摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第13-21页 |
1 转基因抗虫作物的研究现状 | 第13页 |
2 cry基因家族及其利用情况 | 第13-14页 |
3 外源基因的分子检测方法 | 第14-16页 |
3.1 转基因作物的核酸检测技术 | 第14-15页 |
3.2 转基因作物的蛋白检测技术 | 第15-16页 |
4 转基因安全性评价的范畴 | 第16-17页 |
5 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
6 主要研究内容与技术路线 | 第18-21页 |
6.1 主要研究内容 | 第18页 |
6.2 技术路线 | 第18-21页 |
第二章 转crf1Ac基因甘蔗的分子鉴定 | 第21-33页 |
1 材料与方法 | 第21-24页 |
1.1 供试植物材料与基因组DNA | 第21页 |
1.2 阳性对照质粒DNA的制备与PCR检测 | 第21页 |
1.3 PCR引物和LAMP引物 | 第21-22页 |
1.4 LAMP体系优化 | 第22-23页 |
1.5 LAMP和常规PCR技术的敏感性检测 | 第23页 |
1.6 LAMP扩增产物的检测方法对比试验 | 第23页 |
1.7 甘蔗无性系检样的制备与LAMP和常规PCR检测 | 第23-24页 |
1.8 PCR法和LAMP法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定 | 第24页 |
2 结果与分析 | 第24-33页 |
2.1 质粒1Ac0229的获取和验证 | 第24-25页 |
2.2 LAMP检测技术体系的优化 | 第25-26页 |
2.3 LAMP和常规PCR技术的敏感性检测 | 第26-28页 |
2.4 LAMP扩增产物的不同检测方法效果比较 | 第28页 |
2.5 转cry1Ac基因甘蔗无性系的LAMP和常规PCR检测 | 第28-30页 |
2.6 PCR法和LAMP法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定 | 第30-33页 |
2.6.1 PCR法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定 | 第30-32页 |
2.6.2 LAMP法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定 | 第32-33页 |
第三章 转cry基因甘蔗的光合特性及工农艺性状研究 | 第33-39页 |
1 材料与方法 | 第33-34页 |
1.1 供试材料 | 第33页 |
1.2 试验方法 | 第33-34页 |
1.2.1 田间试验设计 | 第33页 |
1.2.2 工农艺性状调查 | 第33-34页 |
1.2.3 光合特性测定 | 第34页 |
1.2.4 螟害情况调查 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-39页 |
2.1 转cry1Ac基因甘蔗主要工农艺性状和净光合速率 | 第34-37页 |
2.2 转cry1Ac基因甘蔗的螟害情况 | 第37-39页 |
第四章 转cry1Ac基因甘蔗的环境安全性评价研究 | 第39-57页 |
1 材料与方法 | 第39-44页 |
1.1 供试材料 | 第39页 |
1.2 试验方法 | 第39-44页 |
1.2.1 田间试验设计 | 第39页 |
1.2.2 基因漂移研究 | 第39-41页 |
1.2.3 根际土壤微生物研究 | 第41-42页 |
1.2.4 根际土壤的酶活性研究 | 第42-44页 |
2 结果与分析 | 第44-57页 |
2.1 基因漂移研究结果及分析 | 第44-47页 |
2.1.1 蔗田杂草的基因漂移研究 | 第44-45页 |
2.1.2 蔗田部分非靶标昆虫的漂移研究 | 第45-46页 |
2.1.3 蔗田土壤微生物的漂移研究 | 第46-47页 |
2.2 根际土壤微生态研究 | 第47-53页 |
2.2.1 根际土壤微生物结构多样性的研究结果 | 第47-50页 |
2.2.2 根际土壤微生物的功能多样性研究 | 第50-53页 |
2.2.2.1 转cry1Ac基因甘蔗土壤微生物群落的AWCD动态变化 | 第50-51页 |
2.2.2.2 转cry1Ac基因甘蔗对土壤微生物碳源利用的影响 | 第51-53页 |
2.3 根际土壤酶活性的研究结果及分析 | 第53-57页 |
2.3.1 转cry1Ac基因甘蔗无性系根际土壤酶活性的动态变化趋势 | 第53-55页 |
2.3.2 转cry1Ac基因对甘蔗无性系土壤酶活性影响的方差分析 | 第55-57页 |
第五章 讨论与结论 | 第57-70页 |
1 讨论 | 第57-62页 |
1.1 关于环介导等温扩增技术的建立及应用 | 第57-59页 |
1.2 关于转cry1Ac基因甘蔗分子鉴定方法和遗传稳定性 | 第59-60页 |
1.3 关于转cry1Ac基因甘蔗对产量和品质的影响问题 | 第60-61页 |
1.4 关于转cry1Ac基因甘蔗的基因漂移问题 | 第61页 |
1.5 关于转cry1Ac基因甘蔗种植对土壤微生态的影响问题 | 第61-62页 |
2 结论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
附录 | 第70-74页 |
附录1 基因组DNA样品制备 | 第70页 |
附录2 土壤总DNA的提取 | 第70-71页 |
附录3 平板计数法用微生物培养基配方 | 第71-72页 |
附录4 主要仪器 | 第72-73页 |
附录5 常用术语缩写与中英文对照 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |