中文摘要 | 第4-5页 |
前言 | 第5-6页 |
一 文献综述 | 第6-20页 |
二 材料和方法 | 第20-25页 |
2.1 植物材料 | 第20页 |
2.2 菌株和质粒 | 第20-21页 |
2.3 农杆菌培养和菌液制备 | 第21页 |
2.3.1 菌株培养 | 第21页 |
2.3.2 菌液制备 | 第21页 |
2.4 试验方法 | 第21-25页 |
2.4.1 马铃薯再生系统优化 | 第21-23页 |
2.2.1.1 选择试验因素、确定上下限 | 第21-22页 |
2.4.1.2 试验因素零水平值的确定 | 第22页 |
2.4.1.3 试验因素的变化区间 | 第22-23页 |
2.4.1.4 各因素的编码值及实际值 | 第23页 |
2.4.2 转化体的选择试验:Kan敏感性试验 | 第23页 |
2.4.3 马铃薯转化系统的优化 | 第23-24页 |
2.4.3.1 预培养时间对转化的影响 | 第23页 |
2.4.3.2 农杆菌浓度对转化的影响 | 第23页 |
2.4.3.3 浸染时间对转化的影响 | 第23页 |
2.4.3.4 共培养时间对转化的影响 | 第23页 |
2.4.3.5 AS对转化的影响 | 第23页 |
2.4.3.6 转化体的选择及分化 | 第23-24页 |
2.4.4 转化体的分子生物学鉴定 | 第24-25页 |
2.4.4.1 转基因植株和对照总DNA的提取 | 第24页 |
2.4.4.2 PCR扩增体系(反应总体积为50μL) | 第24-25页 |
2.4.4.3 反应参数 | 第25页 |
2.4.4.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
2.4.4.5 染色照相 | 第25页 |
三 结果与分析 | 第25-33页 |
3.1 马铃薯再生系统的优化 | 第25-27页 |
3.2 愈伤组织诱导和植株再生过程中的选择压 | 第27-28页 |
3.3 转化系统的优化 | 第28-32页 |
3.3.1 预培养时间对转化的影响 | 第28-29页 |
3.3.2 农杆菌浓度对转化的影响 | 第29-30页 |
3.3.3 浸染时间对转化的影响 | 第30页 |
3.3.4 共培养时间对转化的影响 | 第30-31页 |
3.3.5 AS对转化的影响 | 第31-32页 |
3.4 供试品种的转化 | 第32-33页 |
3.5 转化体的分子生物学鉴定结果 | 第33页 |
四 结论 | 第33-34页 |
五 讨论 | 第34-36页 |
5.1 外植体类型与植株再生率 | 第34页 |
5.2 筛选系统 | 第34页 |
5.3 农杆菌预处理对转化的影响 | 第34-35页 |
5.4 转化体的鉴定 | 第35-36页 |
图版说明 | 第36-37页 |
图版Ⅰ | 第37-38页 |
图版Ⅱ | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
英文摘要 | 第43页 |
致谢 | 第44页 |