| 缩略语表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 文献回顾 | 第17-35页 |
| 一、椎间盘髓核免疫赦免是椎间盘退变发病的始动环节之一，免疫损伤是椎间盘退变的基本病理过程 | 第17-22页 |
| 1. 椎间盘是人体的一个免疫赦免位点，其免疫赦免状态是维持椎间盘正常生理功能的必要条件 | 第17-20页 |
| ·免疫赦免（Immune privilege） | 第17-18页 |
| ·正常椎间盘的生理结构 | 第18-20页 |
| ·正常椎间盘的结构 | 第18页 |
| ·髓核细胞和脊索细胞 | 第18页 |
| ·髓核细胞 | 第18-20页 |
| 2. 椎间盘对于免疫细胞的清除作用是其维持免疫赦免状态的必要条件 | 第20-21页 |
| 3. 免疫细胞对髓核细胞的杀伤是椎间盘退变的基本病理过程 | 第21页 |
| 4. 髓核细胞与免疫细胞之间正常的相互作用是维持椎间盘髓核免疫稳态的必要条件 | 第21-22页 |
| 二、FasL-Fas-FADD 系统参与介导髓核细胞与免疫细胞的相互杀伤 | 第22-27页 |
| 1.FasL-Fas-FADD 系统是介导细胞凋亡的关键分子 | 第22-25页 |
| ·Fas 和FasL 概述 | 第22-23页 |
| ·FasL 为免疫赦免的分子机制验证 | 第23-24页 |
| ·Fas-FasL 凋亡途径（Apoptotic signaling pathway） | 第24-25页 |
| 2.FADD 是调控细胞凋亡的中心节点 | 第25页 |
| 3.FasL-Fas-FADD 系统是免疫平衡状态的重要调控枢纽 | 第25页 |
| 4.FasL-Fas 可能参与维持椎间盘髓核的免疫赦免状态 | 第25-26页 |
| 5.FasL-FasL 介导髓核细胞与免疫细胞的相互杀伤及凋亡，在椎间盘退变中有重要研究价值 | 第26-27页 |
| 三、椎间盘退变的分子机制研究背景 | 第27-30页 |
| 1. 遗传因素 | 第27页 |
| 2. 年龄因素 | 第27-28页 |
| 3. 机械负荷因素（Mechanical stress） | 第28页 |
| 4. 降解酶及炎症因子因素 | 第28-29页 |
| 5. 凋亡和坏死因素 | 第29-30页 |
| 四、miR155 与FasL-Fas-FADD 系统 | 第30-35页 |
| 1.miRNA 概述 | 第30-31页 |
| 2.miR-155 在调控机体免疫系统方面发挥着重要作用 | 第31-32页 |
| 3.人miR-155 与凋亡相关蛋白 | 第32页 |
| 4.miRNA 的研究方法概论 | 第32-35页 |
| 第一部分 人椎间盘退变髓核的microRNA 芯片分析 | 第35-41页 |
| 1. 材料和方法 | 第35-36页 |
| ·标本收集 | 第35页 |
| ·RNA 分离 | 第35页 |
| ·MiRNA 芯片分析 | 第35-36页 |
| ·芯片结果统计分析 | 第36页 |
| 2. 结果 | 第36-41页 |
| ·RNA 质检结果 | 第36-37页 |
| ·退变髓核中miRNA 的差异表达及miR-155 下调 | 第37-41页 |
| 第二部分 人椎间盘髓核中miR-155 表达量的研究 | 第41-43页 |
| 1 材料和方法 | 第41-42页 |
| ·标本的收集 | 第41页 |
| ·髓核总RNA 的收集 | 第41页 |
| ·RT-PCR 使用引物列表 | 第41页 |
| ·实时定量PCR 检测miR-155 水平 | 第41-42页 |
| ·统计分析 | 第42页 |
| 2. 结果 | 第42-43页 |
| ·人退变髓核中miR-155 下调，证实了芯片分析结果 | 第42-43页 |
| 第三部分 人髓核细胞中miR-155 的调控 | 第43-50页 |
| 1 材料和方法 | 第43-46页 |
| ·髓核细胞的培养 | 第43页 |
| ·制备外源性miR-155 双链RNA | 第43页 |
| ·制备2’-氧甲基化修饰的人miR-155 单链反义寡核苷酸 | 第43页 |
| ·miR-155 靶蛋白的预测 | 第43-44页 |
| ·外源性miR-155 双链RNA 对FADD 及Caspase-3 表达的抑制作用 | 第44页 |
| ·miR-155 在人髓核细胞中的上调 | 第44-45页 |
| ·miR-155 在人髓核细胞中的下调（敲除，knockdown） | 第45页 |
| ·流式细胞仪分析检测调控miR-155 的髓核细胞凋亡 | 第45页 |
| ·统计分析 | 第45-46页 |
| 2 结果 | 第46-50页 |
| ·miR-155 可与FADD 及caspase-3 的3’UTR 作用 | 第46页 |
| ·人髓核细胞中miR-155 调控影响FADD，caspase-3 的表达水平 | 第46页 |
| ·人髓核细胞中调控miR-155 影响其凋亡水平 | 第46-50页 |
| 第四部分 人椎间盘髓核中miR-155、FADD 及caspase-3 表达的研究 | 第50-54页 |
| 1. 材料和方法 | 第50-51页 |
| ·组织切片准备 | 第50页 |
| ·冰冻切片中锁核酸探针原位杂交检测miR-155 的分布 | 第50页 |
| ·免疫组化检测FADD 及caspase-3 | 第50-51页 |
| ·免疫荧光探针的免疫组化染色 | 第51页 |
| ·ISH 及IHC 双标染色 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-54页 |
| 第五部分 人椎间盘髓核的电镜及流式研究 | 第54-60页 |
| 1 材料和方法 | 第54-55页 |
| ·透射电镜 | 第54页 |
| ·流式细胞分析 | 第54-55页 |
| ·髓核细胞的预消化 | 第54页 |
| ·流式细胞分析 | 第54页 |
| ·统计分析 | 第54-55页 |
| 2. 结果 | 第55-60页 |
| ·透射电镜：人髓核细胞形态多种多样，有长突起的髓核细胞存在于退变的椎间盘中，髓核细胞具有吞噬功能 | 第55-58页 |
| ·人髓核中髓核细胞主要为活细胞，退变的髓核中凋亡增加 | 第58-60页 |
| 第六部分 讨论 | 第60-68页 |
| 1. 本研究的创新之处及意义 | 第60-64页 |
| ·本研究为人退变椎间盘Fas 介导的凋亡增加提供了新的分子机制 | 第60-63页 |
| ·本研究阐明了髓核细胞新的生物学特性 | 第63-64页 |
| 2. 本研究的缺点 | 第64-65页 |
| 3. 未来研究的展望 | 第65-68页 |
| 参考文献 | 第68-92页 |
| 个人简历及研究成果 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
