| 中文摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 序言 | 第13-20页 |
| 1. 研究背景 | 第13-18页 |
| 1.1 衰老与 17β-雌二醇 | 第13-14页 |
| 1.2 自噬简介 | 第14-16页 |
| 1.3 p53信号通路与自噬 | 第16-18页 |
| 2. 研究思路 | 第18-19页 |
| 3. 技术路线图 | 第19-20页 |
| 第一部分：血管内皮细胞衰老与自噬关系的研究 | 第20-36页 |
| 1. 前言 | 第20-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1 主要实验设备 | 第21页 |
| 2.2 主要实验试剂 | 第21页 |
| 2.3 主要试剂及配方 | 第21-23页 |
| 3.实验方法 | 第23-29页 |
| 3.1 细胞培养 | 第23-24页 |
| 3.2 细胞分组与处理 | 第24页 |
| 3.3 MTT检测细胞增殖活性 | 第24页 |
| 3.4 细胞衰老SA-β 半糖苷酶染色 | 第24-25页 |
| 3.5 ELISA检测ET-1 水平 | 第25页 |
| 3.6 总一氧化氮测定 | 第25-26页 |
| 3.7 透射电子显微镜观察细胞结构和自噬小体形成情况 | 第26-27页 |
| 3.8 Western Blot检测Rb、p-Rb、LC3B、Beclin-1 和p62蛋白 | 第27-29页 |
| 3.9 统计分析 | 第29页 |
| 4. 结果 | 第29-34页 |
| 4.1 MTT示各组细胞活力差异 | 第29页 |
| 4.2 SA-β 半糖苷酶染色示各组细胞衰老情况 | 第29-31页 |
| 4.3 各组细胞细胞因子差异 | 第31-32页 |
| 4.4 各组细胞p-Rb与Rb表达情况 | 第32页 |
| 4.5 各组细胞自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1 和p62表达情况 | 第32-33页 |
| 4.6 电镜示各组细胞结构改变和自噬小体形成情况 | 第33-34页 |
| 5. 结论 | 第34页 |
| 6. 讨论 | 第34-36页 |
| 第二部分：17β-E2对血管内皮细胞衰老及自噬活性的作用研究 | 第36-48页 |
| 1. 前言 | 第36页 |
| 2. 材料与方法 | 第36-37页 |
| 2.1 主要实验设备 | 第36页 |
| 2.2 主要试剂 | 第36页 |
| 2.3 主要试剂及配方 | 第36-37页 |
| 3. 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.1 细胞培养 | 第37页 |
| 3.2 细胞分组与处理： | 第37页 |
| 3.3 MTT检测细胞增值活性 | 第37页 |
| 3.4 细胞衰老SA-β 半糖苷酶染色 | 第37页 |
| 3.5 流式细胞技术检测细胞周期 | 第37-38页 |
| 3.6 ELISA检测ET-1 水平 | 第38-39页 |
| 3.7 总一氧化氮测定 | 第39页 |
| 3.8 免疫荧光检测LC3-Ⅱ蛋白 | 第39-40页 |
| 3.9 Western Blot检测Rb、p-Rb、LC3B、Beclin-1 和p62蛋白 | 第40页 |
| 3.10 统计分析 | 第40页 |
| 4. 结果 | 第40-46页 |
| 4.1 MTT示各组细胞活力差异 | 第40页 |
| 4.2 SA-β 半糖苷酶染色示各组细胞衰老情况 | 第40-42页 |
| 4.3 各组细胞细胞因子差异 | 第42-43页 |
| 4.4 各组细胞周期比较 | 第43-44页 |
| 4.5 免疫荧光检测各组细胞LC3-Ⅱ蛋白 | 第44-45页 |
| 4.6 各组细胞p-Rb与Rb表达情况 | 第45页 |
| 4.7 各组细胞自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1 和p62表达情况 | 第45-46页 |
| 5. 结论 | 第46页 |
| 6. 讨论 | 第46-48页 |
| 第三部分：研究 17β-E_2对p53信号通路的作用 | 第48-52页 |
| 1. 前言 | 第48页 |
| 2. 材料与方法 | 第48-49页 |
| 2.1 主要实验设备 | 第48页 |
| 2.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 2.3 主要试剂及配方 | 第49页 |
| 3. 实验方法 | 第49页 |
| 3.1 细胞培养 | 第49页 |
| 3.2 细胞分组与处理 | 第49页 |
| 3.3 Western Blot检测p53、p-p53、PUMA和MDM2蛋白 | 第49页 |
| 3.4 统计分析 | 第49页 |
| 4. 结果 | 第49-50页 |
| 5. 结论 | 第50页 |
| 6. 讨论 | 第50-52页 |
| 全文结论 | 第52-53页 |
| 本研究不足之处 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 综述 | 第59-67页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
