| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词及英汉对照表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1 番茄红素研究近况 | 第13-15页 |
| 1.1 番茄红素的营养价值 | 第13-14页 |
| 1.2 番茄红素的研究进展 | 第14-15页 |
| 2 RNAi技术研究近况 | 第15-19页 |
| 2.1 RNAi技术原理 | 第16-17页 |
| 2.2 RNAi技术的应用 | 第17-19页 |
| 2.2.1 病毒的防御 | 第17页 |
| 2.2.2 对一些基因的上调与下调 | 第17页 |
| 2.2.3 基因敲除 | 第17-18页 |
| 2.2.4 功能基因组学方面 | 第18页 |
| 2.2.5 RNAi在生物技术方面的应用 | 第18-19页 |
| 2.2.6 RNAi在食品方面的应用 | 第19页 |
| 2.2.7 RNAi在抗虫途径中的应用 | 第19页 |
| 3 E8启动子、PSY基因、LCYE基因研究近况 | 第19-25页 |
| 3.1 E8启动子的果实特异性 | 第19-21页 |
| 3.2 PSY基因研究进展 | 第21-23页 |
| 3.3 LCYE基因的研究进展 | 第23-25页 |
| 4 研究内容及研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 果实特异性表达载体的构建 | 第26-44页 |
| 1 材料 | 第26页 |
| 1.1 菌株与载体 | 第26页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第26页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-37页 |
| 2.1 番茄基因组DNA/RNA | 第26-27页 |
| 2.2 相关目的片段的PCR引物设计及扩增 | 第27-28页 |
| 2.3 目的片段的克隆及序列测定 | 第28-31页 |
| 2.3.1 目的片段的回收 | 第28-29页 |
| 2.3.2 连接 | 第29页 |
| 2.3.3 DH5α 感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.3.4 转化 | 第29-30页 |
| 2.3.5 菌落PCR鉴定阳性克隆及测序 | 第30页 |
| 2.3.6 阳性克隆小提质粒 | 第30-31页 |
| 2.4 中间载体的构建 | 第31-33页 |
| 2.5 PSY果实特异性过表达载体的构建 | 第33-35页 |
| 2.6 LCYE果实特异性RNAi表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 3 结果和分析 | 第37-44页 |
| 3.1 内含子、E8启动子、PSY、LCYE的PCR扩增及测序 | 第37-38页 |
| 3.2 中间克隆载体的鉴定 | 第38-40页 |
| 3.2.1 pBI221的双酶切鉴定 | 第38页 |
| 3.2.2 pRi221的单酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.3 pRiE8的双酶切鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3 PSY果实特异性过表达载体的鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3.1 pRiE8-Psy的双酶切鉴定 | 第40页 |
| 3.3.2 pBIE8-Psy的双酶切鉴定及序列测定 | 第40-41页 |
| 3.4 LCYE果实特异性RNAi表达载体的鉴定 | 第41-44页 |
| 3.4.1 pRiE8-Lcye(s)的双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4.2 pRiE8-Lcye的双酶切鉴定 | 第42页 |
| 3.4.3 pCRiE8-Lcye的双酶切鉴定及序列测定 | 第42-44页 |
| 第三章 果实特异性过表达及RNAi片段分别转化番茄 | 第44-51页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| 1.1 材料与试剂 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂的配制 | 第44页 |
| 1.3 各种植物培养基的配制 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-48页 |
| 2.1 无菌苗的种植 | 第45页 |
| 2.2 外植体的预培养 | 第45页 |
| 2.3 表达载体电击转化农杆菌 | 第45-46页 |
| 2.4 浸染及共培养 | 第46页 |
| 2.5 抑菌培养 | 第46页 |
| 2.6 选择培养 | 第46页 |
| 2.7 生根培养 | 第46-47页 |
| 2.8 转基因植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| 2.8.1 提取转基因植株及非转基因植株总DNA | 第47页 |
| 2.8.2 PSY过表达转基因植株PCR检测 | 第47-48页 |
| 2.9 炼苗 | 第48页 |
| 3 结果和分析 | 第48-51页 |
| 3.1 表达载体转化农杆菌的菌液PCR检测 | 第48-49页 |
| 3.2 转基因植株的获得 | 第49-50页 |
| 3.3 转基因植株的PCR检测 | 第50-51页 |
| 3.3.1 PSY过表达转基因植株PCR检测 | 第50页 |
| 3.3.2 LCYE RNAi转基因植株PCR检测 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 导师评阅表 | 第63页 |
