| 目录 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 本文缩写词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 充分利用纤维素资源的重大意义 | 第10页 |
| 1.2 木质纤维素及其利用 | 第10页 |
| 1.3 木糖异构酶(xylose isomerase,Ⅺ) | 第10-15页 |
| 1.3.1 木糖的Ⅺ代谢途径 | 第10-11页 |
| 1.3.2 木糖异构酶的概念 | 第11-12页 |
| 1.3.3 木糖异构酶的理化性质 | 第12页 |
| 1.3.4 木糖异构酶的分类及比较 | 第12-13页 |
| 1.3.5 嗜热细菌的木糖异构酶 | 第13-15页 |
| 1.4 酿酒酵母 | 第15-16页 |
| 1.4.1 酿酒酵母生产乙醇的研究 | 第15页 |
| 1.4.2 Ⅺ木糖代谢途径在酿酒酵母中的建立 | 第15-16页 |
| 1.5 蛋白质的分子改造 | 第16-17页 |
| 1.6 纤维堆囊菌 | 第17-18页 |
| 1.6.1 纤维堆囊菌的主要特性 | 第17页 |
| 1.6.2 纤维堆囊菌的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.7 本文的研究工作 | 第18-19页 |
| 第二章 嗜热细菌(T.thermophilus)木糖异构酶的分子改造 | 第19-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.1.1 质粒和菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 分子克隆用酶和试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.3 培养基 | 第21页 |
| 2.1.4 微生物学技术 | 第21页 |
| 2.1.5 分子生物学方法 | 第21-23页 |
| 2.1.6 粗酶液的制备 | 第23页 |
| 2.1.7 酶活测定方法 | 第23-24页 |
| 2.1.8 最适pH测定方法 | 第24页 |
| 2.1.9 热稳定性测定方法 | 第24页 |
| 2.1.10 蛋白质含量的测定 | 第24页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第24-31页 |
| 2.2.1 定点突变位点的选择 | 第24-25页 |
| 2.2.2 定点突变体的获得与鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.3 突变体质粒表达载体的构建 | 第27页 |
| 2.2.4 重组酿酒酵母菌株的获得 | 第27-28页 |
| 2.2.5 H158-Ⅺ和H158-Ⅺm最适反应温度的测定 | 第28-29页 |
| 2.2.6 H158-Ⅺ和H158-Ⅺm最适pH的测定 | 第29页 |
| 2.2.7 H158-Ⅺ和H158-Ⅺm热稳定性的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.8 突变体Ⅺ137结果分析 | 第30-31页 |
| 2.2.9 突变体Ⅺ247结果分析 | 第31页 |
| 2.2.10 双突变体Ⅺ137247结果分析 | 第31页 |
| 2.3 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 纤维堆囊菌157-2木糖异构酶基因的克隆与表达 | 第32-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-38页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第32页 |
| 3.1.2 引物 | 第32-34页 |
| 3.1.3 分子克隆用酶和试剂 | 第34页 |
| 3.1.4 培养基 | 第34页 |
| 3.1.5 微生物学技术 | 第34页 |
| 3.1.6 分子生物学方法 | 第34-38页 |
| 3.1.7 粗酶液的制备 | 第38页 |
| 3.1.8 酶活测定方法 | 第38页 |
| 3.1.9 蛋白质含量的测定 | 第38页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第38-49页 |
| 3.2.1 纤维堆囊菌木糖异构酶的酶活测定 | 第38-39页 |
| 3.2.2 纤维堆囊菌染色体的提取 | 第39-40页 |
| 3.2.3 纤维堆囊菌xylA基因保守区域的克隆与分析 | 第40-41页 |
| 3.2.4 纤维堆囊菌157-2基因组的酶解与杂交结果 | 第41-43页 |
| 3.2.5 纤维堆囊菌157-2特异性杂交片段的回收 | 第43-44页 |
| 3.2.6 反向PCR结果及序列分析 | 第44-47页 |
| 3.2.7 纤维堆囊菌157-2 xylA全长的克隆 | 第47页 |
| 3.2.8 纤维堆囊菌157-2的Ⅺ表达载体的构建 | 第47页 |
| 3.2.9 纤维堆囊菌157-2的Ⅺ重组菌株的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.10 纤维堆囊菌157-2的Ⅺ酶活性质的初步研究 | 第48-49页 |
| 3.3 本章小结 | 第49-50页 |
| 全文总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第57页 |
