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HCMV UL148基因全长cDNA的获得及生物信息学分析

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
缩略词表第10-11页
第一章 前言第11-25页
 1.H CMV 简介第11页
 2.H CMV 感染第11-14页
   ·先天性感染第12-13页
   ·免疫低下人群的感染第13-14页
 3.H CMV 基本特征第14-17页
   ·病毒形态与结构第14-15页
   ·病毒基因组结构第15-17页
 4. 病毒DNA 复制第17-19页
 5.H CMV 致病机制第19-20页
 6.H CMV UL/ b'区域研究现状第20-21页
 7.U L148 基因简介与研究现状第21页
 8.R ACE 技术原理简介第21-24页
 9. 课题研究的意义第24-25页
第二章 技术路线第25-26页
第三章 实验仪器与材料第26-29页
 1. 主要仪器第26-27页
 2. 实验材料第27-29页
   ·主要试剂第27-28页
   ·质粒、菌种和病毒株第28页
   ·其他主要试剂配方第28-29页
第四章 实验方法第29-45页
 1. 细胞培养第29页
   ·细胞复苏第29页
   ·细胞传代第29页
 2. 病毒培养与鉴定第29-31页
   ·病毒培养第29-30页
   ·病毒DNA 抽提第30页
   ·病毒鉴定第30-31页
 3.H CMV 总RNA 的提取第31-32页
 4. 利用5’RACE 技术扩增UL148 基因5’末端全长第32-39页
   ·去磷酸化处理第32-33页
   ·“去帽子”反应第33页
   ·5’RACE Adaptor 的连接第33-34页
   ·反转录反应第34-35页
   ·UL148 基因5’末端的扩增第35-36页
   ·UL148 基因5’末端的克隆及序列分析第36-39页
 5. 利用3’RACE 技术扩增UL148 基因3’末端全长第39-42页
   ·引物设计第39页
   ·UL148 基因3’末端的扩增第39-41页
   ·UL148 基因3’末端的克隆及序列分析第41-42页
 6.U L148 基因全长cDNA 序列的扩增、克隆和序列分析第42-45页
   ·HCMV 总RNA 的纯化第42页
   ·HCMV RNA 逆转录成cDNA第42-43页
   ·HCMV RNA 的鉴定第43-44页
   ·UL148 基因的RT-PCR 扩增第44-45页
   ·UL148 基因RT-PCR 产物的克隆及测序第45页
第五章 实验结果及分析第45-59页
 1. 病毒的分离与培养第45-46页
   ·HFF 细胞培养结果第45页
   ·HCMV 感染HFF 细胞出现病变效应第45-46页
 2.H CMV 培养与鉴定第46页
 3.H CMV 总RNA 的提取结果第46-47页
 4. 利用5’-RACE 技术扩增UL148 基因5’末端第47-49页
   ·巢式PCR 扩增UL148 基因的5’末端第47页
   ·UL148 基因5’末端的克隆及测序结果第47-49页
 5. 利用3’RACE 技术扩增UL148 基因3’末端第49-52页
   ·巢式PCR 扩增UL148 基因的3’末端第49页
   ·UL148 基因3’末端的克隆及测序结果第49-52页
 6.U L148 基因全长的扩增、克隆和测序第52-54页
   ·HCMV RNA 的鉴定结果第52页
   ·UL148 基因的RT-PCR 扩增结果第52-53页
   ·UL148 基因的RT-PCR 产物的克隆及测序结果第53-54页
 7.U L148 基因全长cDNA 生物信息学分析结果第54-59页
   ·编码蛋白翻译后修饰位点分析结果第54-55页
   ·HCMV UL148 基因编码蛋白性质分析第55页
   ·UL148 基因编码蛋白质疏水性轮廓分析第55-56页
   ·UL148 基因编码蛋白质二级结构及功能分析第56-59页
第六章 讨论第59-63页
 1.H CMV 感染HFF 细胞后的鉴定第59页
 2. 本实验RACE 技术面临的困难及解决方法第59-61页
 3.R T-PCR 时基因组的污染第61页
 4.U L148、UL132 基因转录本cDNA 全长的判断第61页
 5.U L148、UL132 基因转录本cDNA 全长序列信息分析第61-62页
 6. 研究展望第62-63页
第七章 全文工作总结第63-64页
第八章 参考文献第64-72页
第九章 其他第72-80页
 参考文献第77-80页
附录第80-89页
研究生期间发表的论文第89-90页
致谢第90-91页

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