中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 前言 | 第7-19页 |
1.1 大肠杆菌危害 | 第7-9页 |
1.1.1 大肠杆菌概述 | 第7-8页 |
1.1.2 大肠杆菌的流行性 | 第8-9页 |
1.1.3 大肠杆菌在细菌耐药性传播、监控上的意义 | 第9页 |
1.2 大肠杆菌耐药现状与耐药机制 | 第9-12页 |
1.2.1 大肠杆菌的耐药现状 | 第9-11页 |
1.2.2 大肠杆菌的耐药机制 | 第11-12页 |
1.3 β-内酰胺类抗菌药物研究现状 | 第12-13页 |
1.3.1 β-内酰胺类抗菌药物的发展史 | 第12-13页 |
1.3.2 β-内酰胺类抗菌药物在人医和兽医临床上的地位 | 第13页 |
1.4 大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药现状与耐药机制 | 第13-18页 |
1.4.1 大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药现状 | 第13-14页 |
1.4.2 大肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药机制 | 第14-15页 |
1.4.3 ESBLs和AmpC酶研究现状 | 第15-18页 |
1.5 研究目的与意义 | 第18-19页 |
2 试验材料 | 第19-23页 |
2.1 样品来源 | 第19-20页 |
2.2 质控菌株 | 第20页 |
2.3 试剂 | 第20-23页 |
2.3.1 培养基及配制 | 第20页 |
2.3.2 主要试剂及配制 | 第20-21页 |
2.3.3 其它试剂 | 第21页 |
2.3.4 抗菌药物及规格 | 第21页 |
2.3.5 药敏纸片 | 第21-22页 |
2.3.6 主要仪器和设备 | 第22-23页 |
3 试验方法 | 第23-33页 |
3.1 猪源大肠杆菌的分离与鉴定 | 第23页 |
3.2 大肠杆菌的保存 | 第23-24页 |
3.3 β-内酰胺类药物对猪源大肠杆菌MIC的测定 | 第24-26页 |
3.3.1 抗菌药物储存液的制备 | 第24-25页 |
3.3.2 抗菌药物工作液的制备 | 第25页 |
3.3.3 细菌的活化和稀释 | 第25页 |
3.3.4 MIC值测定 | 第25-26页 |
3.3.5 结果判读 | 第26页 |
3.4 产酶菌的筛选 | 第26-29页 |
3.4.1 ESBLs大肠杆菌的筛选 | 第26-27页 |
3.4.2 AmpCs大肠杆菌的筛选 | 第27-29页 |
3.5 ESBLs和AmpC酶相关基因的检测及分析 | 第29-33页 |
3.5.1 引物的选择 | 第29-30页 |
3.5.2 模板DNA的提取 | 第30页 |
3.5.3 PCR反应体系 | 第30-31页 |
3.5.4 PCR产物电泳检测 | 第31-32页 |
3.5.5 PCR产物测序及分析 | 第32-33页 |
3.6 数据处理 | 第33页 |
4 结果与分析 | 第33-59页 |
4.1 猪源大肠杆菌分离鉴定 | 第33页 |
4.2 猪源分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药情况 | 第33-43页 |
4.2.1 总体耐药情况 | 第33-35页 |
4.2.2 不同地区猪源大肠杆菌的耐药状况 | 第35-37页 |
4.2.3 猪源大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的多重耐药情况 | 第37-43页 |
4.3 猪源大肠杆菌交叉耐药分析 | 第43-45页 |
4.4 产酶大肠杆菌的筛查结果 | 第45-47页 |
4.4.1 ESBLs大肠杆菌筛选 | 第45-46页 |
4.4.2 AmpCs大肠杆菌筛选 | 第46-47页 |
4.5 产酶大肠杆菌的耐药性分析 | 第47-49页 |
4.6 酶相关基因的PCR检测结果 | 第49-55页 |
4.6.1 ESBLs相关基因的PCR扩增与测序结果 | 第49-50页 |
4.6.2 ESBLs三个基因的检出率 | 第50-51页 |
4.6.3 AmpC酶相关基因的PCR扩增与测序结果 | 第51-52页 |
4.6.4 AmpC酶三个基因的检出率 | 第52页 |
4.6.5 大肠杆菌产酶菌与酶相关基因的分析 | 第52-54页 |
4.6.6 不同地区猪源大肠杆菌分离菌携带酶相关基因情况 | 第54-55页 |
4.7 基因型与耐药表型的关系 | 第55-59页 |
4.7.1 检出耐药基因菌株和未检出耐药基因耐药性对比 | 第55-56页 |
4.7.2 基因型和菌株多重耐药表型的关系 | 第56-59页 |
5 讨论 | 第59-66页 |
5.1 猪源分离大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药情况 | 第59-61页 |
5.1.1 1087 株猪源分离大肠杆菌对8种β-内酰胺类抗菌药物耐药性分析 | 第59-61页 |
5.1.2 不同地区猪源大肠杆菌分离菌对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性分析 | 第61页 |
5.1.3 猪源大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药物的多重耐药分析 | 第61页 |
5.2 猪源大肠杆菌交叉耐药分析 | 第61-62页 |
5.3 产酶大肠杆菌的筛查 | 第62-63页 |
5.3.1 ESBLs大肠杆菌筛选 | 第62-63页 |
5.3.2 AmpCs大肠杆菌筛选 | 第63页 |
5.4 产酶菌株的耐药性分析 | 第63页 |
5.5 产酶菌株相关基因检出情况 | 第63-66页 |
5.6 基因型和耐药表型的关系 | 第66页 |
6 结论 | 第66-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
附表 | 第74-76页 |