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大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶种类及相关基因检测

中文摘要第4-5页
Abstract第5-6页
1 前言第7-19页
    1.1 大肠杆菌危害第7-9页
        1.1.1 大肠杆菌概述第7-8页
        1.1.2 大肠杆菌的流行性第8-9页
        1.1.3 大肠杆菌在细菌耐药性传播、监控上的意义第9页
    1.2 大肠杆菌耐药现状与耐药机制第9-12页
        1.2.1 大肠杆菌的耐药现状第9-11页
        1.2.2 大肠杆菌的耐药机制第11-12页
    1.3 β-内酰胺类抗菌药物研究现状第12-13页
        1.3.1 β-内酰胺类抗菌药物的发展史第12-13页
        1.3.2 β-内酰胺类抗菌药物在人医和兽医临床上的地位第13页
    1.4 大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药现状与耐药机制第13-18页
        1.4.1 大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药现状第13-14页
        1.4.2 大肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药机制第14-15页
        1.4.3 ESBLs和AmpC酶研究现状第15-18页
    1.5 研究目的与意义第18-19页
2 试验材料第19-23页
    2.1 样品来源第19-20页
    2.2 质控菌株第20页
    2.3 试剂第20-23页
        2.3.1 培养基及配制第20页
        2.3.2 主要试剂及配制第20-21页
        2.3.3 其它试剂第21页
        2.3.4 抗菌药物及规格第21页
        2.3.5 药敏纸片第21-22页
        2.3.6 主要仪器和设备第22-23页
3 试验方法第23-33页
    3.1 猪源大肠杆菌的分离与鉴定第23页
    3.2 大肠杆菌的保存第23-24页
    3.3 β-内酰胺类药物对猪源大肠杆菌MIC的测定第24-26页
        3.3.1 抗菌药物储存液的制备第24-25页
        3.3.2 抗菌药物工作液的制备第25页
        3.3.3 细菌的活化和稀释第25页
        3.3.4 MIC值测定第25-26页
        3.3.5 结果判读第26页
    3.4 产酶菌的筛选第26-29页
        3.4.1 ESBLs大肠杆菌的筛选第26-27页
        3.4.2 AmpCs大肠杆菌的筛选第27-29页
    3.5 ESBLs和AmpC酶相关基因的检测及分析第29-33页
        3.5.1 引物的选择第29-30页
        3.5.2 模板DNA的提取第30页
        3.5.3 PCR反应体系第30-31页
        3.5.4 PCR产物电泳检测第31-32页
        3.5.5 PCR产物测序及分析第32-33页
    3.6 数据处理第33页
4 结果与分析第33-59页
    4.1 猪源大肠杆菌分离鉴定第33页
    4.2 猪源分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药情况第33-43页
        4.2.1 总体耐药情况第33-35页
        4.2.2 不同地区猪源大肠杆菌的耐药状况第35-37页
        4.2.3 猪源大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的多重耐药情况第37-43页
    4.3 猪源大肠杆菌交叉耐药分析第43-45页
    4.4 产酶大肠杆菌的筛查结果第45-47页
        4.4.1 ESBLs大肠杆菌筛选第45-46页
        4.4.2 AmpCs大肠杆菌筛选第46-47页
    4.5 产酶大肠杆菌的耐药性分析第47-49页
    4.6 酶相关基因的PCR检测结果第49-55页
        4.6.1 ESBLs相关基因的PCR扩增与测序结果第49-50页
        4.6.2 ESBLs三个基因的检出率第50-51页
        4.6.3 AmpC酶相关基因的PCR扩增与测序结果第51-52页
        4.6.4 AmpC酶三个基因的检出率第52页
        4.6.5 大肠杆菌产酶菌与酶相关基因的分析第52-54页
        4.6.6 不同地区猪源大肠杆菌分离菌携带酶相关基因情况第54-55页
    4.7 基因型与耐药表型的关系第55-59页
        4.7.1 检出耐药基因菌株和未检出耐药基因耐药性对比第55-56页
        4.7.2 基因型和菌株多重耐药表型的关系第56-59页
5 讨论第59-66页
    5.1 猪源分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药情况第59-61页
        5.1.1 1087 株猪源分离大肠杆菌对8种β-内酰胺类抗菌药物耐药性分析第59-61页
        5.1.2 不同地区猪源大肠杆菌分离菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性分析第61页
        5.1.3 猪源大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的多重耐药分析第61页
    5.2 猪源大肠杆菌交叉耐药分析第61-62页
    5.3 产酶大肠杆菌的筛查第62-63页
        5.3.1 ESBLs大肠杆菌筛选第62-63页
        5.3.2 AmpCs大肠杆菌筛选第63页
    5.4 产酶菌株的耐药性分析第63页
    5.5 产酶菌株相关基因检出情况第63-66页
    5.6 基因型和耐药表型的关系第66页
6 结论第66-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-74页
附表第74-76页

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