| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 大菱鲆迟缓爱德华氏菌病研究进展 | 第12-19页 |
| 1.1.1 大菱鲆简介 | 第12页 |
| 1.1.2 缓爱德华氏菌生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 流行病学研究 | 第13-14页 |
| 1.1.4 迟缓爱德华氏菌致病机理 | 第14-15页 |
| 1.1.5 爱德华氏菌病的预防和治疗 | 第15-19页 |
| 1.2 卵黄抗体研究进展 | 第19-24页 |
| 1.2.1 IgY的结构与特点 | 第19-20页 |
| 1.2.2 IgY的理化特性 | 第20页 |
| 1.2.3 IgY的作用机理 | 第20-21页 |
| 1.2.4 IgY在水生和陆生动物饲料及疾病防治中的应用 | 第21-24页 |
| 1.3 本论文的研究目的及主要内容 | 第24-25页 |
| 2 抗迟缓爱德华氏菌特异性IgY的制备 | 第25-41页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料及设备 | 第25-28页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第25-26页 |
| 2.2.2 实验病原菌 | 第26页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第27页 |
| 2.2.5 溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.3.1 迟缓爱德华氏菌的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 缓爱德华氏菌的培养及生长曲线测定 | 第29页 |
| 2.3.3 免疫原的制备 | 第29-30页 |
| 2.3.4 蛋鸡的免疫 | 第30页 |
| 2.3.5 水溶性组分的提取 | 第30页 |
| 2.3.6 酶联免疫吸附实验(ELISA)检测特异性IgY抗体效价 | 第30-32页 |
| 2.3.7 IgY的分离与纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.8 BCA法测定蛋白质含量 | 第33页 |
| 2.3.9 SDS-PAGE检测抗体纯度 | 第33-34页 |
| 2.3.10 特异性IgY与同属其他迟缓爱德华氏菌株的结合活性 | 第34-35页 |
| 2.4 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.4.1 迟缓爱德华氏菌16S rRNA鉴定及系统发育分析 | 第35页 |
| 2.4.2 抗原最佳包被浓度及抗体稀释倍数的确定 | 第35-36页 |
| 2.4.3 抗迟缓爱德华氏菌特异性IgY效价变化趋势 | 第36-37页 |
| 2.4.4 BCA法测定蛋白质含量 | 第37页 |
| 2.4.5 SDS-PAGE检测抗体纯化程度 | 第37-38页 |
| 2.4.6 特异性IgY与其它分离迟缓爱德华氏菌株的结合活性 | 第38-39页 |
| 2.5 讨论 | 第39-40页 |
| 2.6 小结 | 第40-41页 |
| 3 特异性卵黄抗体对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌作用研究 | 第41-52页 |
| 3.1 前言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料及设备 | 第41-42页 |
| 3.2.1 实验菌种 | 第41页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 IgY对病原菌的体外抑菌生长试验 | 第42页 |
| 3.2.2 免疫荧光与透射电镜 | 第42-43页 |
| 3.2.3 扫描电镜观察特异性IgY对菌体的作用 | 第43页 |
| 3.2.4 IgY对病原菌生物被膜形成的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.5 IgY对病原菌疏水性的影响 | 第44页 |
| 3.2.6 IgY对病原菌菌体细胞壁完整性的影响 | 第44页 |
| 3.2.7 统计学分析 | 第44-45页 |
| 3.4 结果与分析 | 第45-50页 |
| 3.4.1 IgY对病原菌的体外生长抑制 | 第45-46页 |
| 3.4.2 免疫荧光与透射电镜 | 第46-47页 |
| 3.4.3 扫描电镜观察特异性IgY对菌体表面的作用 | 第47页 |
| 3.4.4 IgY对病原菌生物被膜形成的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.5 IgY对病原菌疏水性的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.6 IgY对病原菌细胞壁完整性的影响 | 第49-50页 |
| 3.5 讨论 | 第50-51页 |
| 3.6 小结 | 第51-52页 |
| 4 卵黄抗体对攻毒大菱鲆的被动保护效果研究 | 第52-71页 |
| 4.1 前言 | 第52页 |
| 4.2 实验材料及设备 | 第52-54页 |
| 4.2.1 试剂 | 第52-53页 |
| 4.2.2 仪器 | 第53页 |
| 4.2.3 实验动物 | 第53-54页 |
| 4.2.4 菌种 | 第54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-59页 |
| 4.3.1 灌胃特异性IgY对大菱鲆存活率的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.2 不同时间灌胃特异性IgY对大菱鲆存活率的影响 | 第55页 |
| 4.3.3 大菱鲆体内脏器菌数变化 | 第55页 |
| 4.3.4 饲喂特异性IgY对大菱鲆的预防保护作用 | 第55-56页 |
| 4.3.5 IgY对大菱鲆头肾巨噬细胞吞噬作用的影响 | 第56-58页 |
| 4.3.6 IgY对大菱鲆非特异性免疫酶学指标测定 | 第58页 |
| 4.3.7 统计学分析 | 第58-59页 |
| 4.4 结果与分析 | 第59-69页 |
| 4.4.1 灌胃特异性IgY对大菱鲆存活率的影响 | 第59-60页 |
| 4.4.2 不同时间灌胃特异性IgY对大菱鲆存活率的影响 | 第60-61页 |
| 4.4.3 攻毒大菱鲆体内脏器菌数变化 | 第61-62页 |
| 4.4.4 饲喂特异性IgY对大菱鲆的预防保护作用 | 第62-64页 |
| 4.4.5 IgY对大菱鲆头肾巨噬细胞吞噬作用的影响 | 第64-65页 |
| 4.4.6 IgY对大菱鲆非特异性免疫酶学指标测定 | 第65-69页 |
| 4.5 讨论 | 第69-70页 |
| 4.6 小结 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
