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新城疫F48E9毒株与Lasota毒株感染鸡后外周血部分细胞因子差异表达的研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
英文缩略词表第11-13页
1. 文献综述第13-31页
   ·新城疫病毒的概述第13-21页
     ·新城疫病毒的历史与分类地位第13-14页
     ·新城疫病毒的一般特性第14-16页
     ·新城疫病毒的分子生物学特性第16-17页
     ·新城疫病毒致病的分子基础第17-19页
     ·新城疫病毒的检测与诊断第19页
     ·新城疫病毒的分子流行病学第19-21页
   ·家禽细胞因子研究进展第21-26页
   ·实时荧光定量PCR第26-29页
     ·Real-time PCR的原理第26-28页
     ·几类常见的Real-time PCR技术第28-29页
   ·选题目的与意义第29-31页
2. 材料与方法第31-42页
   ·实验材料与实验仪器第31-34页
     ·实验动物、病毒、菌株第31页
     ·主要实验仪器第31-32页
     ·主要购买试剂及其它配制试剂第32-34页
   ·实验方法第34-42页
     ·新城疫病毒F48E9毒株EID50的测定第34页
     ·Real-time PCR引物的设计第34-35页
     ·质粒标准品的构建第35-38页
       ·细胞因子与NDV基因的PCR扩增第35页
       ·细胞因子与NDV基因的PCR产物的胶回收第35-36页
       ·感受态细胞的制作第36页
       ·PCR产物的克隆与转化第36-37页
       ·重组质粒的筛选与鉴定第37-38页
       ·细胞因子基因的DNA序列测定第38页
     ·Real-time PCR条件的优化第38页
     ·标准曲线的生成第38-39页
       ·Real-time PCR标准品目的DNA模板浓度的测定第38页
       ·Real-time PCR标准品的稀释与标准曲线的生成第38-39页
     ·动物感染NDV与样品的采集第39页
       ·动物的分组与NDV抗体的测定第39页
       ·实验动物感染NDV第39页
       ·实验动物外周血的采集第39页
     ·RNA的提取与反转录第39-41页
       ·RNA的提取第39-40页
       ·RNA质量的抽查第40页
       ·反转录反应第40-41页
     ·Real-time PCR反应第41页
     ·数据的处理与统计第41-42页
3. 结果第42-65页
   ·新城疫病毒F48E9毒株ELD50的测定值第42页
   ·普通PCR电泳条带第42-43页
   ·重组质粒的鉴定第43-44页
   ·测序结果与同源性的比较第44页
   ·质粒标准品OD260的测定第44-45页
   ·Real-time PCR条件优化结果第45页
   ·Real-time PCR标准曲线第45-52页
     ·Beta-actin标准曲线的制作第45-46页
     ·IFN alpha标准曲线的制作第46-47页
     ·IFN gamma标准曲线的制作第47页
     ·IL-2标准曲线的制作第47-48页
     ·IL-6标准曲线的制作第48页
     ·IL-10标准曲线的制作第48-49页
     ·IL-13标准曲线的制作第49-50页
     ·IL-15标准曲线的制作第50页
     ·IL-16标准曲线的制作第50-51页
     ·IL-18标准曲线的制作第51页
     ·NDV标准曲线的制作第51-52页
   ·Real-time PCR结果第52-65页
     ·NDV在外周血的载量变化规律第52-53页
     ·细胞因子的差异表达状况第53-65页
       ·IFN alpha的差异表达状况第53-55页
       ·IFN gamma的差异表达状况第55-56页
       ·IL-2的差异表达状况第56-58页
       ·IL-6的差异表达状况第58页
       ·IL-10的差异表达状况第58-59页
       ·IL-13的差异表达状况第59-61页
       ·IL-15的差异表达状况第61-62页
       ·IL-16的差异表达状况第62-63页
       ·IL-18的差异表达状况第63-65页
4. 讨论第65-70页
   ·外周血中新城疫病毒Real-time PCR检测方法的建立第65页
   ·NDV不同毒株在外周血中载量的变化规律第65-66页
     ·F48E9毒株在外周血中载量的变化规律第65页
     ·Lasota毒株在外周血中载量的变化规律第65-66页
     ·F48E9毒株与Lasota毒株在外周血中载量的变化规律的差异第66页
   ·成年鸡感染NDV后外周血细胞中细胞因子的差异表达第66-70页
     ·IFN alpha基因的差异表达第66-67页
     ·IFN gamma基因的差异表达第67页
     ·IL-2与IL-15基因的差异表达第67-68页
     ·IL-6基因的差异表达第68页
     ·IL-10基因的差异表达第68页
     ·IL-13基因的差异表达第68页
     ·IL-16与IL-18基因的差异表达第68-70页
5. 参考文献第70-79页
6. 致谢第79页

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