摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-22页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第13-14页 |
1.2 PRRSV病原学特性 | 第14-17页 |
1.2.1 PRRSV的生物学特性 | 第14-15页 |
1.2.2 PRRSV基因组结构 | 第15-16页 |
1.2.3 PRRSV基因组编码的蛋白 | 第16-17页 |
1.2.4 PRRSV的感染机制 | 第17页 |
1.3 PRRSV引起宿主的免疫学反应 | 第17-19页 |
1.3.1 先天性免疫 | 第17-18页 |
1.3.2 获得性免疫 | 第18-19页 |
1.4 RNase L研究进展 | 第19-22页 |
第2章 目的与意义 | 第22-23页 |
第3章 猪核糖核酸酶L真核表达载体的构建 | 第23-39页 |
3.1 材料与方法 | 第24-34页 |
3.1.1 材料 | 第24-25页 |
3.1.2 方法 | 第25-34页 |
3.2 结果与分析 | 第34-37页 |
3.2.1 目的基因sRNase L的扩增 | 第34-35页 |
3.2.2 真核表达载体pXJ41-sRNase L双酶切并测序鉴定 | 第35-36页 |
3.2.3 Western blotting检测sRNase L基因在MARC-145细胞中的表达 | 第36-37页 |
3.3 结论 | 第37-39页 |
第4章 PRRSV N蛋白及IFN-β SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立 | 第39-48页 |
4.1 材料与方法 | 第41-44页 |
4.1.1 材料 | 第41页 |
4.1.2 方法 | 第41-44页 |
4.2 结果与分析 | 第44-47页 |
4.2.1 质粒标准品的制备 | 第44页 |
4.2.2 Real-time PCR反应条件的优化 | 第44页 |
4.2.3 Real-time PCR标准曲线的建立 | 第44-46页 |
4.2.4 Real-time PCR敏感性试验 | 第46页 |
4.2.5 Real-time PCR特异性分析 | 第46页 |
4.2.6 Real-time PCR重复性分析 | 第46-47页 |
4.3 结论 | 第47-48页 |
第5章 sRNase L抗PRRSV活性及其机制初步研究 | 第48-64页 |
5.1 材料与方法 | 第49-54页 |
5.1.1 材料 | 第49-50页 |
5.1.2 方法 | 第50-54页 |
5.2 结果与分析 | 第54-61页 |
5.2.1 转染pXJ41-sRNase L后MARC-145细胞增殖PRRSV能力的测定 | 第54-59页 |
5.2.2 转染pXJ41-sRNase L后MARC-145细胞内IFN-β表达量的测定结果 | 第59-60页 |
5.2.3 转染pXJ41-sRNase L后MARC-145细胞内ISRE的活性测定结果 | 第60-61页 |
5.3 讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读学位期间发表的学术论文和参加科研情况 | 第79-80页 |
附件 | 第80页 |