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糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白COBL10在花粉管生长和导向过程中的作用机理研究

中文摘要第8-9页
英文摘要第9页
1 前言第10-31页
    1.1 植物花粉与雌蕊的互作第10-23页
        1.1.1 花粉与柱头黏附,水合,萌发和识别第10-14页
            1.1.1.1 绒毡层细胞参与花粉与柱头识别第11页
            1.1.1.2 花粉质膜在识别中的作用第11-12页
            1.1.1.3 脂类分子参与花粉与柱头的识别第12页
            1.1.1.4 花粉和柱头的识别诱导柱头组织和花粉中基因转录第12-13页
            1.1.1.5 囊泡运输以及磷脂肌醇在花粉与柱头识别过程中可能起到信号作用第13页
            1.1.1.6 种间花粉—柱头的识别与不亲和互作的分子机制第13-14页
        1.1.2 花粉管与雌蕊组织的相互作用及花粉管在雌蕊组织中的生长第14-18页
            1.1.2.1 花粉管的生长及其感受雌蕊信号的机理第15-16页
            1.1.2.2 微丝骨架调控花粉管生长的分子机理第16-17页
            1.1.2.3 S-核酸酶和SLF介导的花粉管生长和抑制的信号转导的分子基础第17-18页
        1.1.3 花粉管与胚囊相互作用及雌雄配子体识别第18-23页
            1.1.3.1 花粉管与胚囊相互作用的分子遗传机制第18-19页
            1.1.3.2 花粉管与胚囊助细胞识别的分子机理第19-20页
            1.1.3.3 雌雄配子细胞识别的分子机理第20-23页
    1.2 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白第23-27页
        1.2.1 糖基磷酯酰肌醇锚定蛋白的功能第23-24页
        1.2.2 雌雄配子的信息交流第24-26页
        1.2.3 花粉管的生长第26-27页
    1.3 COBRA家族第27-31页
        1.3.1 COBRA家族的发现及研究进展第28页
        1.3.2 COBRA家族成员的蛋白结构第28-31页
2 实验材料与方法第31-45页
    2.1 实验材料第31-34页
        2.1.1 植物材料的培养与处理第31页
        2.1.2 质粒及引物第31-33页
        2.1.3 酶及试剂第33-34页
    2.2 实验方法第34-45页
        2.2.1 载体的构建第34-39页
            2.2.1.1 植物总RNA的提取(试剂盒法)第34页
            2.2.1.2 反转录第34-35页
            2.2.1.3 拟南芥基因组DNA提取第35-36页
            2.2.1.4 PCR扩增第36页
            2.2.1.5 PCR扩增产物回收(试剂盒法)第36-37页
            2.2.1.6 TOPO连接反应第37页
            2.2.1.7 大肠杆菌转化及质粒提取第37-38页
            2.2.1.8 DNA序列测定第38页
            2.2.1.9 LR反应第38页
            2.2.1.10 质粒DNA的酶切鉴定第38-39页
        2.2.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化第39-40页
            2.2.2.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化第39-40页
            2.2.2.2 拟南芥的栽培及转化第40页
        2.2.3 花粉管发育及生长表型分析第40-41页
        2.2.4 GUS染色分析第41页
        2.2.5 扫描电子显微镜观察第41-42页
        2.2.6 透射电子显微镜观察第42页
        2.2.7 拟南芥花粉萌发及染色分析第42-43页
        2.2.8 拟南芥花粉管的免疫荧光染色第43-44页
        2.2.9 激光共聚焦扫描隧道显微镜观察及图像处理第44页
        2.2.10 化学药剂处理第44-45页
3 结果与分析第45-62页
    3.1 cobl10突变体致使雄配子不育第45-46页
    3.2 COBL10不影响花粉的发生,水合及萌发第46-47页
    3.3 花粉管在COBL10突变体中生长受到影响第47-49页
    3.4 花粉管在COBL10突变体中不能导向胚珠第49-51页
    3.5 COBL10参与花粉管细胞壁的建成第51-54页
    3.6 COBL10的亚细胞定位和功能互补第54-56页
    3.7 COBL10的亚细胞定位依赖于它的C端第56-58页
    3.8 COBL10在花粉管顶端质膜上的定位依赖于PIG复合体的正常功能第58-60页
    3.9 COBL11是COBL10的功能冗余基因第60-62页
4 讨论第62-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表论文情况第73页

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