| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| ·苜蓿转基因技术研究国内外发展现状和趋势 | 第9-13页 |
| ·抗逆品种选育 | 第9-10页 |
| ·抗病虫抗除草剂的品种选育 | 第10页 |
| ·品质改良 | 第10-12页 |
| ·生物固氮的基因操作 | 第12-13页 |
| ·生物反应器 | 第13页 |
| ·DREB 转录因子在提高植物抗逆性中的作用 | 第13-15页 |
| ·DREB 转录因子的发现 | 第13-14页 |
| ·DREB 的表达特性及其结构特点 | 第14-15页 |
| ·DREB 转录因子在提高植物抗逆性中的作用 | 第15页 |
| 2 紫花苜蓿再生体系的建立 | 第15-23页 |
| ·试验材料与方法 | 第15-18页 |
| ·试验材料 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·评价指标 | 第17-18页 |
| ·试验方法 | 第18-19页 |
| ·无菌苗的培养 | 第18页 |
| ·外植体的制备 | 第18页 |
| ·诱导愈伤组织 | 第18页 |
| ·愈伤组织继代 | 第18页 |
| ·愈伤组织的分化 | 第18页 |
| ·再生苗的获得 | 第18-19页 |
| ·结果与分析 | 第19-21页 |
| ·不同基本培养基对下胚轴愈伤组织及愈伤分化的影响 | 第19页 |
| ·不同基本培养基对子叶愈伤组织及愈伤分化的影响 | 第19页 |
| ·不同基本培养基对真叶愈伤组织及愈伤分化的影响 | 第19-20页 |
| ·不同外植体的愈伤组织诱导率和愈伤分化率的比较 | 第20页 |
| ·愈伤组织诱导率的方差分析 | 第20-21页 |
| ·讨论 | 第21页 |
| ·不同外植体对愈伤组织诱导的影响 | 第21页 |
| ·不同培养基对愈伤组织诱导的影响 | 第21页 |
| ·小结 | 第21-23页 |
| 3 DREB 基因植物表达载体的构建 | 第23-28页 |
| ·试验材料与方法 | 第23-24页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·试验仪器 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-27页 |
| ·质粒的提取 | 第24页 |
| ·目的基因片段的扩增 | 第24-25页 |
| ·双酶切 | 第25页 |
| ·片段回收 | 第25-26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·CaCl_2法转入大肠杆菌 | 第26页 |
| ·转化子的鉴定 | 第26-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-28页 |
| ·限制性内切酶xbaⅠ和SmaⅠ双酶切质粒PBI121 | 第27页 |
| ·目的基因片段的扩增 | 第27页 |
| ·植物表达载体的构建及鉴定 | 第27-28页 |
| 4 农杆菌介导法转化DREB 基因 | 第28-40页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·受体材料 | 第28页 |
| ·菌种及质粒载体 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·植物激素种类 | 第29页 |
| ·植物DNA 提取试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-35页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第29页 |
| ·农杆菌感受态的转化(冻融法) | 第29-30页 |
| ·转化子的筛选 | 第30-31页 |
| ·农杆菌质粒的提取 | 第31页 |
| ·PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导紫花苜蓿遗传转化体系的优化 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第32-34页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·转化菌的鉴定 | 第35页 |
| ·不同受体对转化效率的影响 | 第35页 |
| ·侵染时间对转化率的影响 | 第35-36页 |
| ·农杆菌的浓度对转化率的影响 | 第36页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第36-37页 |
| ·预培养时间对转化的影响 | 第37-38页 |
| ·转基因植株的 PCR 检测 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·不同受体对转化效率的影响 | 第38-39页 |
| ·侵染时间和农杆菌浓度对转化率的影响 | 第39页 |
| ·预培养和共培养对转化效率的影响 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |