| 致谢 | 第5-6页 |
| 前言 | 第6-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 缩略词表 | 第18-23页 |
| 第一部分 GPR124表达载体的构建和鉴定 | 第23-35页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 1.1 实验仪器和实验材料 | 第24-25页 |
| 1.1.1 细胞株 | 第24页 |
| 1.1.2 试剂 | 第24页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 1.1.4 溶液配制 | 第25页 |
| 1.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 1.2.1 细胞培养、冻存与复苏 | 第25-26页 |
| 1.2.2 TRIzol法提取细胞总RNA | 第26页 |
| 1.2.3 RNA逆转录成cDNA | 第26-27页 |
| 1.2.4 GPR124同源比对 | 第27页 |
| 1.2.5 GPR124蛋白结构域预测 | 第27页 |
| 1.2.6 GPR124分子克隆和截断体构建 | 第27-28页 |
| 1.3 实验结果 | 第28-34页 |
| 1.3.1 GPR124同源比对结果 | 第28-29页 |
| 1.3.2 GPR124功能结构域预测 | 第29-31页 |
| 1.3.3 全长GPR124构建 | 第31-32页 |
| 1.3.4 GPR124截断体构建 | 第32-34页 |
| 1.4 讨论 | 第34页 |
| 1.5 结论 | 第34-35页 |
| 第二部分 GPR124在大脑周细胞的表达定位研究 | 第35-53页 |
| 引言 | 第35-36页 |
| 2.1 实验仪器和实验材料 | 第36-38页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第36页 |
| 2.1.2 试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 2.2.1 细胞培养、冻存与复苏 | 第38页 |
| 2.2.2 细胞电转 | 第38-40页 |
| 2.2.3 细胞免疫荧光染色 | 第40-41页 |
| 2.2.4 高分辨荧光二抗制备 | 第41-42页 |
| 2.2.5 高分辨成像细胞样本制作 | 第42页 |
| 2.2.6 图像处理 | 第42-43页 |
| 2.3 实验结果 | 第43-50页 |
| 2.3.1 GPR124在周细胞中表达 | 第43-44页 |
| 2.3.2 在周细胞中GPR124与细胞骨架F-actin末端共定位 | 第44-46页 |
| 2.3.3 随机光学重建显微(stochastic optical reconstructionmicroscopy,STORM)技术观察GPR124与F-actin共定位 | 第46-48页 |
| 2.3.4 GPR124与粘着斑标记蛋白vinculin共定位 | 第48-49页 |
| 2.3.5 在周细胞中过表达GPR124-CTF的细胞定位研究 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-51页 |
| 2.5 结论 | 第51-53页 |
| 第三部分 GPR124信号介导的脑血管周细胞极化及迁移机制研究 | 第53-81页 |
| 引言 | 第53-54页 |
| 3.1 实验仪器和实验材料 | 第54-56页 |
| 3.1.1 细胞株及实验动物 | 第54-55页 |
| 3.1.2 试剂 | 第55页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第55-56页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第56页 |
| 3.2 实验方法 | 第56-63页 |
| 3.2.1 免疫荧光染色 | 第56-58页 |
| 3.2.2 Time-lapse记录细胞运动轨迹 | 第58页 |
| 3.2.3 GPR124 siRNA干扰 | 第58-60页 |
| 3.2.4 慢病毒制备 | 第60-62页 |
| 3.2.5 慢病毒侵染细胞 | 第62页 |
| 3.2.6 小鼠脑微血管栓塞模型 | 第62-63页 |
| 3.3 实验结果 | 第63-78页 |
| 3.3.1 无糖无血清饥饿周细胞影响GPR124的分布 | 第63-64页 |
| 3.3.2 亚硝基阴离子供体SIN-1影响周细胞GPR124的分布 | 第64-66页 |
| 3.3.3 划痕边缘细胞受损伤因子刺激导致GPR124在细胞运动前端表达增多 | 第66-68页 |
| 3.3.4 小鼠GPR124过表达慢病毒 | 第68-69页 |
| 3.3.5 周细胞中GPR124与极化蛋白PAR3共定位 | 第69-70页 |
| 3.3.6 不同siRNA对周细胞中GPR124的干扰效率比较 | 第70-71页 |
| 3.3.7 shRNA干扰减少周细胞中GPR124的表达量 | 第71-73页 |
| 3.3.8 shRNA GPR124转染干预了周细胞的定向迁移能力 | 第73-74页 |
| 3.3.9 ME模型小鼠损伤区脑微血管周细胞中GPR124的表达量上调 | 第74-78页 |
| 3.4 讨论 | 第78-79页 |
| 3.5 结论 | 第79-81页 |
| 总结与展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 综述 | 第87-101页 |
| 参考文献 | 第96-101页 |
| 附录1 | 第101-105页 |
| 作者简历和博士期间的成果 | 第105-106页 |
