| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-26页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-11页 |
| 1.2 病毒分子生态学 | 第11-12页 |
| 1.2.1 病毒生态研究的层次 | 第11页 |
| 1.2.2 病毒分子生态学 | 第11-12页 |
| 1.3 猪瘟病毒及其致病机理 | 第12-20页 |
| 1.3.1 猪瘟病毒整体结构 | 第12页 |
| 1.3.2 猪瘟病毒基因组结构特征 | 第12-13页 |
| 1.3.3 猪瘟病毒编码的蛋白及其功能 | 第13-20页 |
| 1.3.4 猪瘟病毒的致病机理 | 第20页 |
| 1.4 病毒与宿主相互作用的研究概况 | 第20-24页 |
| 1.4.1 丙型肝炎病毒与宿主相互作用的研究 | 第20-21页 |
| 1.4.2 HIV病毒与宿主相互作用研究 | 第21-22页 |
| 1.4.3 牛病毒性腹泻病毒与宿主相互作用 | 第22-23页 |
| 1.4.4 猪瘟病毒与宿主蛋白相互作用的研究 | 第23-24页 |
| 1.5 本论文目标及设计思路 | 第24-26页 |
| 第2章 实验部分 | 第26-44页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第26-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.2 实验仪器及设备 | 第28-30页 |
| 2.1.3 实验器材及有关溶液的配制 | 第30-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1 PK-15细胞培养 | 第32页 |
| 2.2.1.1 PK-15细胞的复苏 | 第32页 |
| 2.2.1.2 PK-15细胞的传代培养 | 第32页 |
| 2.2.1.3 PK-15细胞的冻存 | 第32页 |
| 2.2.2 GST-NS5AC的诱导表达与纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.3 pull down | 第33页 |
| 2.2.4 质谱鉴定 | 第33页 |
| 2.2.5 真核表达载体的构建 | 第33-38页 |
| 2.2.6 转染PK-15细胞 | 第38-40页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀 | 第40-42页 |
| 2.2.8 Westernblot | 第42-44页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第44-54页 |
| 3.1 GST-NS5AC的诱导表达与纯化 | 第44-45页 |
| 3.2 pull down | 第45页 |
| 3.3 质谱鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4 Western blot检验相互作用蛋白 | 第46页 |
| 3.5 真核表达载体的构建 | 第46-49页 |
| 3.5.1 NS5AC基因的扩增 | 第46-47页 |
| 3.5.2 NS5AC和pCMV-myc载体的双酶切 | 第47-48页 |
| 3.5.3 NS5AC基因和pCMV-myc载体的连接与转化 | 第48页 |
| 3.5.4 重组子PCR阳性鉴定 | 第48-49页 |
| 3.6 转染及间接免疫荧光检测 | 第49-51页 |
| 3.7 免疫共沉淀结合Western blot | 第51-52页 |
| 3.8 讨论 | 第52-54页 |
| 第4章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |