| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 绪论 | 第8-14页 |
| 1.1 胰腺癌的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.2 黄芩素的生物学功能 | 第9-10页 |
| 1.3 黄芩素对胰腺癌的功能研究 | 第10-11页 |
| 1.4 NEDD9在癌症中的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.5 PI3K/Akt信号通路 | 第12页 |
| 1.6 ERK信号通路 | 第12-13页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 黄芩素抑制胰腺癌细胞的增殖、运动，促进凋亡 | 第14-26页 |
| 2.1 引言 | 第14页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第14-15页 |
| 2.2.1 实验细胞 | 第14页 |
| 2.2.2 主要仪器和设备 | 第14页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第14-15页 |
| 2.3 实验方法 | 第15-19页 |
| 2.3.1 CCK-8检测细胞增殖 | 第15页 |
| 2.3.2 Western blot | 第15-17页 |
| 2.3.3 流式细胞仪检测细胞周期 | 第17页 |
| 2.3.4 Annexin V FITC-PI检测细胞凋亡 | 第17页 |
| 2.3.5 划痕实验 | 第17-18页 |
| 2.3.6 集落形成实验 | 第18页 |
| 2.3.7 Transwell侵袭实验 | 第18页 |
| 2.3.8 细胞免疫染色 | 第18-19页 |
| 2.4 实验结果 | 第19-24页 |
| 2.4.1 黄芩素抑制胰腺癌细胞生存活性和增殖 | 第19-20页 |
| 2.4.2 黄芩素促进胰腺癌细胞凋亡，诱导细胞周期停滞 | 第20-23页 |
| 2.4.3 黄芩素抑制胰腺癌细胞迁移、侵袭和集落形成 | 第23-24页 |
| 2.5 讨论 | 第24-25页 |
| 2.6 本章小结 | 第25-26页 |
| 3 黄芩素作用的靶基因和下游通路的鉴定 | 第26-37页 |
| 3.1 引言 | 第26页 |
| 3.2 试剂配制和分装 | 第26-27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-30页 |
| 3.3.1 RNA提取和反转录 | 第27-29页 |
| 3.3.2 实时定量PCR | 第29-30页 |
| 3.3.3 细胞总蛋白提取 | 第30页 |
| 3.3.4 Western Blot | 第30页 |
| 3.4 实验结果 | 第30-34页 |
| 3.4.1 在胰腺癌细胞中黄芩素抑制Akt和ERK通路的磷酸化 | 第30-31页 |
| 3.4.2 抑制Akt和ERK信号通路能抑制胰腺癌细胞的增殖，迁移和凋亡 | 第31-33页 |
| 3.4.3 在胰腺癌细胞中黄芩素抑制NEDD9的mRNA和蛋白表达 | 第33-34页 |
| 3.5 讨论 | 第34-35页 |
| 3.6 本章小结 | 第35-37页 |
| 4 干涉NEDD9抑制胰腺癌细胞增殖和运动，促进凋亡 | 第37-44页 |
| 4.1 引言 | 第37页 |
| 4.2 试剂配制和分装 | 第37页 |
| 4.3 实验方法 | 第37-38页 |
| 4.3.1 细胞转染 | 第37-38页 |
| 4.3.2 Western Blot | 第38页 |
| 4.3.3 划痕实验 | 第38页 |
| 4.3.4 免疫染色 | 第38页 |
| 4.4 实验结果 | 第38-42页 |
| 4.4.1 干涉NEDD9能抑制胰腺癌细胞的增殖 | 第38-40页 |
| 4.4.2 干涉NEDD9能促进胰腺癌细胞的凋亡，抑制胰腺癌细胞迁移 | 第40-41页 |
| 4.4.3 干涉NEDD9能抑制Akt和ERK信号通路磷酸化 | 第41-42页 |
| 4.5 讨论 | 第42-43页 |
| 4.6 本章小结 | 第43-44页 |
| 5 过表达NEDD9在黄芩素抑制胰腺癌细胞生长中的作用 | 第44-53页 |
| 5.1 引言 | 第44页 |
| 5.2 试剂配制和分装 | 第44页 |
| 5.3 实验方法 | 第44-46页 |
| 5.3.1 NEDD9表达载体构建 | 第44-46页 |
| 5.4 实验结果 | 第46-51页 |
| 5.4.1 在胰腺癌细胞中添加黄芩素后过表达NEDD9能促进细胞的增殖 | 第46-47页 |
| 5.4.2 过表达NEDD9能部分抵消黄芩素对癌细胞侵袭和凋亡的影响 | 第47-49页 |
| 5.4.3 在胰腺癌细胞中添加黄芩素后过表达NEDD9能上调PDK1的表达，激活Akt和ERK信号通路 | 第49-51页 |
| 5.5 讨论 | 第51-52页 |
| 5.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 6 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
