缩略词表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
前言 | 第17-20页 |
第一部分:产NDM-1 耐药菌在中国的流行研究 | 第20-39页 |
引言 | 第20-21页 |
1 实验材料 | 第21-22页 |
1.1 培养基 | 第21页 |
1.2 试剂和药品 | 第21页 |
1.3 缓冲液 | 第21页 |
1.4 仪器设备 | 第21-22页 |
2 实验方法 | 第22-25页 |
2.1 样本采集 | 第22-23页 |
2.2 样本处理 | 第23页 |
2.3 blaNDM-1阳性样本筛查 | 第23-24页 |
2.4 blaNDM-1阳性菌的分离 | 第24页 |
2.5 blaNDM-1 阳性菌的菌种鉴定 | 第24-25页 |
3 结果 | 第25-36页 |
3.1 各地区blaNDM-1阳性样本率统计和分析 | 第25-31页 |
3.2 blaNDM-1阳性菌的菌种鉴定结果及病例资料 | 第31-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
5 小结 | 第38-39页 |
第二部分 产NDM-1 菌株的特性研究 | 第39-67页 |
引言 | 第39页 |
1 实验材料 | 第39-43页 |
1.1 培养基 | 第39-40页 |
1.2 试剂和药品 | 第40页 |
1.3 缓冲液 | 第40-43页 |
1.4 仪器设备 | 第43页 |
2 研究方法 | 第43-53页 |
2.1 blaNDM-1基因遗传稳定性研究 | 第43页 |
2.2 不动杆菌属细菌菌种再次鉴定 | 第43-45页 |
2.3 微量肉汤稀释法和E-test法检测菌株对抗菌药物的敏感性 | 第45-46页 |
2.4 E-test法检测细菌金属酶表型 | 第46-47页 |
2.5 PCR检测常见的耐药基因 | 第47-49页 |
2.6 PFGE对细菌分型 | 第49-50页 |
2.7 Southern blot对blaNDM-1进行基因定位 | 第50-51页 |
2.8 接合转移实验评估blaNDM-l质粒的转移特性 | 第51-52页 |
2.9 微量肉汤稀释法评估blaNDM-1阳性接合子的耐药性 | 第52-53页 |
3 结果 | 第53-63页 |
3.1 blaNDM-1基因遗传稳定性分析 | 第53-54页 |
3.2 不动杆菌属细菌菌种鉴定结果 | 第54-55页 |
3.3 blaNDM-1阳性菌药敏结果及金属酶表型分析 | 第55-58页 |
3.4 协同耐药基因分析 | 第58页 |
3.5 blaNDM-1阳性菌PFGE分型结果 | 第58-59页 |
3.6 blaNDM-1基因定位结果 | 第59-60页 |
3.7 blaNDM-1质粒转移特性分析 | 第60-61页 |
3.8 blaNDM-1阳性接合子的药敏结果 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
5 小结 | 第66-67页 |
第三部分 含NDM-1 基因不动杆菌属细菌的分子遗传学研究 | 第67-89页 |
引言 | 第67-68页 |
1 实验材料 | 第68-69页 |
1.1 培养基 | 第68页 |
1.2 试剂和药品 | 第68页 |
1.3 缓冲液 | 第68页 |
1.4 仪器设备 | 第68-69页 |
2 实验方法 | 第69-75页 |
2.1 试剂盒提取质粒DNA | 第69页 |
2.2 blaNDM-1质粒的高通量测序 | 第69-74页 |
2.3 BLAST和Mauve对质粒的相似性进行分析 | 第74页 |
2.4 blaNDM-1基因周围结构分析 | 第74-75页 |
2.5 NDM-1 文献简要分析 | 第75页 |
3 结果 | 第75-85页 |
3.1 质粒的全序及注释结果 | 第75-76页 |
3.2 质粒的结构及相似性分析 | 第76-79页 |
3.3 Tn125 相关的两个全新质粒结构分析 | 第79-82页 |
3.4 blaNDM-1基因周围序列结构分析 | 第82-83页 |
3.5 NDM-1 文献简要分析 | 第83-85页 |
4 讨论 | 第85-88页 |
5 小结 | 第88-89页 |
第四部分 NDM-14 的特性研究 | 第89-106页 |
引言 | 第89页 |
1 实验材料 | 第89-92页 |
1.1 培养基 | 第89页 |
1.2 菌株及质粒 | 第89页 |
1.3 试剂和药品 | 第89-90页 |
1.4 缓冲液 | 第90-91页 |
1.5 仪器设备 | 第91-92页 |
2 实验方法 | 第92-97页 |
2.1 NDM-1 突变体的验证和明确 | 第92页 |
2.2 克隆载体的构建 | 第92-94页 |
2.3 药敏实验 | 第94页 |
2.4 NDM蛋白纯化 | 第94-96页 |
2.5 酶动力学实验 | 第96-97页 |
2.6 NDM-14 所在质粒结构分析 | 第97页 |
3 结果 | 第97-104页 |
3.1 NDM-1 突变体的验证和明确 | 第97-98页 |
3.2 药敏结果 | 第98-101页 |
3.3 酶动力学分析 | 第101-104页 |
4 讨论 | 第104页 |
5 小结 | 第104-106页 |
总结 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-112页 |
文献综述 | 第112-126页 |
参考文献 | 第123-126页 |
附表 1 | 第126-127页 |
附表 2 | 第127-128页 |
发表文章 | 第128-132页 |
攻读期成果 | 第132-134页 |
个人简历 | 第134-135页 |
致谢 | 第135-136页 |