| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第13-15页 |
| 2 材料和方法 | 第15-33页 |
| 2.1 材料 | 第15-21页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第15页 |
| 2.1.2 细胞系来源 | 第15页 |
| 2.1.3 质粒 | 第15-17页 |
| 2.1.4 引物 | 第17页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.6 主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.1.7 常用试剂配制 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.2.1 标本中miR-192的表达检测 | 第21-22页 |
| 2.2.2 标本中TCF7的表达检测 | 第22-24页 |
| 2.2.3 检测细胞中miR-192和TCF7 mRNA的表达 | 第24-25页 |
| 2.2.4 将miR-192转染入骨肉瘤细胞U-2OS和MG63 | 第25页 |
| 2.2.5 转染效果检测 | 第25页 |
| 2.2.6 细胞增殖实验 | 第25-26页 |
| 2.2.7 细胞凋亡实验 | 第26-27页 |
| 2.2.8 细胞侵袭实验 | 第27-28页 |
| 2.2.9 细胞划痕实验 | 第28页 |
| 2.2.10 靶基因预测 | 第28页 |
| 2.2.11 Western blot实验检测TCF7蛋白的表达 | 第28页 |
| 2.2.12 双荧光素酶报告实验 | 第28-32页 |
| 2.2.13 Western blot实验检测TCF7、CyclinD1、Snail和Survivin蛋白表达 | 第32页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第32-33页 |
| 3 实验结果 | 第33-43页 |
| 3.1 骨肉瘤组织中miR-192和TCF7的表达及相关性 | 第33-34页 |
| 3.2 正常成骨细胞和骨肉瘤细胞中miR-192与TCF7 mRNA的表达 | 第34页 |
| 3.3 骨肉瘤细胞的转染效果检测 | 第34页 |
| 3.4 miR-192对骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第34-35页 |
| 3.5 miR-192对骨肉瘤细胞凋亡的影响 | 第35-37页 |
| 3.6 miR-192对骨肉瘤细胞侵袭的影响 | 第37-38页 |
| 3.7 miR-192对骨肉瘤细胞迁移能力的影响 | 第38页 |
| 3.8 miR-192靶基因的预测 | 第38-39页 |
| 3.9 Western blot验证miR-192的靶基因 | 第39页 |
| 3.10 双荧光素酶报告实验验证miR-192的靶点 | 第39-42页 |
| 3.10.1 Pmir-Glo-TCF7重组报告基因载体的构建 | 第39-41页 |
| 3.10.2 双荧光素酶报告实验结果 | 第41-42页 |
| 3.11 Western blot检测TCF7、CyclinD1、Survivin和Snail的表达 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 6 参考文献 | 第46-49页 |
| 综述 | 第49-59页 |
| 参考文献 | 第59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 中英文缩略词表 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
