| 致谢 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩略语表 | 第16-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-29页 |
| 1.1 磷饥饿响应的生理生化变化 | 第17-18页 |
| 1.1.1 根形态变化 | 第17页 |
| 1.1.2 有机酸及磷酸脂酶 | 第17-18页 |
| 1.1.3 磷酸转运体 | 第18页 |
| 1.1.4 菌根真菌 | 第18页 |
| 1.1.5 体内磷的再利用 | 第18页 |
| 1.2 植物对缺磷信号的响应 | 第18-22页 |
| 1.2.1 局部磷信号 | 第19页 |
| 1.2.2 系统磷信号 | 第19-22页 |
| 1.3 Pi饥饿的转录响应及调控 | 第22-27页 |
| 1.3.1 缺Pi时的转录响应 | 第23-24页 |
| 1.3.2 缺磷响应的转录水平调控 | 第24页 |
| 1.3.3 PHR1对Pi饥饿转录响应的重要作用 | 第24-25页 |
| 1.3.4 OsPHR2对水稻磷平衡的调控 | 第25-26页 |
| 1.3.5 Pi饥饿转录水平调控其他转录因子 | 第26-27页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第27-29页 |
| 第2章 水稻低磷胁迫转录因子OsPHR3基因的生物信息学分析 | 第29-33页 |
| 2.1 方法 | 第29页 |
| 2.1.1 OsPHR3基因序列分析 | 第29页 |
| 2.1.2 OsPHR3与MYB-CC家族蛋白联配分析 | 第29页 |
| 2.1.3 OsPHR3与MYB-CC家族基因的系统进化分析 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-31页 |
| 2.2.1 OsPHR3基因结构分析 | 第29-30页 |
| 2.2.2 OsPHR3与MYB-CC家族蛋白联配及进化树分析 | 第30-31页 |
| 2.3 小结 | 第31-33页 |
| 第3章 水稻OsPHR1-3基因表达及组织特异性分析 | 第33-43页 |
| 3.1 材料 | 第33页 |
| 3.2 方法 | 第33-38页 |
| 3.2.1 水稻溶液培养 | 第33-34页 |
| 3.2.2 水稻总RNA提取 | 第34页 |
| 3.2.3 cDNA第一链合成 | 第34页 |
| 3.2.4 水稻基因组DNA提取 | 第34页 |
| 3.2.5 GUS表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.6 农杆菌侵染法介导的水稻遗传转化 | 第35-36页 |
| 3.2.7 GUS染色及显微镜观察 | 第36页 |
| 3.2.8 不同生长时期OsPHR1-3基因的表达 | 第36-37页 |
| 3.2.9 OsPHR3亚细胞定位分析 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.3.1 OsPHR1-3组织特异性分析 | 第38-40页 |
| 3.3.2 水稻不同生长时期OsPHR1-3基因表达水平分析 | 第40-41页 |
| 3.3.3 OsPHR3亚细胞定位 | 第41页 |
| 3.4 小结 | 第41-43页 |
| 第4章 phr1、phr2及phr3突变体植株分析 | 第43-61页 |
| 4.1 材料 | 第43页 |
| 4.2 方法 | 第43-47页 |
| 4.2.1 OsPHR1 CRISPR-Cas9载体构建 | 第43-44页 |
| 4.2.2 phr3 Tos17插入突变体鉴定 | 第44页 |
| 4.2.3 phr1/2,phr1/3,phr2/3双突材料发展及鉴定 | 第44页 |
| 4.2.4 phr1/2/3三突材料发展及鉴定 | 第44页 |
| 4.2.5 phr突变体对水稻根毛的影响 | 第44页 |
| 4.2.6 phr突变体表型分析 | 第44-45页 |
| 4.2.7 phr突变体有效磷含量测定 | 第45页 |
| 4.2.8 phr突变体中磷信号基因的表达水平分析 | 第45页 |
| 4.2.9 phr突变体差异基因表达谱分析 | 第45-47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-59页 |
| 4.3.1 phr1突变体鉴定 | 第47-48页 |
| 4.3.2 phr3 Tos17插入突变体鉴定 | 第48-49页 |
| 4.3.3 phr1/2,phr1/3,phr2/3双突鉴定 | 第49-50页 |
| 4.3.4 phr1/2/3三突鉴定 | 第50-51页 |
| 4.3.5 phr突变体根毛表型分析 | 第51-52页 |
| 4.3.6 phr突变体表型分析 | 第52-55页 |
| 4.3.7 phr突变体有效磷含量测定 | 第55页 |
| 4.3.8 phr突变体中磷信号基因的表达水平分析 | 第55-58页 |
| 4.3.9 phr突变体差异基因表达谱分析 | 第58-59页 |
| 4.4 小结 | 第59-61页 |
| 第5章 OsPHR1-3过表达转基因植株分析 | 第61-73页 |
| 5.1 材料 | 第61页 |
| 5.2 方法 | 第61-62页 |
| 5.2.1 OsPHR1-3过表达对根毛的影响 | 第61页 |
| 5.2.2 OsPHR1-3过表达株系表型分析 | 第61页 |
| 5.2.3 PHR1-3过表达株系中缺磷响应基因的表达分析 | 第61页 |
| 5.2.4 OsPHR3(ov)田间表型分析 | 第61-62页 |
| 5.2.5 OsPHR3(ov)无标记转基因株系田间表型分析 | 第62页 |
| 5.2.6 PHR2及PHR3蛋白水平检测 | 第62页 |
| 5.3 结果与分析 | 第62-72页 |
| 5.3.1 OsPHR1-3过表达对根毛的影响 | 第62-63页 |
| 5.3.2 OsPHR1-3过表达转基因株系表型分析 | 第63-66页 |
| 5.3.3 PHR1-3过表达株系中缺磷响应基因的表达分析 | 第66页 |
| 5.3.4 OsPHR3(ov)田间表型分析 | 第66-67页 |
| 5.3.5 OsPHR3无标记转基因株系田间实验 | 第67-71页 |
| 5.3.6 PHR2及PHR3蛋白水平分析 | 第71-72页 |
| 5.4 小结 | 第72-73页 |
| 第6章 顺式作用元件P1BS对不同PHR亲和力的调控 | 第73-81页 |
| 6.1 材料 | 第73页 |
| 6.1.1 菌株 | 第73页 |
| 6.1.2 载体 | 第73页 |
| 6.2 方法 | 第73-77页 |
| 6.2.1 酵母单杂 | 第73-75页 |
| 6.2.2 凝胶阻滞 | 第75-77页 |
| 6.3 结果与分析 | 第77-79页 |
| 6.4 小结 | 第79-81页 |
| 第7章 讨论与展望 | 第81-85页 |
| 7.1 OsPHR1,OsPHR2和OsPHR3功能冗余 | 第81-82页 |
| 7.2 OsPHR1,OsPHR2和OsPHR3功能多样性 | 第82-83页 |
| 7.3 水稻OsPHR3过表达能耐低磷 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-97页 |
| 附录 | 第97-101页 |
| 附录1 引物总汇 | 第97-101页 |
| 作者简历 | 第101页 |
