糖/2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸酯途径途径 | 第18-19页 |
| 1.4.2 甲羟戊酸途径 | 第19-21页 |
| 1.5 HMGR 研究进展 | 第21-22页 |
| 2 诱导子对植物次生代谢产物的诱导调控作用 | 第22-25页 |
| 2.1 诱导子的定义与分类 | 第22-23页 |
| 2.2 诱导子刺激植物产生防御反应 | 第23-24页 |
| 2.3 三种经典诱导子简介及对次生代谢产物生物合成的影响 | 第24-25页 |
| 3 本课题研究的主要内容 | 第25-26页 |
| 第二章 露水草 HMGR 基因的克隆及生物信息学分析 | 第26-50页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验仪器与试剂 | 第26-28页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第26-28页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.3.1 露水草无菌苗的扩繁 | 第28-29页 |
| 2.3.2 露水草总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
| 2.3.2.1 前期准备工作 | 第29页 |
| 2.3.2.2 RNA 的提取 | 第29-30页 |
| 2.3.3 总 RNA 含量测定及完整性检测 | 第30页 |
| 2.3.4 cDNA 第一链的合成 | 第30-31页 |
| 2.3.5 CaHMGR 基因保守区片段的扩增 | 第31页 |
| 2.3.6 DNA 片段的回收、连接、克隆及测序 | 第31-34页 |
| 2.3.7 3，-RACE | 第34-35页 |
| 2.3.8 5，-RACE | 第35-37页 |
| 2.3.9 CaHMGR 基因全长序列的获得 | 第37页 |
| 2.3.10 CaHMGR 基因生物信息学分析 | 第37页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第37-49页 |
| 2.4.1 露水草总 RNA 的提取 | 第37-38页 |
| 2.4.2 CaHMGR 基因全长序列的获得 | 第38-44页 |
| 2.4.3 CaHMGR 基因生物信息学分析 | 第44-49页 |
| 2.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 MeJA 对 CaHMGR 的表达的影响 | 第50-59页 |
| 3.1 前言 | 第50-51页 |
| 3.2 实验仪器与试剂 | 第51-52页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第51页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第51-52页 |
| 3.2.3 植物材料 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 3.3.1 露水草植株的驯化及诱导处理 | 第52页 |
| 3.3.2 植物总 RNA 的提取 | 第52页 |
| 3.3.3 cDNA 第一链的合成 | 第52页 |
| 3.3.4 质粒标准品的制备 | 第52-54页 |
| 3.3.5 荧光实时定量 PCR | 第54页 |
| 3.3.6 统计学处理 | 第54页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第54-57页 |
| 3.4.1 荧光实时定量 PCR 分析 CaHMGR 基因表达方法的建立 | 第54-56页 |
| 3.4.2 CaHMGR 基因的组织表达分布 | 第56页 |
| 3.4.3 MeJA 对露水草各组织中 HMGR 表达的影响 | 第56-57页 |
| 3.5 本章小结 | 第57-59页 |
| 第四章 诱导子对露水草 20E 生物合成及 CaHMGR 表达的调控作用 | 第59-70页 |
| 4.1 前言 | 第59-60页 |
| 4.2 实验仪器与试剂 | 第60-61页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第60页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第60-61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-62页 |
| 4.3.1 露水草愈伤组织的诱导 | 第61页 |
| 4.3.2 露水草细胞悬浮培养体系的建立 | 第61页 |
| 4.3.3 露水草细胞中 20E 的提取与 HPLC 测定 | 第61-62页 |
| 4.3.4 诱导子对露水草悬浮细胞的处理 | 第62页 |
| 4.3.5 植物总 RNA 的提取 | 第62页 |
| 4.3.6 cDNA 第一链的合成 | 第62页 |
| 4.3.7 荧光实时定量 PCR | 第62页 |
| 4.3.8 统计学处理 | 第62页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第62-69页 |
| 4.4.1 露水草愈伤组织的诱导 | 第62-63页 |
| 4.4.2 细胞中 20E 的 HPLC 分析 | 第63页 |
| 4.4.3 露水草悬浮细胞中 20E 的动态变化 | 第63-66页 |
| 4.4.4 诱导子对悬浮细胞中 20E 生物合成的调控 | 第66-67页 |
| 4.4.5 诱导子对 CaHMGR 的表达调控 | 第67-69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 论文总结与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-82页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第82-83页 |
| 附录 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
