| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-20页 |
| 1 重金属污染现状 | 第10-12页 |
| 1.1 土壤重金属的来源 | 第10-12页 |
| (1) 农业污染来源 | 第10-11页 |
| (2) 交通运输污染来源 | 第11页 |
| (3) 工业、矿业企业污染来源 | 第11-12页 |
| 1.2 重金属污染我国土壤现状 | 第12页 |
| 2 重金属Cd对植物的影响 | 第12-14页 |
| 2.1 Cd对植物生长发育的影响 | 第13页 |
| 2.2 Cd对植物细胞分裂的影响 | 第13页 |
| 2.3 Cd对植物细胞结构的影响 | 第13页 |
| 2.4 Cd对植物酶的活性与MDA(丙二醛)含量的影响 | 第13-14页 |
| 2.5 Cd对植物光合作用的影响 | 第14页 |
| 3 拟南芥ADS2基因具有抗重金属作用 | 第14-15页 |
| 4 水杨酸(Salicylic acid,SA)对植物抗逆性的讨论 | 第15-18页 |
| 4.1 SA对植物产生抗逆性的研究现状 | 第15-18页 |
| (1) SA对植物抗旱性的影响 | 第15-16页 |
| (2) SA对植物抗寒性的影响 | 第16页 |
| (3) SA对植物抗病性的影响 | 第16-17页 |
| (4) SA对植物抗盐性的影响 | 第17页 |
| (5) SA对植物抗高温的影响 | 第17-18页 |
| 4.2 SA使植物产生抗逆性机理 | 第18页 |
| (1) SA与磷蛋白质 | 第18页 |
| (2) SA与H_2O_2 | 第18页 |
| 5 本论文研究的主要内容与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 外源水杨酸对Cd~(2+)胁迫下BY-2细胞超微结构的影响 | 第20-26页 |
| 1 实验材料和方法 | 第20页 |
| 1.1 实验材料 | 第20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20页 |
| 2 外源水杨酸对Cd~(2+)胁迫下BY-2细胞超微结构的影响结果与分析 | 第20-24页 |
| 2.1 外源水杨酸对Cd~(2+)胁迫下BY-2细胞超微结构的影响结果 | 第20-23页 |
| 2.2 外源水杨酸对Cd~(2+)胁迫下BY-2细胞超微结构的影响结果分析及讨论 | 第23-24页 |
| 3 讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 ADS2基因的克隆与转化 | 第26-41页 |
| 1 ADS2基因cDNA的克隆 | 第26-34页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第26-29页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 1.1.2 菌株 | 第26页 |
| 1.1.3 酶与试剂盒 | 第26页 |
| 1.1.4 试剂 | 第26-29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 1.2.1 拟南芥总RNA的提取 | 第29页 |
| 1.2.2 反转录RT-PCR | 第29-30页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第30页 |
| 1.2.4 ADS2基因的克隆 | 第30-32页 |
| 1.3 结果与分析 | 第32-34页 |
| 1.3.1 拟南芥总RNA提取 | 第32-33页 |
| 1.3.2 ADS2基因的扩增以及检测 | 第33-34页 |
| 1.3.3 ADS2基因序列分析 | 第34页 |
| 2 转化载体的构建 | 第34-38页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第34页 |
| 2.1.2 酶与试剂盒 | 第34-35页 |
| 2.1.3 试剂 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 pWM101-ADS2表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-38页 |
| 2.3.1 目的片段扩增结果 | 第37页 |
| 2.3.2 菌落PCR检测 | 第37页 |
| 2.3.3 双酶切检测 | 第37-38页 |
| 3 BY-2细胞的转化 | 第38-41页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第38页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 3.1.2 菌株 | 第38页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第38页 |
| 3.2.2 农杆菌的菌落PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.2.3 烟草悬浮细胞系BY-2的培养 | 第39页 |
| 3.2.4 烟草悬浮细胞系BY-2的活体转化与抗性筛选 | 第39-41页 |
| 第四章 转ADS2基因细胞的处理及基因表达定量分析 | 第41-47页 |
| 1 转基因ADS2细胞的观察 | 第41-43页 |
| 1.2 结果与分析 | 第41-43页 |
| 1.2.1 农杆菌的菌落PCR检测 | 第41页 |
| 1.2.2 转化烟草BY2细胞抗性筛选 | 第41-42页 |
| 1.2.3 转化BY-2细胞S-anti的分子检测 | 第42页 |
| 1.2.4 转基因ADS2-BY-2细胞的观察与结果分析 | 第42-43页 |
| 2 ADS2基因的半定量检测及分析 | 第43-47页 |
| 2.1 实验材料及实验材料的培养及处理 | 第43-44页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 2.1.2 ADS2-SCAMP2-GFP转化BY-2细胞的培养 | 第44页 |
| 2.2 实验方法 | 第44-45页 |
| 2.2.1 BY-2细胞施加外源SA与重金属Cd~(2+)胁迫处理 | 第44页 |
| 2.2.2 总RNA提取和cDNA第一链合成 | 第44页 |
| 2.2.3 RT-PCR | 第44-45页 |
| 2.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 2.3.1 RT-PCR结果 | 第45页 |
| 2.3.2 RT-PCR结果分析及讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 结果与结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
