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褐藻糖胶对小鼠乳腺癌的体内外抑制作用及机制研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
引言第9-11页
第一章 实验材料第11-14页
   ·褐藻糖胶及细胞株第11页
   ·药品与试剂第11-12页
   ·材料与仪器第12-14页
第二章 实验方法第14-29页
   ·细胞水平抗肿瘤活性及其机制研究(体外实验)第14-23页
     ·MTT法检测褐藻糖胶对正常小鼠成纤维细胞增殖活性的影响第14页
     ·MTT法检测褐藻糖胶对4T1细胞增殖活性的影响第14-15页
     ·Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡的形态学改变第15页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder第15-16页
     ·流式细胞术检测细胞凋亡第16-17页
     ·RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Survivin mRNA的表达第17-19页
     ·Western blot检测Bcl-2、Bax和Survivin蛋白表达第19-21页
     ·流式细胞术检测线粒体膜电位的变化第21页
     ·Western blot检测细胞色素C的释放和活化的Caspase-3的表达第21-22页
     ·流式细胞仪(FCM)分析细胞周期第22页
     ·RT-PCR检测Cyclin-D1和CDK_4 mRNA的表达第22-23页
     ·Western blot检测β-catenin,Cyclin-D1和CDK_4的表达第23页
     ·RT-PCR、Western blotting检测VEGF mRNA和蛋白表达第23页
     ·统计学分析第23页
   ·动物整体水平的抗肿瘤活性及其机制研究(体内实验)第23-29页
     ·实验动物及其饲养第23-24页
     ·建立小鼠移植瘤模型和实验方案第24页
     ·移植瘤常规病理检查第24-25页
     ·小鼠肺转移癌灶检测第25页
     ·TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡第25-26页
     ·Western blot检测肿瘤组织内Bcl-2、Bax和Survivin蛋白的表达第26页
     ·免疫组化检测肿瘤组织β-catenin,Cyclin-D1和CDK_4的表达第26-27页
     ·免疫组化检测肿瘤组织微血管密度和VEGF的表达第27-28页
     ·统计学分析第28-29页
第三章 实验结果第29-57页
   ·细胞水平抗肿瘤活性及其机制研究(体外实验)第29-44页
     ·褐藻糖胶ISA对小鼠正常成纤维细胞增殖活性的影响第29页
     ·褐藻糖胶对4T1细胞增殖活性的影响第29-30页
     ·Hoechst33258荧光染色细胞的形态学改变第30-31页
     ·褐藻糖胶处理后的DNA ladder第31-32页
     ·褐藻糖胶对4T1细胞凋亡的影响第32-33页
     ·褐藻糖胶处理后Bcl-2和Bax mRNA的水平第33-35页
     ·褐藻糖胶处理后4T1细胞中Bcl-2、Bax蛋白的表达水平第35-36页
     ·褐藻糖胶处理后Survivin mRNA及蛋白的表达第36-37页
     ·褐藻糖胶作用后4T1细胞线粒体膜电位的变化第37-38页
     ·褐藻糖胶作用后4T1细胞中细胞色素C的释放第38-39页
     ·褐藻糖胶处理后4T1细胞中活化的Caspase-3的水平第39-40页
     ·褐藻糖胶对4T1细胞细胞周期的影响第40-41页
     ·褐藻糖胶处理后细胞中Cyclin-D1和CDK_4 mRNA的表达水平第41-42页
     ·褐藻糖胶处理后细胞B-catenin,Cyclin-D1和CDK_4蛋白的水平第42-43页
     ·褐藻糖胶处理后4T1细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达水平第43-44页
   ·动物整体水平的抗肿瘤活性及其机制研究(体内实验)第44-57页
     ·褐藻糖胶对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响第44页
     ·移植瘤大体病理及HE染色常规病理检查第44-48页
     ·褐藻糖胶对移植瘤组织细胞凋亡的影响第48-49页
     ·移植瘤组织Bcl-2、Bax蛋白的表达第49-50页
     ·移植瘤组织Survivin蛋白的表达第50-51页
     ·移植瘤组织B-catenin、Cyclin-D1和CDK_4蛋白的表达第51-54页
     ·移植瘤组织微血管密度和VEGF蛋白的表达第54-56页
     ·褐藻糖胶对荷瘤小鼠肺转移灶的影响第56-57页
第四章 讨论第57-66页
结论第66-67页
参考文献第67-71页
综述第71-86页
 综述参考文献第81-86页
攻读学位期间的研究成果第86-87页
致谢第87-88页

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