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紫花苜蓿DREB基因表达及转化研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-15页
   ·苜蓿转基因技术研究国内外发展现状和趋势第9-13页
     ·抗逆品种选育第9-10页
     ·抗病虫抗除草剂的品种选育第10页
     ·品质改良第10-12页
     ·生物固氮的基因操作第12-13页
     ·生物反应器第13页
   ·DREB 转录因子在提高植物抗逆性中的作用第13-15页
     ·DREB 转录因子的发现第13-14页
     ·DREB 的表达特性及其结构特点第14-15页
     ·DREB 转录因子在提高植物抗逆性中的作用第15页
2 紫花苜蓿再生体系的建立第15-23页
   ·试验材料与方法第15-18页
     ·试验材料第15-16页
     ·培养基第16-17页
     ·评价指标第17-18页
   ·试验方法第18-19页
     ·无菌苗的培养第18页
     ·外植体的制备第18页
     ·诱导愈伤组织第18页
     ·愈伤组织继代第18页
     ·愈伤组织的分化第18页
     ·再生苗的获得第18-19页
   ·结果与分析第19-21页
     ·不同基本培养基对下胚轴愈伤组织及愈伤分化的影响第19页
     ·不同基本培养基对子叶愈伤组织及愈伤分化的影响第19页
     ·不同基本培养基对真叶愈伤组织及愈伤分化的影响第19-20页
     ·不同外植体的愈伤组织诱导率和愈伤分化率的比较第20页
     ·愈伤组织诱导率的方差分析第20-21页
   ·讨论第21页
     ·不同外植体对愈伤组织诱导的影响第21页
     ·不同培养基对愈伤组织诱导的影响第21页
   ·小结第21-23页
3 DREB 基因植物表达载体的构建第23-28页
   ·试验材料与方法第23-24页
     ·试验材料第23页
     ·试验仪器第23-24页
   ·试验方法第24-27页
     ·质粒的提取第24页
     ·目的基因片段的扩增第24-25页
     ·双酶切第25页
     ·片段回收第25-26页
     ·连接反应第26页
     ·CaCl_2法转入大肠杆菌第26页
     ·转化子的鉴定第26-27页
   ·结果与分析第27-28页
     ·限制性内切酶xbaⅠ和SmaⅠ双酶切质粒PBI121第27页
     ·目的基因片段的扩增第27页
     ·植物表达载体的构建及鉴定第27-28页
4 农杆菌介导法转化DREB 基因第28-40页
   ·试验材料第28-29页
     ·受体材料第28页
     ·菌种及质粒载体第28页
     ·培养基第28-29页
     ·植物激素种类第29页
     ·植物DNA 提取试剂第29页
     ·仪器第29页
   ·试验方法第29-35页
     ·农杆菌感受态的制备第29页
     ·农杆菌感受态的转化(冻融法)第29-30页
     ·转化子的筛选第30-31页
     ·农杆菌质粒的提取第31页
     ·PCR 鉴定第31-32页
     ·农杆菌介导紫花苜蓿遗传转化体系的优化第32页
     ·农杆菌介导的遗传转化第32-34页
     ·转基因植株的PCR 检测第34-35页
   ·结果与分析第35-38页
     ·转化菌的鉴定第35页
     ·不同受体对转化效率的影响第35页
     ·侵染时间对转化率的影响第35-36页
     ·农杆菌的浓度对转化率的影响第36页
     ·共培养时间对转化的影响第36-37页
     ·预培养时间对转化的影响第37-38页
     ·转基因植株的 PCR 检测第38页
   ·讨论第38-40页
     ·不同受体对转化效率的影响第38-39页
     ·侵染时间和农杆菌浓度对转化率的影响第39页
     ·预培养和共培养对转化效率的影响第39-40页
5 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-47页
作者简介第47页

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