| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-27页 |
| 1.1 盐分对植物的影响和植物的调控机理 | 第11-14页 |
| 1.1.1 盐胁迫对植物的伤害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 植物对盐胁迫的适应机制 | 第12-14页 |
| 1.2 紫花苜蓿的耐盐性研究 | 第14-18页 |
| 1.2.1 国内外紫花苜蓿种质资源及耐盐性品种 | 第14-15页 |
| 1.2.2 紫花苜蓿耐盐性研究的进展 | 第15页 |
| 1.2.3 盐胁迫对紫花苜蓿生长发育特性和生理代谢的影响 | 第15-17页 |
| 1.2.4 紫花苜蓿的耐盐机制 | 第17-18页 |
| 1.2.4.1 有机渗透调节与苜蓿的耐盐性 | 第17页 |
| 1.2.4.2 拒Na~+能力与苜蓿的耐盐性 | 第17-18页 |
| 1.2.4.3 抗氧化能力与苜蓿的耐盐性 | 第18页 |
| 1.2.4.4 光合作用与苜蓿的耐盐性 | 第18页 |
| 1.3 植物耐盐性与蛋白质组学 | 第18-23页 |
| 1.3.1 蛋白质组学研究概述 | 第18-19页 |
| 1.3.2 蛋白质组学研究技术进展 | 第19-21页 |
| 1.3.3 植物蛋白质组学在植物耐盐性研究上的进展 | 第21-23页 |
| 1.4 ITRAQ技术 | 第23-24页 |
| 1.4.1 iTRAQ技术概述 | 第23页 |
| 1.4.2 iTRAQ技术原理 | 第23-24页 |
| 1.4.3 iTRAQ技术实验流程 | 第24页 |
| 1.4.4 iTRAQ技术特点 | 第24页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第24-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-37页 |
| 2.1 试剂、仪器与设备 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27页 |
| 2.3 材料培养及处理 | 第27-28页 |
| 2.4 生理指标的测定 | 第28-30页 |
| 2.4.1 紫花苜蓿叶片相对电导率（REL）的测定 | 第28页 |
| 2.4.2 紫花苜蓿叶片相对含水量（RWC）的测定 | 第28页 |
| 2.4.3 紫花苜蓿叶片叶绿素含量的测定 | 第28-29页 |
| 2.4.4 紫花苜蓿叶片游离脯氨酸的测定 | 第29页 |
| 2.4.5 紫花苜蓿叶片蛋白质含量的测定 | 第29页 |
| 2.4.6 紫花苜蓿叶片丙二醛（MDA）含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.4.7 紫花苜蓿叶片超氧化物歧化酶（SOD）含量的测定 | 第30页 |
| 2.5 叶片总蛋白的制备 | 第30-31页 |
| 2.6 叶片总蛋白浓度测定 | 第31页 |
| 2.7 蛋白质酶解 | 第31页 |
| 2.8 蛋白样品ITRAQ标记 | 第31-32页 |
| 2.9 强阳离子交换分馏(SCX) | 第32页 |
| 2.10 高效液相色谱串联质谱（LC-MSMS） | 第32-33页 |
| 2.11 质谱分析以及数据库的选择 | 第33页 |
| 2.12 生物信息分析 | 第33-34页 |
| 2.13 差异蛋白的选择 | 第34-35页 |
| 2.14 实时荧光定量PCR | 第35-37页 |
| 2.14.1 叶片总RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.14.2 反转录成cDNA | 第36页 |
| 2.14.3 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-60页 |
| 3.1 盐胁迫对紫花苜蓿叶片外观形态的影响 | 第37-38页 |
| 3.2 紫花苜蓿盐胁迫盐浓度和处理时间的筛选 | 第38-44页 |
| 3.2.1 盐胁迫对紫花苜蓿叶片相对电导率（REL）的结果分析 | 第38-39页 |
| 3.2.2 盐胁迫对紫花苜蓿叶片相对含水量（RWC）的结果分析 | 第39-40页 |
| 3.2.3 盐胁迫对紫花苜蓿叶片叶绿素含量的结果分析 | 第40-41页 |
| 3.2.4 盐胁迫对紫花苜蓿叶片游离脯氨酸（PRO）的结果分析 | 第41-42页 |
| 3.2.5 盐胁迫对紫花苜蓿叶片可溶性蛋白含量的结果分析 | 第42-43页 |
| 3.2.6 盐胁迫对紫花苜蓿叶片丙二醛（MDA）含量的结果分析 | 第43页 |
| 3.2.7 盐胁迫对紫花苜蓿叶片超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定结果分析 | 第43-44页 |
| 3.3 盐胁迫下处理时间的筛选 | 第44页 |
| 3.4 样品蛋白的定量信息 | 第44-45页 |
| 3.5 肽段匹配误差分布 | 第45-46页 |
| 3.6 蛋白质鉴定结果与分析 | 第46-49页 |
| 3.6.1 蛋白质鉴定数据基本信息 | 第46页 |
| 3.6.2 蛋白质相对分子质量分布 | 第46-47页 |
| 3.6.3 肽段长度分布 | 第47-48页 |
| 3.6.4 肽段序列覆盖度 | 第48-49页 |
| 3.6.5 特有肽段数量分布 | 第49页 |
| 3.7 差异蛋白统计 | 第49-50页 |
| 3.7.1 两次生物学重复共表达蛋白质筛选 | 第49-50页 |
| 3.7.2 差异蛋白筛选结果 | 第50页 |
| 3.8 总鉴定蛋白的GO注释和富集分析 | 第50-55页 |
| 3.9 差异蛋白的COG功能分类 | 第55-56页 |
| 3.10 差异蛋白的PATHWAY代谢通路注释 | 第56-58页 |
| 3.11 受盐胁迫处理后差异表达的蛋白质 | 第58-59页 |
| 3.12 差异表达蛋白的QRT-PCR验证 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-71页 |
| 4.1 ITRAQ技术植物盐胁迫响应研究中的应用优势 | 第60-64页 |
| 4.2 叶片响应盐胁迫差异表达蛋白 | 第64-71页 |
| 4.2.1 光合相关蛋白 | 第64页 |
| 4.2.2 信号传递相关蛋白 | 第64-65页 |
| 4.2.3 抗氧物相关蛋白 | 第65-66页 |
| 4.2.4 防御相关蛋白 | 第66页 |
| 4.2.5 蛋白质合成、加工和降解相关蛋白 | 第66-67页 |
| 4.2.6 细胞分裂、结构和细胞骨架相关蛋白 | 第67-68页 |
| 4.2.7 能源产生和转运相关蛋白 | 第68页 |
| 4.2.8 代谢相关蛋白 | 第68-69页 |
| 4.2.9 膜和胞内运输相关蛋白 | 第69-71页 |
| 5 结论 | 第71-83页 |
| 附录一 | 第83-92页 |
| 附录二 | 第92-97页 |
| 附录三 | 第97-98页 |
| 个人简介 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
