| 摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第15-45页 |
| 1.1 蛋白折叠的研究背景及意义 | 第15-20页 |
| 1.1.1 蛋白折叠的基本机制 | 第15-16页 |
| 1.1.2 蛋白的折叠/错误折叠与疾病 | 第16-18页 |
| 1.1.3 研究蛋白折叠的方法 | 第18-19页 |
| 1.1.4 蛋白折叠的应用前景 | 第19-20页 |
| 1.2 多态性蛋白研究背景及意义 | 第20-28页 |
| 1.2.1 多态性蛋白简介 | 第20-21页 |
| 1.2.2 多态性蛋白家族 | 第21-26页 |
| 1.2.3 多态性中间体对蛋白结构进化的影响 | 第26-27页 |
| 1.2.4 多态性蛋白的识别和表征 | 第27-28页 |
| 1.3 SAC研究现状 | 第28-33页 |
| 1.3.1 组成SAC的蛋白及功能 | 第28页 |
| 1.3.2 SAC发生作用的机制 | 第28-30页 |
| 1.3.3 SAC与疾病 | 第30-33页 |
| 1.4 Mad2的研究现状 | 第33-40页 |
| 1.4.1 Mad2的生物学功能 | 第33页 |
| 1.4.2 Mad2分子的蛋白结构 | 第33-34页 |
| 1.4.3 Mad2构象转变的研究 | 第34-40页 |
| 1.5 单分子荧光共振能量转移技术简介 | 第40-42页 |
| 1.6 本论文的选题目的及主要研究内容 | 第42-45页 |
| 第二章 Mad2蛋白的表达、纯化及表征 | 第45-76页 |
| 2.1 实验材料与主要实验仪器 | 第45-48页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第45页 |
| 2.1.3 主要实验溶液的配制 | 第45-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-61页 |
| 2.2.1 pQE30-Mad2表达载体的构建方法 | 第48-53页 |
| 2.2.2 Mad2表达条件的优化 | 第53-56页 |
| 2.2.3 Mad2蛋白的纯化 | 第56-59页 |
| 2.2.4 Mad2蛋白的初步表征 | 第59-61页 |
| 2.3 实验结果 | 第61-71页 |
| 2.3.1 pQE30-Mad2表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 2.3.2 Mad2表达条件的优化 | 第62-63页 |
| 2.3.3 Mad2蛋白的纯化 | 第63-70页 |
| 2.3.4 Mad2蛋白的初步表征 | 第70-71页 |
| 2.4 分析讨论 | 第71-75页 |
| 2.5 本章小结 | 第75-76页 |
| 第三章 Mad2两种构象的热力学稳定性和折叠动力学研究 | 第76-91页 |
| 3.1 实验材料与主要实验仪器 | 第76页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第76页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第76页 |
| 3.1.3 主要实验溶液的配制 | 第76页 |
| 3.2 实验方法 | 第76-79页 |
| 3.2.1 Mad2两种构象的热力学平衡滴定实验 | 第76-77页 |
| 3.2.2 Mad2两种构象的热变性研究 | 第77-78页 |
| 3.2.3 Mad2两种构象的折叠/解折叠动力学研究 | 第78-79页 |
| 3.3 实验结果 | 第79-86页 |
| 3.3.1 Mad2两种构象的热力学平衡滴定实验 | 第79-81页 |
| 3.3.2 Mad2两种构象的热变性研究 | 第81-82页 |
| 3.3.3 Mad2两种构象的折叠/解折叠动力学研究 | 第82-86页 |
| 3.4 分析讨论 | 第86-89页 |
| 3.5 本章小结 | 第89-91页 |
| 第四章 Mad2与其配体Cdc20~(121-138) 相互作用的研究 | 第91-110页 |
| 4.1 实验材料与主要仪器 | 第91页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第91页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第91页 |
| 4.2 实验方法 | 第91-95页 |
| 4.2.1 Mad2两种构象与Cdc20~(121-138) 相互作用的热力学研究 | 第91-92页 |
| 4.2.2 Mad2两种构象与Cdc20~(121-138) 相互作用的动力学研究 | 第92-95页 |
| 4.2.3 Mad2两种构象与Cdc20~(121-138) 不同突变体相互作用的研究 | 第95页 |
| 4.3 实验结果 | 第95-104页 |
| 4.3.1 Mad2两种构象与Cdc20~(121-138) 相互作用的热力学研究 | 第95-97页 |
| 4.3.2 Mad2两种构象与Cdc20~(121-138) 相互作用的动力学过程 | 第97-98页 |
| 4.3.3 Mad2两种构象与Cdc20~(121-138) 不同突变体间的相互作用 | 第98-104页 |
| 4.4 分析讨论 | 第104-108页 |
| 4.5 本章小结 | 第108-110页 |
| 第五章 Mad2突变体的构建及荧光标记 | 第110-133页 |
| 5.1 实验材料与主要仪器 | 第110页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第110页 |
| 5.1.2 主要实验仪器 | 第110页 |
| 5.1.3 主要实验溶液的配制 | 第110页 |
| 5.2 实验方法 | 第110-116页 |
| 5.2.1 Mad2定点突变体的构建 | 第110-114页 |
| 5.2.2 Mad2突变体蛋白的表达、纯化与表征 | 第114页 |
| 5.2.3 Mad2突变体蛋白的荧光标记及表征 | 第114-116页 |
| 5.3 实验结果 | 第116-128页 |
| 5.3.1 Mad2定点突变体的构建 | 第116-117页 |
| 5.3.2 Mad2突变体的表达、纯化与表征 | 第117-123页 |
| 5.3.3 Mad2定点突变体蛋白的荧光标记及表征 | 第123-128页 |
| 5.4 分析讨论 | 第128-131页 |
| 5.5 本章小结 | 第131-133页 |
| 结论 | 第133-135页 |
| 参考文献 | 第135-152页 |
| 附录 | 第152-154页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第154-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
| 作者简介 | 第156页 |
