摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
第1章 引言 | 第13-15页 |
第2章 观察HER2基因对恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞株增殖和迁移的影响 | 第15-47页 |
2.1 材料与方法 | 第15-37页 |
2.1.1 恶性脑膜瘤细胞培养 | 第15-17页 |
2.1.2 沉默和过表达HER2基因质粒构建 | 第17-22页 |
2.1.3 慢病毒包装 | 第22-24页 |
2.1.4 慢病毒感染 | 第24-25页 |
2.1.5 q-PCR检测各组脑膜瘤细胞HER2 mRNA的表达情况 | 第25-28页 |
2.1.6 Western blot检测各组脑膜瘤细胞HER2、PI3K、AKT、P-AKT,mTOR、P-mTOR、S6、P-S6、CyclinD、NF-κB、VEGF蛋白表达情况 | 第28-34页 |
2.1.7 CCK8法、Transwell小室迁移实验检测各组细胞生长增殖、迁移情况 | 第34-35页 |
2.1.8 流式细胞术实验检测细胞周期情况 | 第35-36页 |
2.1.9 统计学处理与分析 | 第36-37页 |
2.2 结果 | 第37-47页 |
2.2.1 沉默HER2基因质粒测序 | 第37-38页 |
2.2.2 过表达HER2基因质粒测序 | 第38-40页 |
2.2.3 慢病毒转染恶性脑膜瘤细胞MOI值的确定及转染率的测定 | 第40-41页 |
2.2.4 q-PCR检测各组细胞HER2 mRNA的表达情况 | 第41-42页 |
2.2.5 Western blot检测各组细胞HER2蛋白的表达情况 | 第42-43页 |
2.2.6 CCK8法检测各组细胞生长曲线 | 第43页 |
2.2.7 Transwell小室迁移法检测各组细胞迁移能力 | 第43-44页 |
2.2.8 流式细胞术检测各组细胞周期情况 | 第44-45页 |
2.2.9 Western blot检测各组细胞PI3K/AKT信号通路中主要蛋白表达水平 | 第45-47页 |
第3章 PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002、KU-0063794 对HER2过表达恶性脑膜瘤IOMM-Lee细胞株增殖和迁移的影响 | 第47-62页 |
3.1 材料与方法 | 第47-57页 |
3.1.1 药物来源 | 第47页 |
3.1.2 主要实验材料配制方法 | 第47页 |
3.1.3 CCK8实验检测不同浓度的PI3K、mTOR抑制剂作用细胞后对细胞增殖的影响 | 第47-48页 |
3.1.4 Transwell小室迁移实验检测不同浓度的PI3K、mTOR抑制剂作用细胞后对细胞迁移的影响 | 第48-50页 |
3.1.5 流式细胞术检测不同浓度的PI3K、mTOR抑制剂作用细胞后对细胞周期的影响 | 第50-51页 |
3.1.6 Western blot检测不同浓度的PI3K、mTOR抑制剂作用脑膜瘤细胞后对HER2/PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响情况 | 第51-57页 |
3.2 结果 | 第57-62页 |
3.2.1 CCK8法检测各组细胞生长曲线 | 第57-58页 |
3.2.2 Transwell小室迁移法检测各组细胞迁移能力 | 第58-59页 |
3.2.3 流式细胞术检测各组细胞周期变化情况 | 第59页 |
3.2.4 Western blot检测各组细胞HER2、PI3K/AKT信号通路中蛋白表达水平 | 第59-62页 |
第4章 讨论 | 第62-71页 |
4.1 恶性脑膜瘤治疗面临挑战 | 第62-63页 |
4.2 HER2在脑膜瘤中的研究现状 | 第63-64页 |
4.3 前期研究中已获得沉默HER2基因和过表达HER2基因恶性脑膜瘤稳定细胞株并已做了相应研究 | 第64页 |
4.4 HER2基因对恶性脑膜瘤细胞增殖及细胞周期的影响 | 第64-65页 |
4.5 HER2基因对恶性脑膜瘤侵袭和迁移的影响 | 第65-67页 |
4.6 HER2/PI3K/AKT在恶性脑膜瘤中发挥作用的可能机制 | 第67-69页 |
4.7 存在的问题与展望 | 第69-71页 |
第5章 结论 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-78页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第78-79页 |
综述 | 第79-91页 |
参考文献 | 第87-91页 |