| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1 麦迪霉素概述 | 第12-13页 |
| 2 麦迪霉素的生物合成 | 第13-16页 |
| 3 基因组重排育种的研究概况 | 第16-21页 |
| 3.1 基因组重排育种概念的提出 | 第17页 |
| 3.2 基因组重排原理 | 第17页 |
| 3.3 基因组重排的方法 | 第17-19页 |
| 3.4 基因组重排育种的优点 | 第19页 |
| 3.5 基因组重排的应用 | 第19-21页 |
| 4 立题依据 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-32页 |
| 1 实验材料 | 第22-26页 |
| 1.1 菌种 | 第22页 |
| 1.2 培养基 | 第22-24页 |
| 1.3 试剂 | 第24页 |
| 1.3.1 抗生素 | 第24页 |
| 1.3.2 化学试剂 | 第24页 |
| 1.4 溶液 | 第24-25页 |
| 1.5 仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-32页 |
| 2.1 前体X-1抗性突变株(亲本甲)的筛选 | 第26-27页 |
| 2.1.1 出发菌株的自然分离 | 第26页 |
| 2.1.2 出发菌株对前体X-1自然耐受实验 | 第26页 |
| 2.1.3 出发菌株的紫外线和亚硝基胍组合诱变处理 | 第26页 |
| 2.1.4 孢子萌发方法 | 第26页 |
| 2.1.5 前体物质X-1 | 第26-27页 |
| 2.1.6 筛选方法 | 第27页 |
| 2.2 安普霉素抗性工程菌(亲本乙)的筛选 | 第27页 |
| 2.3 原生质体制备 | 第27-28页 |
| 2.4 原生质体融合 | 第28页 |
| 2.5 原生质体再生 | 第28页 |
| 2.6 原生质体的灭活 | 第28页 |
| 2.7 基因组重排育种实验 | 第28-29页 |
| 2.8 融合子的筛选 | 第29-30页 |
| 2.9 高产融合菌株传代稳定性考察 | 第30页 |
| 2.10 融合子的鉴定 | 第30页 |
| 2.11 效价测定 | 第30页 |
| 2.12 组分测定 | 第30页 |
| 2.13 前体X-1抗性突变株(亲本甲)发酵工艺优化 | 第30-32页 |
| 2.13.1 前体X-1抗性突变株摇瓶发酵代谢曲线 | 第30页 |
| 2.13.2 最佳补加前体X-1时间 | 第30页 |
| 2.13.3 最佳补加前体X-1剂量 | 第30-32页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第32-54页 |
| 第一部分 生米卡链霉菌耐前体变株的选育及发酵工艺优化 | 第32-40页 |
| 1 前体X-1抗性突变株(亲本甲)的筛选 | 第32-35页 |
| 1.1 出发菌株的自然分离 | 第32页 |
| 1.2 出发菌株B15对前体X-1自然耐受实验结果 | 第32页 |
| 1.3 紫外线诱变处理的死亡率 | 第32-33页 |
| 1.4 亚硝基胍诱变处理的死亡率 | 第33页 |
| 1.5 前体X-1抗性突变株筛选结果 | 第33-35页 |
| 2 前体X-1抗性突变株发酵工艺优化 | 第35-38页 |
| 2.1 高产变株B64-5发酵代谢曲线 | 第35-37页 |
| 2.2 高产变株B64-5最佳补加前体X-1时间 | 第37页 |
| 2.3 高产变株B64-5最佳补加前体X-1剂量 | 第37-38页 |
| 2.4 高产变株B64-5和出发菌株B15发酵结果 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第二部分 生米卡链霉菌基因组重排育种 | 第40-54页 |
| 1 亲本的筛选 | 第40页 |
| 1.1 高产前体X-1抗性突变株(亲本甲)的筛选 | 第40页 |
| 1.2 安普霉素抗性工程菌(亲本乙)的筛选 | 第40页 |
| 2 原生质体制备,再生条件考察 | 第40-42页 |
| 2.1 菌龄的考察 | 第40-41页 |
| 2.2 酶解时间考察 | 第41-42页 |
| 3 原生质体灭活条件的考察 | 第42-43页 |
| 3.1 原生质体紫外灭活条件的考察 | 第42页 |
| 3.2 原生质体热灭活条件的考察 | 第42-43页 |
| 4 基因组重排实验 | 第43-50页 |
| 4.1 第一轮基因组重排育种 | 第43-44页 |
| 4.2 第二轮基因组重排育种 | 第44-45页 |
| 4.3 第三轮基因组重排育种 | 第45-50页 |
| 4.3.1 浓度梯度法菌落预筛 | 第45-47页 |
| 4.3.2 前体X-1,Am和前体01组合抗性融合子的浓度梯度法筛选 | 第47页 |
| 4.3.3 琼脂块大通量筛选变株 | 第47-50页 |
| 5 高产菌株筛选及传代稳定性实验 | 第50-51页 |
| 6 四株高产菌株A1组分含量的HPLC结果 | 第51-52页 |
| 7 融合子的鉴定 | 第52页 |
| 8 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 发表文章 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
