| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-29页 |
| 1.1 ALV的基本特征 | 第16-18页 |
| 1.1.1 ALV毒株分类 | 第16页 |
| 1.1.2 ALV病毒的复制方式 | 第16-17页 |
| 1.1.3 ALV基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.2 ALV-J的诊断与防控 | 第18-21页 |
| 1.2.1 ALV-J的临床症状和大体病变 | 第18页 |
| 1.2.2 ALV-J的实验室诊断 | 第18-19页 |
| 1.2.3 ALV-J的防控 | 第19-21页 |
| 1.3 腺病毒载体疫苗及RNAi研究进展 | 第21-25页 |
| 1.3.1 腺病毒载体疫苗的研究 | 第21-22页 |
| 1.3.2 RNAi的研究 | 第22-24页 |
| 1.3.3 ALV-J的RNAi研究进展 | 第24-25页 |
| 1.4 DNA疫苗 | 第25-27页 |
| 1.4.1 DNA疫苗的优点 | 第25页 |
| 1.4.2 DNA疫苗的免疫方法 | 第25页 |
| 1.4.3 DNA疫苗的作用机制 | 第25-26页 |
| 1.4.4 DNA疫苗的应用 | 第26-27页 |
| 1.4.5 ALV-J DNA疫苗的研究进展 | 第27页 |
| 1.5 ALV-J的其他疫苗 | 第27页 |
| 1.6 本课题研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 一株ALV-J分离鉴定及全基因序列分析 | 第29-44页 |
| 2.1 仪器和材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 仪器 | 第29页 |
| 2.1.2 试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 样品采集与处理 | 第29-30页 |
| 2.1.4 细胞、菌株与载体 | 第30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 ALV-J的分离鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.2 ALV-J分离株的全基因序列测定 | 第31-35页 |
| 2.2.3 ALV-J分离株与参考株的序列比对 | 第35-36页 |
| 2.3 数据处理与分析 | 第36页 |
| 2.4 试验结果 | 第36-41页 |
| 2.4.1 剖检状况 | 第36页 |
| 2.4.2 ALV-J分离鉴定的结果 | 第36-38页 |
| 2.4.3 ALV-J全基因序列测定结果 | 第38-39页 |
| 2.4.4 GDMM与参考株全基因序列分析比对结果 | 第39-41页 |
| 2.5 小结与讨论 | 第41-44页 |
| 2.5.1 从鸡场发病鸡中,成功分离到一株ALV-J | 第41-42页 |
| 2.5.2 将GDMM与参考株进行相似性分析 | 第42页 |
| 2.5.3 两广地区部分ALV-J毒株亲缘关系的分析 | 第42-44页 |
| 第三章 腺病毒介导的RNAi在鸡体内干扰效果的研究 | 第44-62页 |
| 3.1 试验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第44页 |
| 3.1.2 重组腺病毒介导的RNAi、细胞、载体 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第44-45页 |
| 3.1.4 生化试剂 | 第45页 |
| 3.1.5 试验地点 | 第45页 |
| 3.2 试验方法 | 第45-50页 |
| 3.2.1 接种病毒液的制备 | 第45-46页 |
| 3.2.2 重组腺病毒荧光定量检测方法的建立 | 第46-49页 |
| 3.2.3 重组腺病毒RNAi试验前试验动物的选择 | 第49页 |
| 3.2.4 重组腺病毒的接种 | 第49-50页 |
| 3.2.5 试验材料的采取及处理 | 第50页 |
| 3.3 免疫效果的检测 | 第50-51页 |
| 3.3.1 生长状况统计 | 第50页 |
| 3.3.2 蛋清p27抗原检测 | 第50页 |
| 3.3.3 病毒分离 | 第50-51页 |
| 3.3.4 胎粪抗原检测 | 第51页 |
| 3.3.5 实时荧光定量PCR检测 | 第51页 |
| 3.4 数据处理与分析 | 第51页 |
| 3.5 试验结果 | 第51-60页 |
| 3.5.1 重组腺病毒滴度的测定结果 | 第51-52页 |
| 3.5.2 标准曲线构建的结果 | 第52-56页 |
| 3.5.3 生长状况的统计结果 | 第56页 |
| 3.5.4 蛋清p27抗原的检测结果 | 第56-57页 |
| 3.5.5 病毒分离的结果 | 第57-58页 |
| 3.5.6 胎粪抗原检测结果 | 第58页 |
| 3.5.7 荧光定量PCR检测结果 | 第58-60页 |
| 3.6 小结与讨论 | 第60-62页 |
| 3.6.1 本研究成功构建了重组腺病毒RFP基因的荧光定量检测方法 | 第60页 |
| 3.6.2 重组腺病毒介导的RNAi对ALV-J的具有较好的抑制效果 | 第60-61页 |
| 3.6.3 重组腺病毒介导的RNAi疫苗的免疫建议 | 第61-62页 |
| 第四章 DNA疫苗在鸡体内免疫效果的研究 | 第62-68页 |
| 4.1 试验材料 | 第62-63页 |
| 4.1.1 试验动物和DNA疫苗 | 第62页 |
| 4.1.2 主要生化试剂 | 第62页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第62-63页 |
| 4.2 试验方法 | 第63-64页 |
| 4.2.1 DNA疫苗的制备 | 第63页 |
| 4.2.2 DNA疫苗试验前试验动物的选择 | 第63页 |
| 4.2.3 DNA疫苗的免疫 | 第63-64页 |
| 4.2.4 试验材料的采集及处理 | 第64页 |
| 4.3 免疫效果的检测 | 第64页 |
| 4.3.1 生长状况的统计 | 第64页 |
| 4.3.2 母鸡血清中抗体的检测 | 第64页 |
| 4.3.3 后代雏鸡血清中母源抗体的检测 | 第64页 |
| 4.4 数据处理与分析 | 第64页 |
| 4.5 试验结果 | 第64-66页 |
| 4.5.1 DNA疫苗对母鸡生长状况的影响 | 第64-65页 |
| 4.5.2 母鸡血清中抗体的检测结果 | 第65-66页 |
| 4.5.3 后代雏鸡血清中母源抗体的检测结果 | 第66页 |
| 4.6 小结与讨论 | 第66-68页 |
| 4.6.1 DNA疫苗对鸡生长状况的影响 | 第66页 |
| 4.6.2 DNA疫苗能刺激鸡体产生相应抗体 | 第66-67页 |
| 4.6.3 DNA疫苗可以诱导后代雏鸡产生母源抗体 | 第67页 |
| 4.6.4 DNA疫苗的免疫方法还有待继续优化 | 第67-68页 |
| 第五章 结论 | 第68-69页 |
| 5.1 完成了一株ALV-J的分离鉴定及其全基因测定 | 第68页 |
| 5.2 通过动物试验验证了重组腺病毒介导的RNAi可有效干扰鸡体内ALV-J的复制 | 第68页 |
| 5.3 通过动物试验验证了DNA疫苗可刺激鸡体产生抗体并诱导其后代雏鸡生成母源抗体 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表及参与的科研项目情况 | 第75页 |
