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转cry1Ac基因甘蔗的分子鉴定与中间试验评价

摘要第9-11页
Abstract第11-12页
第一章 前言第13-21页
    1 转基因抗虫作物的研究现状第13页
    2 cry基因家族及其利用情况第13-14页
    3 外源基因的分子检测方法第14-16页
        3.1 转基因作物的核酸检测技术第14-15页
        3.2 转基因作物的蛋白检测技术第15-16页
    4 转基因安全性评价的范畴第16-17页
    5 本研究的目的及意义第17-18页
    6 主要研究内容与技术路线第18-21页
        6.1 主要研究内容第18页
        6.2 技术路线第18-21页
第二章 转crf1Ac基因甘蔗的分子鉴定第21-33页
    1 材料与方法第21-24页
        1.1 供试植物材料与基因组DNA第21页
        1.2 阳性对照质粒DNA的制备与PCR检测第21页
        1.3 PCR引物和LAMP引物第21-22页
        1.4 LAMP体系优化第22-23页
        1.5 LAMP和常规PCR技术的敏感性检测第23页
        1.6 LAMP扩增产物的检测方法对比试验第23页
        1.7 甘蔗无性系检样的制备与LAMP和常规PCR检测第23-24页
        1.8 PCR法和LAMP法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定第24页
    2 结果与分析第24-33页
        2.1 质粒1Ac0229的获取和验证第24-25页
        2.2 LAMP检测技术体系的优化第25-26页
        2.3 LAMP和常规PCR技术的敏感性检测第26-28页
        2.4 LAMP扩增产物的不同检测方法效果比较第28页
        2.5 转cry1Ac基因甘蔗无性系的LAMP和常规PCR检测第28-30页
        2.6 PCR法和LAMP法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定第30-33页
            2.6.1 PCR法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定第30-32页
            2.6.2 LAMP法对拟转cry1Ac基因株系的分子鉴定第32-33页
第三章 转cry基因甘蔗的光合特性及工农艺性状研究第33-39页
    1 材料与方法第33-34页
        1.1 供试材料第33页
        1.2 试验方法第33-34页
            1.2.1 田间试验设计第33页
            1.2.2 工农艺性状调查第33-34页
            1.2.3 光合特性测定第34页
            1.2.4 螟害情况调查第34页
    2 结果与分析第34-39页
        2.1 转cry1Ac基因甘蔗主要工农艺性状和净光合速率第34-37页
        2.2 转cry1Ac基因甘蔗的螟害情况第37-39页
第四章 转cry1Ac基因甘蔗的环境安全性评价研究第39-57页
    1 材料与方法第39-44页
        1.1 供试材料第39页
        1.2 试验方法第39-44页
            1.2.1 田间试验设计第39页
            1.2.2 基因漂移研究第39-41页
            1.2.3 根际土壤微生物研究第41-42页
            1.2.4 根际土壤的酶活性研究第42-44页
    2 结果与分析第44-57页
        2.1 基因漂移研究结果及分析第44-47页
            2.1.1 蔗田杂草的基因漂移研究第44-45页
            2.1.2 蔗田部分非靶标昆虫的漂移研究第45-46页
            2.1.3 蔗田土壤微生物的漂移研究第46-47页
        2.2 根际土壤微生态研究第47-53页
            2.2.1 根际土壤微生物结构多样性的研究结果第47-50页
            2.2.2 根际土壤微生物的功能多样性研究第50-53页
                2.2.2.1 转cry1Ac基因甘蔗土壤微生物群落的AWCD动态变化第50-51页
                2.2.2.2 转cry1Ac基因甘蔗对土壤微生物碳源利用的影响第51-53页
        2.3 根际土壤酶活性的研究结果及分析第53-57页
            2.3.1 转cry1Ac基因甘蔗无性系根际土壤酶活性的动态变化趋势第53-55页
            2.3.2 转cry1Ac基因对甘蔗无性系土壤酶活性影响的方差分析第55-57页
第五章 讨论与结论第57-70页
    1 讨论第57-62页
        1.1 关于环介导等温扩增技术的建立及应用第57-59页
        1.2 关于转cry1Ac基因甘蔗分子鉴定方法和遗传稳定性第59-60页
        1.3 关于转cry1Ac基因甘蔗对产量和品质的影响问题第60-61页
        1.4 关于转cry1Ac基因甘蔗的基因漂移问题第61页
        1.5 关于转cry1Ac基因甘蔗种植对土壤微生态的影响问题第61-62页
    2 结论第62-64页
    参考文献第64-70页
附录第70-74页
    附录1 基因组DNA样品制备第70页
    附录2 土壤总DNA的提取第70-71页
    附录3 平板计数法用微生物培养基配方第71-72页
    附录4 主要仪器第72-73页
    附录5 常用术语缩写与中英文对照第73-74页
致谢第74页

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