摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 剪接因子SF3的研究进展 | 第8-14页 |
1. SF3a的组成成分及作用 | 第8-10页 |
2. SF3b的组成成分及作用 | 第10-11页 |
3. SF3b3亚基的研究进展 | 第11-14页 |
3.1 酵母SF3b3的研究 | 第11页 |
3.2 动物SF3b3的研究 | 第11-12页 |
3.3 植物SF3b3的研究 | 第12-14页 |
第二章 水稻OsSF3b3互作蛋白的酵母双杂分析 | 第14-20页 |
1. 材料和方法 | 第14-16页 |
1.1 植物材料 | 第14页 |
1.2 质粒和菌株 | 第14页 |
1.3 水稻育苗 | 第14页 |
1.4 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第14-15页 |
1.5 酵母Y2H GOLD感受态细胞的制备 | 第15页 |
1.6 重组质粒转化酵母 | 第15-16页 |
2. 结果分析 | 第16-19页 |
2.1 OsSF3b3与OsSF3b其它亚基的酵母双杂载体构建 | 第16-17页 |
2.2 OsSF3b3与OsSF3b其它亚基的蛋白互作情况 | 第17-19页 |
3. 结果讨论 | 第19-20页 |
第三章 OsSF3b3原核表达 | 第20-28页 |
1. 材料和方法 | 第20-23页 |
1.1 质粒、菌株及抗体 | 第20页 |
1.2 载体的构建 | 第20页 |
1.3 BL21(DE3)感受态的制备 | 第20-21页 |
1.4 载体转化BL21(DE3) | 第21页 |
1.5 BL21-pET-30a(+)-OsSF3b3的诱导表达 | 第21页 |
1.6 SDS-PAGE电泳分析 | 第21-22页 |
1.7 SDS-PAGE考马斯亮蓝凝胶染色与脱色 | 第22页 |
1.8 重组融合蛋白His:OsSF3b3的可溶性检测 | 第22页 |
1.9 Western blot | 第22-23页 |
2 结果分析 | 第23-26页 |
2.1 OsSF3b3原核表达载体的构建 | 第23-24页 |
2.2 OsSF3b3蛋白的原核表达 | 第24-25页 |
2.3 Western Blot结果 | 第25-26页 |
3. 结果讨论 | 第26-28页 |
第四章 OsSF3b3:GST融合表达转基因水稻的构建 | 第28-36页 |
1. 材料和方法 | 第28-31页 |
1.1 植物材料 | 第28页 |
1.2 质粒和菌株 | 第28页 |
1.3 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第28-30页 |
1.3.1 载体构建 | 第28-29页 |
1.3.2 质粒转化农杆菌感受态EHA105 | 第29页 |
1.3.3 水稻遗传转化 | 第29-30页 |
1.4 水稻基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
1.5 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第31页 |
1.6 转基因植株的PCR检测 | 第31页 |
1.7 转基因水稻RT-PCR分析 | 第31页 |
2. 结果与分析 | 第31-34页 |
2.1 融合表达载体的构建和转基因研究 | 第31-32页 |
2.2 转基因植株阳性检测 | 第32-33页 |
2.3 转基因水稻植株的RT-PCR检测 | 第33-34页 |
3. 讨论 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-42页 |
附录 | 第42-46页 |
致谢 | 第46-48页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第48-50页 |