| 论文创新点 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-36页 |
| 1.1 人巨细胞病毒(HCMV)概述 | 第14-20页 |
| 1.1.1 人巨细胞病毒简介 | 第14页 |
| 1.1.2 人巨细胞病毒颗粒的结构和功能 | 第14-16页 |
| 1.1.3 人巨细胞病毒基因组 | 第16-20页 |
| 1.2 HCMV基因的表达时序及功能 | 第20-23页 |
| 1.2.1 立即早期基因 | 第20-23页 |
| 1.2.2 早期基因 | 第23页 |
| 1.2.3 晚期基因 | 第23页 |
| 1.3 人巨细胞病毒的感染复制周期 | 第23-29页 |
| 1.3.1 HCMV的吸附和入侵 | 第25-26页 |
| 1.3.2 脱壳入核 | 第26页 |
| 1.3.3 HCMV的DNA复制 | 第26-28页 |
| 1.3.4 HCMV核衣壳的组装 | 第28-29页 |
| 1.3.5 核衣壳出核以及病毒颗粒的成熟和释放 | 第29页 |
| 1.4 HCMV的预防和治疗药物研究进展 | 第29-33页 |
| 1.4.1 人巨细胞病毒疫苗 | 第30-31页 |
| 1.4.2 人巨细胞病毒治疗药 | 第31-33页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第33-36页 |
| 第二章 材料与方法 | 第36-56页 |
| 2.1 常规实验仪器和设备 | 第36-37页 |
| 2.2 基本实验试剂 | 第37页 |
| 2.3 常规分子生物学实验技术 | 第37-42页 |
| 2.3.1 大肠杆菌DH5α化转感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.3.2 大肠杆菌DH5α感受态的化学转化 | 第38-39页 |
| 2.3.3 SDS碱裂解法小量抽提质粒DNA | 第39-40页 |
| 2.3.4 常规克隆和表达载体构建 | 第40页 |
| 2.3.5 突变PCR | 第40-41页 |
| 2.3.6 细胞RNA的提取(以U251细胞为例) | 第41-42页 |
| 2.3.7 逆转录PCR | 第42页 |
| 2.3.8 实时荧光定量PCR技术 | 第42页 |
| 2.4 酵母双杂交实验 | 第42-45页 |
| 2.4.1 酵母双杂交所用培养基 | 第42-43页 |
| 2.4.2 酵母感受态的制备以酵母转化 | 第43-44页 |
| 2.4.3 X-gal显色实验 | 第44-45页 |
| 2.5 细胞培养及转染实验 | 第45-49页 |
| 2.5.1 细胞培养基及试剂 | 第45页 |
| 2.5.2 细胞培养(以HFF细胞为例) | 第45-46页 |
| 2.5.3 磷酸钙法转染细胞(以293T细胞为例) | 第46-47页 |
| 2.5.4 脂质体法转染细胞(以Lipofectine2000转染U251细胞为例) | 第47-48页 |
| 2.5.5 稳转细胞系的筛选(以U251细胞为例) | 第48-49页 |
| 2.6 蛋白质水平实验 | 第49-54页 |
| 2.6.1 PAGE电泳和Western Blot检测 | 第49-52页 |
| 2.6.2 免疫共沉淀实验 | 第52页 |
| 2.6.3 间接免疫荧光实验 | 第52-53页 |
| 2.6.4 双荧光启动子报告实验 | 第53-54页 |
| 2.7 病毒水平实验 | 第54-56页 |
| 2.7.1 感染HFF细胞、扩增HCMV | 第54页 |
| 2.7.2 测定HCMV的病毒滴度 | 第54-56页 |
| 第三章 UL102与CtBP2相互作用的研究 | 第56-78页 |
| 3.1 概述 | 第56-58页 |
| 3.2 实验过程和结果 | 第58-75页 |
| 3.2.1 实验材料说明 | 第58-61页 |
| 3.2.2 UL102和CtBP2相互作用的酵母双杂交验证 | 第61-62页 |
| 3.2.3 UL102和CtBP2相互作用的免疫共沉淀验证 | 第62-63页 |
| 3.2.4 UL102和CtBP2相互作用的激光共聚焦观察 | 第63-64页 |
| 3.2.5 UL102和CtBP2相互作用的结构域 | 第64-66页 |
| 3.2.6 CtBP2过表达对HCMV复制的影响 | 第66-68页 |
| 3.2.7 CtBP2对HCMV MIE基因表达的抑制 | 第68-69页 |
| 3.2.8 CtBP2通过与UL102的直接相互作用影响HCMV的复制 | 第69-71页 |
| 3.2.9 UL102可以解除CtBP2对HCMV启动子的抑制作用 | 第71-74页 |
| 3.2.10 CtBP2的稳定表达对HCMV持续感染的影响 | 第74-75页 |
| 3.3 分析与讨论 | 第75-78页 |
| 第四章 UL105与Snapin相互作用的研究 | 第78-90页 |
| 4.1 概述 | 第78-80页 |
| 4.2 实验过程和结果 | 第80-87页 |
| 4.2.1 实验材料说明 | 第80-82页 |
| 4.2.2 Snapin影响UL105核质分布的Western blot分析 | 第82-85页 |
| 4.2.3 Snapin和UL105相互作用对HCMV DNA合成的影响 | 第85-87页 |
| 4.2.4 Snapin和UL105相互作用对HCMV裂解性感染的影响 | 第87页 |
| 4.3 分析与讨论 | 第87-90页 |
| 参考文献 | 第90-105页 |
| 攻博期间已发表或正在撰写的论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
