| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 T G F - β信号通路 | 第9-14页 |
| 1.1.1 T G F - β超家族概述 | 第9-10页 |
| 1.1.2 T G F - β信号通路的原件 | 第10-12页 |
| 1.1.3 T G F - β信号的调控 | 第12-14页 |
| 1.2 热休克蛋白家族 | 第14-15页 |
| 1.2.1 热休克蛋白家族概述 | 第14页 |
| 1.2.2 H SP 70 的结构与功能 | 第14-15页 |
| 1.3 本课题研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第2章 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 仪器与实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第16页 |
| 2.2 材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.2.1 质粒的构建 | 第16-17页 |
| 2.2.2 质粒的大量提取 | 第17-18页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第19-20页 |
| 2.2.5 收集裂解细胞 | 第20页 |
| 2.2.6 免疫印记 | 第20-21页 |
| 2.2.7 GST pull down assay | 第21-22页 |
| 2.2.8 银染法以及质谱分析 | 第22页 |
| 2.2.9 免疫共沉淀 | 第22-23页 |
| 2.2.10 荧光素酶报告实验 | 第23页 |
| 2.2.11 细胞总R NA 的提取及RT-PCR、PCR | 第23-24页 |
| 2.2.12 细胞免疫荧光 | 第24-26页 |
| 第3章 HSP70 与Smad2 相互作用 | 第26-32页 |
| 3.1 引言 | 第26页 |
| 3.2 GST、GST-Smad2 和HA-HSP70 表达载体的构建 | 第26页 |
| 3.3 GST pull-down 筛选出潜在的Smad2 互作蛋白HSP70 | 第26-27页 |
| 3.4 Smad2 和HSP70 在不同物种间存在保守的相互作用 | 第27-29页 |
| 3.5 HSP70 与Smad2 直接相互作用 | 第29-30页 |
| 3.6 讨论 | 第30-32页 |
| 第4章 HSP70 负调控TGF- β信号转导 | 第32-36页 |
| 4.1 引言 | 第32页 |
| 4.2 过表达HSP70 下调Smad2 介导的TGF- β信号转导 | 第32-33页 |
| 4.3 Quercetin 促进Smad2 介导的TGF - β信号转导 | 第33页 |
| 4.4 沉默内源HSP70 的表达对TGF- β的影响 | 第33-35页 |
| 4.5 讨论 | 第35-36页 |
| 第5章 HSP70 在TGF- β信号转导中的作用机制 | 第36-42页 |
| 5.1 引言 | 第36页 |
| 5.2 HSP70 的细胞定位 | 第36-37页 |
| 5.3 TGF-β不影响HSP70 的转录以及与Smad2 的结合能力 | 第37-38页 |
| 5.4 过表达HSP70 抑制Smad 2 的磷酸化 | 第38-39页 |
| 5.5 HSP70 阻碍磷酸化Smad2 的细胞核进入 | 第39-40页 |
| 5.6 讨论 | 第40-42页 |
| 第6章 HSP70 抑制TGF-β诱导的上皮细胞向间充质细胞转化 | 第42-45页 |
| 6.1 引言 | 第42页 |
| 6.2 HSP70 过表达抑制TGF-β诱导Hacat 细胞EMT | 第42-43页 |
| 6.3 讨论 | 第43-45页 |
| 结语 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56页 |
