中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 植物茎端分生组织 | 第11-14页 |
1.1.1 拟南芥顶端分生组织干细胞的调控 | 第11-12页 |
1.1.2 拟南芥花分生组织干细胞的调控 | 第12-13页 |
1.1.3 植物激素对分生组织的影响 | 第13-14页 |
1.2 WOX转录因子家族 | 第14-19页 |
1.2.1 WOX转录因子家族结构特点 | 第14-15页 |
1.2.2 WOX家族系统进化 | 第15-16页 |
1.2.3 WOX转录因子家族的功能 | 第16-19页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 植物材料及种植条件 | 第20页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第20页 |
2.1.3 酶及生化试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器 | 第20-21页 |
2.1.5 引物合成 | 第21页 |
2.1.6 DNA测序 | 第21页 |
2.1.7 分析软件及数据库 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-38页 |
2.2.1 提取植物组织的总RNA | 第21-22页 |
2.2.2 CTAB法提取小麦基因组 | 第22页 |
2.2.3 反转录合成第一链cDNA(试剂盒法) | 第22-23页 |
2.2.4 实时定量PCR分析 | 第23-24页 |
2.2.5 培养基的制备(每100mL的配置方法) | 第24页 |
2.2.6 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第24-25页 |
2.2.7 根癌农杆菌感受态细胞制备 | 第25页 |
2.2.8 载体构建 | 第25-29页 |
2.2.8.1 PCR反应 | 第25-26页 |
2.2.8.2 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第26页 |
2.2.8.3 连接与转化 | 第26-27页 |
2.2.8.4 质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.8.5 热激法转化大肠杆菌细胞 | 第28页 |
2.2.8.6 冻融法转化根癌农杆菌细胞 | 第28页 |
2.2.8.7 酶切反应 | 第28-29页 |
2.2.9 DNA产物纯化 | 第29页 |
2.2.10 农杆菌介导的小麦遗传转化实验 | 第29-32页 |
2.2.11 进化树分析 | 第32页 |
2.2.12 烟草瞬时转化 | 第32-33页 |
2.2.13 mRNA原位杂交实验 | 第33-38页 |
3 结果与分析 | 第38-52页 |
3.1 小麦WOX转录因子家族的鉴定及其进化、表达分析 | 第38-44页 |
3.1.1 小麦WOX转录因子家族成员鉴定和序列分析 | 第38-40页 |
3.1.2 系统发育分析 | 第40-41页 |
3.1.3 小麦WOX转录因子家族基因结构及蛋白保守基序分析 | 第41-44页 |
3.1.4 小麦WOX基因家族的基因表达分析 | 第44页 |
3.2 Ta WUS 的克隆及进化分析 | 第44-47页 |
3.3 TaWUSB蛋白的亚细胞定位 | 第47页 |
3.4 TaWUSB的表达模式分析 | 第47-48页 |
3.5 TaWUSB在拟南芥中的过量表达 | 第48-49页 |
3.6 TaWUSB在小麦中的过量表达 | 第49-52页 |
3.6.1 TaWUSB的小麦遗传转化 | 第49-50页 |
3.6.2 转基因株型的表型分析 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
附录 | 第65-68页 |