| 中文摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 英文缩略词表（Abbreviation） | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 第一部分 OGD/R后大鼠BMECs损伤与自噬调节的关系 | 第22-37页 |
| 1 前言 | 第22页 |
| 2 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.2 主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.4 主要溶液配制 | 第24-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-29页 |
| 3.1 BMECs的原代培养及鉴别 | 第25-26页 |
| 3.1.1 BMECs的原代培养 | 第26页 |
| 3.1.2 BMECs的鉴别 | 第26页 |
| 3.2 OGD/R损伤BMECs模型的建立 | 第26-27页 |
| 3.3 实验分组 | 第27页 |
| 3.4 细胞存活率检测（MTT法） | 第27页 |
| 3.5 乳酸脱氢酶（LDH）活性检测 | 第27页 |
| 3.6 透射电镜观察自噬体超微结构 | 第27-28页 |
| 3.7 Western-Blotting法检测蛋白表达 | 第28-29页 |
| 3.7.1 蛋白提取 | 第28页 |
| 3.7.2 Western-Blotting法检测自噬标志蛋白LC3、Beclin-1 表达 | 第28-29页 |
| 4 统计学分析 | 第29页 |
| 5 实验结果 | 第29-33页 |
| 5.1 BMECs的形态学观察与鉴定 | 第29-30页 |
| 5.2 OGD/R不同时间点对BMECs增殖活力的影响 | 第30-31页 |
| 5.3 OGD/R不同时间点对BMECs内LDH活性的影响 | 第31-32页 |
| 5.4 透射电镜观察细胞超微结构 | 第32页 |
| 5.5 OGD/R损伤BMECs不同时程自噬的变化 | 第32-33页 |
| 6 讨论 | 第33-36页 |
| 7 结论 | 第36-37页 |
| 第二部分 HSYA调节自噬保护OGD/R损伤大鼠BMECs | 第37-57页 |
| 1 前言 | 第37页 |
| 2 实验材料 | 第37-39页 |
| 2.1 实验动物 | 第37页 |
| 2.2 药物 | 第37页 |
| 2.3 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.4 主要仪器 | 第38-39页 |
| 2.5 主要溶液配制 | 第39页 |
| 3 实验方法 | 第39-44页 |
| 3.1 BMECs的原代培养及鉴别 | 第39页 |
| 3.2 OGD/R损伤BMECs模型的建立 | 第39页 |
| 3.3 HSYA安全浓度范围筛选（MTT法） | 第39-40页 |
| （1）MTT法检测HSYA对正常BMECs的浓度筛选 | 第39-40页 |
| （2）MTT法检测HSYA对OGD/R损伤BMECs的浓度筛选 | 第40页 |
| 3.4 实验分组 | 第40页 |
| 3.5 倒置显微镜观察BMECs形态学变化 | 第40-41页 |
| 3.6 透射电镜观察细胞超微结构 | 第41页 |
| 3.7 细胞存活率检测（Alamar Blue法） | 第41页 |
| 3.8 LDH活性检测 | 第41页 |
| 3.9 Hochest33258染色检测细胞凋亡 | 第41页 |
| 3.10 TEER值的测定 | 第41页 |
| 3.11 细胞免疫荧光检测LC3蛋白表达 | 第41-42页 |
| 3.12 RT-PCR检测LC3基因表达 | 第42-43页 |
| 3.13 Western-Blotting法检测ZO-1、Beclin-1、LC3蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 4 统计学分析 | 第44页 |
| 5 结果 | 第44-54页 |
| 5.1 HSYA安全浓度范围筛选 | 第44-45页 |
| （1）HSYA对正常培养状态下BMECs活性的影响 | 第44页 |
| （2）MTT法检测HSYA对OGD/R时BMECs活性的影响 | 第44-45页 |
| 5.2 BMECs形态学观察 | 第45-46页 |
| 5.3 HSYA对OGD/R损伤BMECs超微结构的影响 | 第46-47页 |
| 5.4 HSYA对OGD/R损伤BMECs增殖活力的影响 | 第47-48页 |
| 5.5 HSYA对OGD/R损伤BMECs内LDH活性的影响 | 第48页 |
| 5.6 Hochest33258染色检测细胞凋亡形态 | 第48-49页 |
| 5.7 TEER值的测定 | 第49-50页 |
| 5.8 HSYA对OGD/R损伤BMECs上TJ蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
| 5.9 细胞免疫荧光检测LC3蛋白表达 | 第51-52页 |
| 5.10 RT-PCR检测LC3基因表达 | 第52-54页 |
| 5.11 HSYA对OGD/R损伤BMECs自噬标志蛋白表达的影响 | 第54页 |
| 6 讨论 | 第54-56页 |
| 7 结论 | 第56-57页 |
| 第三部分 HSYA保护OGD/R损伤大鼠BMECs的自噬调节途径研究 | 第57-66页 |
| 1 前言 | 第57页 |
| 2 实验材料 | 第57-59页 |
| 2.1 实验动物 | 第57页 |
| 2.2 药物 | 第57页 |
| 2.3 主要试剂 | 第57-58页 |
| 2.4 主要仪器 | 第58页 |
| 2.5 主要溶液配制 | 第58-59页 |
| 3 实验方法 | 第59-60页 |
| 3.1 BMECs的原代培养及鉴别 | 第59页 |
| 3.2 OGD/R损伤BMECs模型的建立 | 第59页 |
| 3.3 实验分组 | 第59页 |
| 3.4 细胞存活率检测（MTT法） | 第59页 |
| 3.5 LDH活性检测 | 第59页 |
| 3.6 Western-Blotting法检测蛋白的表达 | 第59-60页 |
| 4 统计学分析 | 第60页 |
| 5 实验结果 | 第60-62页 |
| 5.1 HSYA与ZSTK474合用对OGD/R损伤BMECs的保护作用52 | 第60页 |
| 5.2 HSYA与ZSTK474合用对OGD/R损伤BMECs自噬标志蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
| 5.3 HSYA与ZSTK474合用对PI3K/Akt/mTOR通路上主要蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
| 6 讨论 | 第62-64页 |
| 7 结论 | 第64页 |
| 8 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 技术路线图 | 第74-76页 |
| 综述 自噬与脑缺血再灌注损伤 | 第76-86页 |
| 参考文献 | 第82-86页 |
| 个人简历 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
