中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
1. 文献综述 | 第13-31页 |
·新城疫病毒的概述 | 第13-21页 |
·新城疫病毒的历史与分类地位 | 第13-14页 |
·新城疫病毒的一般特性 | 第14-16页 |
·新城疫病毒的分子生物学特性 | 第16-17页 |
·新城疫病毒致病的分子基础 | 第17-19页 |
·新城疫病毒的检测与诊断 | 第19页 |
·新城疫病毒的分子流行病学 | 第19-21页 |
·家禽细胞因子研究进展 | 第21-26页 |
·实时荧光定量PCR | 第26-29页 |
·Real-time PCR的原理 | 第26-28页 |
·几类常见的Real-time PCR技术 | 第28-29页 |
·选题目的与意义 | 第29-31页 |
2. 材料与方法 | 第31-42页 |
·实验材料与实验仪器 | 第31-34页 |
·实验动物、病毒、菌株 | 第31页 |
·主要实验仪器 | 第31-32页 |
·主要购买试剂及其它配制试剂 | 第32-34页 |
·实验方法 | 第34-42页 |
·新城疫病毒F48E9毒株EID50的测定 | 第34页 |
·Real-time PCR引物的设计 | 第34-35页 |
·质粒标准品的构建 | 第35-38页 |
·细胞因子与NDV基因的PCR扩增 | 第35页 |
·细胞因子与NDV基因的PCR产物的胶回收 | 第35-36页 |
·感受态细胞的制作 | 第36页 |
·PCR产物的克隆与转化 | 第36-37页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第37-38页 |
·细胞因子基因的DNA序列测定 | 第38页 |
·Real-time PCR条件的优化 | 第38页 |
·标准曲线的生成 | 第38-39页 |
·Real-time PCR标准品目的DNA模板浓度的测定 | 第38页 |
·Real-time PCR标准品的稀释与标准曲线的生成 | 第38-39页 |
·动物感染NDV与样品的采集 | 第39页 |
·动物的分组与NDV抗体的测定 | 第39页 |
·实验动物感染NDV | 第39页 |
·实验动物外周血的采集 | 第39页 |
·RNA的提取与反转录 | 第39-41页 |
·RNA的提取 | 第39-40页 |
·RNA质量的抽查 | 第40页 |
·反转录反应 | 第40-41页 |
·Real-time PCR反应 | 第41页 |
·数据的处理与统计 | 第41-42页 |
3. 结果 | 第42-65页 |
·新城疫病毒F48E9毒株ELD50的测定值 | 第42页 |
·普通PCR电泳条带 | 第42-43页 |
·重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
·测序结果与同源性的比较 | 第44页 |
·质粒标准品OD260的测定 | 第44-45页 |
·Real-time PCR条件优化结果 | 第45页 |
·Real-time PCR标准曲线 | 第45-52页 |
·Beta-actin标准曲线的制作 | 第45-46页 |
·IFN alpha标准曲线的制作 | 第46-47页 |
·IFN gamma标准曲线的制作 | 第47页 |
·IL-2标准曲线的制作 | 第47-48页 |
·IL-6标准曲线的制作 | 第48页 |
·IL-10标准曲线的制作 | 第48-49页 |
·IL-13标准曲线的制作 | 第49-50页 |
·IL-15标准曲线的制作 | 第50页 |
·IL-16标准曲线的制作 | 第50-51页 |
·IL-18标准曲线的制作 | 第51页 |
·NDV标准曲线的制作 | 第51-52页 |
·Real-time PCR结果 | 第52-65页 |
·NDV在外周血的载量变化规律 | 第52-53页 |
·细胞因子的差异表达状况 | 第53-65页 |
·IFN alpha的差异表达状况 | 第53-55页 |
·IFN gamma的差异表达状况 | 第55-56页 |
·IL-2的差异表达状况 | 第56-58页 |
·IL-6的差异表达状况 | 第58页 |
·IL-10的差异表达状况 | 第58-59页 |
·IL-13的差异表达状况 | 第59-61页 |
·IL-15的差异表达状况 | 第61-62页 |
·IL-16的差异表达状况 | 第62-63页 |
·IL-18的差异表达状况 | 第63-65页 |
4. 讨论 | 第65-70页 |
·外周血中新城疫病毒Real-time PCR检测方法的建立 | 第65页 |
·NDV不同毒株在外周血中载量的变化规律 | 第65-66页 |
·F48E9毒株在外周血中载量的变化规律 | 第65页 |
·Lasota毒株在外周血中载量的变化规律 | 第65-66页 |
·F48E9毒株与Lasota毒株在外周血中载量的变化规律的差异 | 第66页 |
·成年鸡感染NDV后外周血细胞中细胞因子的差异表达 | 第66-70页 |
·IFN alpha基因的差异表达 | 第66-67页 |
·IFN gamma基因的差异表达 | 第67页 |
·IL-2与IL-15基因的差异表达 | 第67-68页 |
·IL-6基因的差异表达 | 第68页 |
·IL-10基因的差异表达 | 第68页 |
·IL-13基因的差异表达 | 第68页 |
·IL-16与IL-18基因的差异表达 | 第68-70页 |
5. 参考文献 | 第70-79页 |
6. 致谢 | 第79页 |