中文摘要 | 第7-10页 |
abstract | 第10-14页 |
英文缩略词表(Abbreviation) | 第15-16页 |
引言 | 第16-18页 |
1. 姜黄提取物及姜黄素的特性及抗肿瘤作用 | 第16页 |
2. 炎症与肿瘤微环境的关系——抗炎途径抗肝癌机制 | 第16-17页 |
3. 活血化瘀药与肿瘤的关系——抗凝途径抗肝癌机制 | 第17-18页 |
第一部分 姜黄素与姜黄提取物对人肝癌HepG2细胞的增殖及侵袭能力对比研究 | 第18-26页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
1.1 细胞株来源 | 第18页 |
1.2 药物来源 | 第18页 |
1.3 试剂来源 | 第18-19页 |
1.4 实验仪器设备 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-26页 |
2.1 药物来源、制备及细胞来源 | 第20-21页 |
2.1.1 姜黄素及姜黄提取物的制备 | 第20页 |
2.1.2 干预诱导药物的来源 | 第20页 |
2.1.3 细胞株来源 | 第20-21页 |
2.2 脂多糖诱导条件下的人肝癌HepG2细胞培养体系 | 第21-23页 |
2.2.1 HepG2细胞培养 | 第21页 |
2.2.2 CCK8法确定LPS浓度,建立脂多糖刺激诱导下的肝癌细胞炎症态模型 | 第21页 |
2.2.3 CCK8法对比检测姜黄提取物、姜黄素作用HepG2细胞的增殖的影响 | 第21-22页 |
2.2.4 CCK8法对比检测姜黄提取物、姜黄素对LPS诱导下HepG2细胞的增殖的影响 | 第22-23页 |
2.3 HUVECs释放液条件下的人肝癌HepG2细胞培养体系 | 第23-24页 |
2.3.1 HUVEC、HepG2细胞的培养 | 第23页 |
2.3.2 ELISA法检测HUVECs释放液中组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、IL-6 的水平 | 第23页 |
2.3.3 CCK8法检测LPS诱导与HUVECs释放液对HepG2细胞的增殖能力影响的对比 | 第23-24页 |
2.4 CCK8法对比检测姜黄提取物、姜黄素对HUVECs释放液诱导下HepG2细胞的增殖的影响 | 第24-25页 |
2.5 姜黄素与姜黄提取物对人肝癌HepG2细胞的侵袭能力的对比研究 | 第25-26页 |
第二部分 实时荧光定量PCR及HepG2细胞iNOS、IL6的蛋白表达检测 | 第26-32页 |
1 实时荧光定量PCR | 第26-29页 |
1.1 RNA的提取 | 第26页 |
1.2 RNA测浓度测量 | 第26-27页 |
1.3 RT-PCR实验 | 第27-29页 |
1.3.1 去除基因组DNA反应 | 第27页 |
1.3.2 反转录反应 | 第27-28页 |
1.3.3 Real-time PCR | 第28-29页 |
2 HepG2细胞i NOS、IL-6 的蛋白表达检测 | 第29-31页 |
2.1 细胞培养 | 第30页 |
2.2 Western blot实验步骤 | 第30-31页 |
2.2.1 细胞蛋白的提取 | 第30页 |
2.2.2 BCA法检测蛋白含量 | 第30页 |
2.2.3 iNOS、IL-6 的蛋白表达 | 第30-31页 |
3 统计学方法 | 第31-32页 |
第三部分 结果 | 第32-40页 |
1 姜黄提取物及姜黄素对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用对比 | 第32-33页 |
2 姜黄提取物及姜黄素对LPS干预下的HepG2细胞增殖抑制能力的影响 | 第33页 |
3 凝血酶刺激HUVECs释放液中IL-6、t-PA、PAI-1 水平 | 第33页 |
4 HUVECs释放液对人肝癌HepG2细胞的增殖能力的影响 | 第33-34页 |
5 姜黄提取物、姜黄素对HUVECs释放液诱导下HepG2细胞的增殖的影响对比 | 第34页 |
6 姜黄提取物及姜黄素对LPS干预下的HepG2细胞侵袭能力的影响 | 第34页 |
7 Real-Time PCR分析IL-6、iNOS的mRNA表达水平差异 | 第34-35页 |
8 姜黄素及姜黄提取物对HepG2细胞i NOS、IL-6 蛋白表达的影响 | 第35-40页 |
第四部分 讨论 | 第40-43页 |
结论 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录:文献综述 髓源抑制细胞在肝癌发生发展中的作用 | 第50-60页 |
参考文献 | 第56-60页 |