| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 雄性不育的概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 植物雄性不育的概念 | 第12页 |
| 1.1.2 植物雄性不育的分类 | 第12-13页 |
| 1.2 大葱雄性不育的来源 | 第13-14页 |
| 1.2.1 通过自然变异获取大葱雄性不育系 | 第13页 |
| 1.2.2 通过种间杂交获得大葱雄性不育系 | 第13-14页 |
| 1.2.3 通过基因工程获得大葱雄性不育系 | 第14页 |
| 1.3 大葱雄性不育机理的研究 | 第14-15页 |
| 1.3.1 大葱细胞质雄性不育在形态水平的表现 | 第14页 |
| 1.3.2 大葱细胞质雄性不育细胞形态学研究 | 第14-15页 |
| 1.3.3 大葱雄性不育的分子机理研究 | 第15页 |
| 1.4 植物细胞质雄性不育相关基因的研究开发 | 第15-17页 |
| 1.5 植物雄性不育在生产中的应用 | 第17页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植株材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 内容与方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 大葱总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 RNA环化 | 第20页 |
| 2.2.3 RNA反转录及PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.4 目的片段的回收 | 第21页 |
| 2.2.5 目的片段的克隆 | 第21页 |
| 2.2.6 目的基因全长的拼接及全长的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.7 系统发育树分析 | 第22页 |
| 2.2.8 制备荧光荧光定量双标曲线cDNA模板 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-46页 |
| 3.1 CR-RT-PCR技术结果与分析 | 第23-27页 |
| 3.1.1 RNA检测 | 第23页 |
| 3.1.2 CR-RT-PCR反应中RNA环化反应条件的优化 | 第23-24页 |
| 3.1.3 cob内部基因的扩增 | 第24-25页 |
| 3.1.4 cob序列测定与氨基酸结构分析 | 第25-26页 |
| 3.1.5 系统发育分析 | 第26-27页 |
| 3.2 雄性不育候选基因克隆结果与分析 | 第27-44页 |
| 3.2.1 atp6基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第27-29页 |
| 3.2.2 atpA基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 3.2.3 nad9基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第31-34页 |
| 3.2.4 nad5基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.2.5 orf192基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第36-38页 |
| 3.2.6 orf111基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第38-40页 |
| 3.2.7 orf100基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 3.2.8 mat-R基因全长的克隆与生物信息学分析 | 第41-44页 |
| 3.3 雄性不育候选基因的qRT-PCR表达分析 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| 4.1 CR-RT-PCR技术的探究 | 第46页 |
| 4.2 线粒体能量代谢基因atp6与大葱CMS的关系 | 第46-47页 |
| 4.3 线粒体能量代谢基因atpA与大葱CMS的关系 | 第47-48页 |
| 4.4 NADH脱氢酶复合体基因与大葱CMS关系 | 第48页 |
| 4.5 orfs基因与大葱CMS关系 | 第48-49页 |
| 4.6 mat-R基因与CMS关系 | 第49-51页 |
| 5 全文总结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
