缩略词 | 第4-11页 |
摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第16-28页 |
1 植物香气物质合成 | 第16-20页 |
1.1 不同植物的香气组成 | 第16-17页 |
1.2 香气物质的合成途径 | 第17-18页 |
1.3 影响香气物质合成的因素 | 第18-20页 |
1.3.1 遗传因素或变种类型对香气物质合成的影响 | 第18页 |
1.3.2 果实发育阶段对香气物质合成的影响 | 第18-19页 |
1.3.3 乙烯对香气物质合成的影响 | 第19页 |
1.3.4 醇类、BTH、NO、ASA和吡唑类物质对植物香气合成的影响 | 第19-20页 |
1.3.5 环境调控与栽培措施对香气物质合成的影响 | 第20页 |
2 乙醇脱氢酶 | 第20-25页 |
2.1 醇脱氢酶的分类及结构 | 第20-22页 |
2.2 ADH在香气物质合成中的作用 | 第22-25页 |
2.2.1 ADH基因在果实中特异表达 | 第22-23页 |
2.2.2 ADH参与果实香气合成的功能验证 | 第23页 |
2.2.3 香气合成相关ADH的调控 | 第23-25页 |
3 本研究的目的意义及技术路线 | 第25-28页 |
第二章 CmADHs在不同类型薄皮甜瓜果实香气合成中的作用及相关差异基因的筛选 | 第28-45页 |
2.1 试验材料与取样 | 第28页 |
2.2 测定指标与方法 | 第28-32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-42页 |
2.3.1 三种香气类型甜瓜果实成熟期硬度、色度及可溶性固形物的比较 | 第32-33页 |
2.3.2 三种香气类型甜瓜果实成熟期香气物质的比较 | 第33-36页 |
2.3.3 三种香气类型甜瓜果实成熟期ADH及AAT酶活的比较 | 第36-37页 |
2.3.4 三种香气类型甜瓜果实成熟期CmADHs的表达水平比较 | 第37-39页 |
2.3.5 底物及抑制剂的孵育对甜瓜果实ADH活性的影响 | 第39-40页 |
2.3.6 底物及抑制剂的孵育对甜瓜果实香气物质的影响 | 第40页 |
2.3.7 底物及抑制剂的孵育对甜瓜果实CmADHs表达水平的影响 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
2.4.1 三个品种甜瓜成熟果实的香气差异 | 第42-43页 |
2.4.2 CmADHs基因家族成员的表达与香气差异的关系 | 第43-44页 |
2.5 小结 | 第44-45页 |
第三章 薄皮甜瓜CmADH4、CmADH12的克隆及生物信息学分析 | 第45-67页 |
3.1 材料 | 第45-46页 |
3.2 方法 | 第46-50页 |
3.3 结果与分析 | 第50-65页 |
3.3.1 CmADH4和CmADH12全长ORF的扩增 | 第50页 |
3.3.2 CmADH4和CmADH12测序鉴定与比对分析 | 第50-60页 |
3.3.3 扩增的CmADH4与CmADH12与目的基因的氨基酸序列比对 | 第60页 |
3.3.4 CmADH4和CmADH12氨基酸序列的保守结构域 | 第60-61页 |
3.3.5 CmADH4和CmADH12氨基酸序列的疏水性预测 | 第61页 |
3.3.6 CmADH4和CmADH12氨基酸序列的跨膜结构预测 | 第61-63页 |
3.3.7 CmADH4和CmADH12氨基酸序列的信号肽预测 | 第63-65页 |
3.3.8 CmADH4和CmADH12蛋白的基本性质预测 | 第65页 |
3.4 讨论 | 第65-66页 |
3.4.1 CmADH4和CmADH12 ORF的可靠性 | 第65页 |
3.4.2 CmADH4和CmADH12基于生息信息学的功能预测 | 第65-66页 |
3.5 小结 | 第66-67页 |
第四章 CmADH4和CmADH12原核表达载体的构建及CmADH4的原核表达 | 第67-83页 |
4.1 材料与方法 | 第67-75页 |
4.1.1 试验材料 | 第67-68页 |
4.1.2 试剂的配制 | 第68-69页 |
4.1.3 试验方法 | 第69-75页 |
4.2 结果与分析 | 第75-81页 |
4.2.1 CmADH4-pET30a和CmADH12-pET30a重组载体的构建 | 第75-76页 |
4.2.2 CmADH4重组蛋白的表达 | 第76-77页 |
4.2.3 CmADH4重组蛋白的纯化 | 第77-78页 |
4.2.4 CmADH4重组蛋白的反应最适温度及pH值 | 第78-79页 |
4.2.5 CmADH4重组蛋白的底物偏好分析 | 第79-81页 |
4.3 讨论 | 第81-82页 |
4.3.1 CmADH4和CmADH12的原核表达情况 | 第81页 |
4.3.2 CmADH4基于酶动力学参数的蛋白功能预测 | 第81-82页 |
4.4 小结 | 第82-83页 |
第五章 CmADH4与CmADH12在薄皮甜瓜果实中的瞬时表达 | 第83-99页 |
5.1 材料 | 第83-85页 |
5.2 方法 | 第85-88页 |
5.3 结果与分析 | 第88-96页 |
5.3.1 CmADH4和CmADH12重组质粒的构建和转化 | 第88-90页 |
5.3.2 根癌农杆菌EHA105侵染的甜瓜果实 | 第90页 |
5.3.3 不同根癌农杆菌侵染的甜瓜中两个CmADHs的表达及ADH活性变化 | 第90-91页 |
5.3.4 根癌农杆菌EHA105侵染的甜瓜中两个CmADHs的表达及ADH活性变化 | 第91-92页 |
5.3.5 荧光素酶对荧光素的响应及在果实不同部位的分布 | 第92-94页 |
5.3.6 CmADH4和CmADH12的表达对香气物质含量的影响 | 第94-96页 |
5.4 讨论 | 第96-97页 |
5.4.1 瞬时表达在甜瓜果实中的应用 | 第96-97页 |
5.4.2 CmADH4在薄皮甜瓜果实香气物质合成中的作用 | 第97页 |
5.5 小结 | 第97-99页 |
全文总结及展望 | 第99-101页 |
本课题的特点与创新之处 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-110页 |
附录 | 第110-114页 |
致谢 | 第114-115页 |
攻读博士期间所发表的论文 | 第115-116页 |