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姜黄素及姜黄提取物通过抗凝、抗炎途径对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭作用对比研究

中文摘要第7-10页
abstract第10-14页
英文缩略词表(Abbreviation)第15-16页
引言第16-18页
    1. 姜黄提取物及姜黄素的特性及抗肿瘤作用第16页
    2. 炎症与肿瘤微环境的关系——抗炎途径抗肝癌机制第16-17页
    3. 活血化瘀药与肿瘤的关系——抗凝途径抗肝癌机制第17-18页
第一部分 姜黄素与姜黄提取物对人肝癌HepG2细胞的增殖及侵袭能力对比研究第18-26页
    1 实验材料第18-20页
        1.1 细胞株来源第18页
        1.2 药物来源第18页
        1.3 试剂来源第18-19页
        1.4 实验仪器设备第19-20页
    2 实验方法第20-26页
        2.1 药物来源、制备及细胞来源第20-21页
            2.1.1 姜黄素及姜黄提取物的制备第20页
            2.1.2 干预诱导药物的来源第20页
            2.1.3 细胞株来源第20-21页
        2.2 脂多糖诱导条件下的人肝癌HepG2细胞培养体系第21-23页
            2.2.1 HepG2细胞培养第21页
            2.2.2 CCK8法确定LPS浓度,建立脂多糖刺激诱导下的肝癌细胞炎症态模型第21页
            2.2.3 CCK8法对比检测姜黄提取物、姜黄素作用HepG2细胞的增殖的影响第21-22页
            2.2.4 CCK8法对比检测姜黄提取物、姜黄素对LPS诱导下HepG2细胞的增殖的影响第22-23页
        2.3 HUVECs释放液条件下的人肝癌HepG2细胞培养体系第23-24页
            2.3.1 HUVEC、HepG2细胞的培养第23页
            2.3.2 ELISA法检测HUVECs释放液中组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、IL-6 的水平第23页
            2.3.3 CCK8法检测LPS诱导与HUVECs释放液对HepG2细胞的增殖能力影响的对比第23-24页
        2.4 CCK8法对比检测姜黄提取物、姜黄素对HUVECs释放液诱导下HepG2细胞的增殖的影响第24-25页
        2.5 姜黄素与姜黄提取物对人肝癌HepG2细胞的侵袭能力的对比研究第25-26页
第二部分 实时荧光定量PCR及HepG2细胞iNOS、IL6的蛋白表达检测第26-32页
    1 实时荧光定量PCR第26-29页
        1.1 RNA的提取第26页
        1.2 RNA测浓度测量第26-27页
        1.3 RT-PCR实验第27-29页
            1.3.1 去除基因组DNA反应第27页
            1.3.2 反转录反应第27-28页
            1.3.3 Real-time PCR第28-29页
    2 HepG2细胞i NOS、IL-6 的蛋白表达检测第29-31页
        2.1 细胞培养第30页
        2.2 Western blot实验步骤第30-31页
            2.2.1 细胞蛋白的提取第30页
            2.2.2 BCA法检测蛋白含量第30页
            2.2.3 iNOS、IL-6 的蛋白表达第30-31页
    3 统计学方法第31-32页
第三部分 结果第32-40页
    1 姜黄提取物及姜黄素对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用对比第32-33页
    2 姜黄提取物及姜黄素对LPS干预下的HepG2细胞增殖抑制能力的影响第33页
    3 凝血酶刺激HUVECs释放液中IL-6、t-PA、PAI-1 水平第33页
    4 HUVECs释放液对人肝癌HepG2细胞的增殖能力的影响第33-34页
    5 姜黄提取物、姜黄素对HUVECs释放液诱导下HepG2细胞的增殖的影响对比第34页
    6 姜黄提取物及姜黄素对LPS干预下的HepG2细胞侵袭能力的影响第34页
    7 Real-Time PCR分析IL-6、iNOS的mRNA表达水平差异第34-35页
    8 姜黄素及姜黄提取物对HepG2细胞i NOS、IL-6 蛋白表达的影响第35-40页
第四部分 讨论第40-43页
结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
附录:文献综述 髓源抑制细胞在肝癌发生发展中的作用第50-60页
    参考文献第56-60页

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