| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 符号说明 | 第7-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-11页 |
| 第2章 靶向 PRL-3 的 microRNA 分子预测 | 第11-27页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第11-14页 |
| 2.1.1 细胞株和胃组织 | 第11页 |
| 2.1.2 实验主要试剂 | 第11-12页 |
| 2.1.3 实验主要溶液的配制 | 第12-13页 |
| 2.1.4 实验主要仪器 | 第13-14页 |
| 2.2 方法 | 第14-23页 |
| 2.2.1 生物信息学软件分析可能调控 PRL-3 基因的 miRNA 分子 | 第14页 |
| 2.2.2 细胞培养、复苏和冻存 | 第14-15页 |
| 2.2.3 Western Blot 检测胃癌组织及胃癌细胞系中 PRL-3 蛋白表达情况 | 第15-19页 |
| 2.2.4 Real-time PCR 检测组织及细胞中 miRNA 及 PRL-3 mRNA 表达情况 | 第19-23页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-27页 |
| 2.3.1 靶向 PRL-3 基因的 miRNA 分子预测结果 | 第23-24页 |
| 2.3.2 胃癌细胞株及正常胃黏膜上皮细胞株中 PRL-3 蛋白及 mRNA 表达情况 | 第24-25页 |
| 2.3.3 miR-495 和 miR-551a 在胃癌中呈明显低表达 | 第25-27页 |
| 第3章 MiR-495 及 miR-551a 沉默 PRL-3 基因表达及抑制胃癌细胞侵袭迁移能力的研究 | 第27-37页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第27-29页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第27页 |
| 3.1.2 实验主要仪器 | 第27-28页 |
| 3.1.3 实验主要材料和试剂 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 设计并合成 miR-495 和 miR-551a 化学类似物 miRNA mimics | 第29页 |
| 3.2.2 miRNA mimics 瞬时转染胃癌细胞株 SGC7901、MKN28 | 第29-30页 |
| 3.2.3 荧光实时定量 RT-PCR 检测瞬时转染后细胞内 PRL-3 mRNA 表达变化 | 第30页 |
| 3.2.4 Western Blot 检测瞬时转染 miRNA mimics 后细胞内 PRL-3 蛋白表达变化 | 第30页 |
| 3.2.5 Transwell 小室实验检测瞬时转染 miRNA mimics 后细胞的侵袭迁移能力变化情况 | 第30-31页 |
| 3.2.6 统计学处理 | 第31页 |
| 3.3 实验结果 | 第31-37页 |
| 3.3.1 荧光倒置显微镜观察细胞转染 miRNA mimics 后带上 FAM 荧光 | 第31-32页 |
| 3.3.2 miR-495 和 miR-551a 抑制胃癌细胞 PRL-3 基因表达 | 第32-34页 |
| 3.3.3 miR-495 和 miR-551a 转染后胃癌细胞侵袭转移能力下降 | 第34-37页 |
| 第4章 讨论 | 第37-40页 |
| 第5章 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
| 综述 | 第46-51页 |
| 参考文献 | 第50-51页 |
