中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9页 |
1 前言 | 第10-31页 |
1.1 植物花粉与雌蕊的互作 | 第10-23页 |
1.1.1 花粉与柱头黏附,水合,萌发和识别 | 第10-14页 |
1.1.1.1 绒毡层细胞参与花粉与柱头识别 | 第11页 |
1.1.1.2 花粉质膜在识别中的作用 | 第11-12页 |
1.1.1.3 脂类分子参与花粉与柱头的识别 | 第12页 |
1.1.1.4 花粉和柱头的识别诱导柱头组织和花粉中基因转录 | 第12-13页 |
1.1.1.5 囊泡运输以及磷脂肌醇在花粉与柱头识别过程中可能起到信号作用 | 第13页 |
1.1.1.6 种间花粉—柱头的识别与不亲和互作的分子机制 | 第13-14页 |
1.1.2 花粉管与雌蕊组织的相互作用及花粉管在雌蕊组织中的生长 | 第14-18页 |
1.1.2.1 花粉管的生长及其感受雌蕊信号的机理 | 第15-16页 |
1.1.2.2 微丝骨架调控花粉管生长的分子机理 | 第16-17页 |
1.1.2.3 S-核酸酶和SLF介导的花粉管生长和抑制的信号转导的分子基础 | 第17-18页 |
1.1.3 花粉管与胚囊相互作用及雌雄配子体识别 | 第18-23页 |
1.1.3.1 花粉管与胚囊相互作用的分子遗传机制 | 第18-19页 |
1.1.3.2 花粉管与胚囊助细胞识别的分子机理 | 第19-20页 |
1.1.3.3 雌雄配子细胞识别的分子机理 | 第20-23页 |
1.2 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白 | 第23-27页 |
1.2.1 糖基磷酯酰肌醇锚定蛋白的功能 | 第23-24页 |
1.2.2 雌雄配子的信息交流 | 第24-26页 |
1.2.3 花粉管的生长 | 第26-27页 |
1.3 COBRA家族 | 第27-31页 |
1.3.1 COBRA家族的发现及研究进展 | 第28页 |
1.3.2 COBRA家族成员的蛋白结构 | 第28-31页 |
2 实验材料与方法 | 第31-45页 |
2.1 实验材料 | 第31-34页 |
2.1.1 植物材料的培养与处理 | 第31页 |
2.1.2 质粒及引物 | 第31-33页 |
2.1.3 酶及试剂 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-45页 |
2.2.1 载体的构建 | 第34-39页 |
2.2.1.1 植物总RNA的提取(试剂盒法) | 第34页 |
2.2.1.2 反转录 | 第34-35页 |
2.2.1.3 拟南芥基因组DNA提取 | 第35-36页 |
2.2.1.4 PCR扩增 | 第36页 |
2.2.1.5 PCR扩增产物回收(试剂盒法) | 第36-37页 |
2.2.1.6 TOPO连接反应 | 第37页 |
2.2.1.7 大肠杆菌转化及质粒提取 | 第37-38页 |
2.2.1.8 DNA序列测定 | 第38页 |
2.2.1.9 LR反应 | 第38页 |
2.2.1.10 质粒DNA的酶切鉴定 | 第38-39页 |
2.2.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第39-40页 |
2.2.2.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第39-40页 |
2.2.2.2 拟南芥的栽培及转化 | 第40页 |
2.2.3 花粉管发育及生长表型分析 | 第40-41页 |
2.2.4 GUS染色分析 | 第41页 |
2.2.5 扫描电子显微镜观察 | 第41-42页 |
2.2.6 透射电子显微镜观察 | 第42页 |
2.2.7 拟南芥花粉萌发及染色分析 | 第42-43页 |
2.2.8 拟南芥花粉管的免疫荧光染色 | 第43-44页 |
2.2.9 激光共聚焦扫描隧道显微镜观察及图像处理 | 第44页 |
2.2.10 化学药剂处理 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-62页 |
3.1 cobl10突变体致使雄配子不育 | 第45-46页 |
3.2 COBL10不影响花粉的发生,水合及萌发 | 第46-47页 |
3.3 花粉管在COBL10突变体中生长受到影响 | 第47-49页 |
3.4 花粉管在COBL10突变体中不能导向胚珠 | 第49-51页 |
3.5 COBL10参与花粉管细胞壁的建成 | 第51-54页 |
3.6 COBL10的亚细胞定位和功能互补 | 第54-56页 |
3.7 COBL10的亚细胞定位依赖于它的C端 | 第56-58页 |
3.8 COBL10在花粉管顶端质膜上的定位依赖于PIG复合体的正常功能 | 第58-60页 |
3.9 COBL11是COBL10的功能冗余基因 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |