| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 第一部分 在细胞水平观察FAT10基因对肌成纤维细胞的衰老作用 | 第13-30页 |
| 1 引言 | 第13页 |
| 2 研究目的 | 第13页 |
| 3 材料与方法 | 第13-24页 |
| 3.1 细胞株 | 第13页 |
| 3.2 主要试剂和材料 | 第13-14页 |
| 3.3 主要仪器 | 第14-15页 |
| 3.4 所需试剂配制 | 第15页 |
| 3.5 重组质粒的构建 | 第15-16页 |
| 3.6 RNA的提取 | 第16页 |
| 3.7 FAT10和CCN1的目的基因DNA片段的获取 | 第16-18页 |
| 3.8 PCR产物测定和胶回收 | 第18-19页 |
| 3.9 重组质粒的构建和扩增 | 第19-20页 |
| 3.10 重组质粒的转化 | 第20-21页 |
| 3.11 挑选、鉴定克隆 | 第21-22页 |
| 3.12 肌细胞、293T细胞的复苏 | 第22页 |
| 3.13 肌细胞、293T细胞的培养和传代 | 第22页 |
| 3.14 慢病毒的包装 | 第22-23页 |
| 3.15 慢病毒的滴度测定 | 第23页 |
| 3.16 慢病毒的感染 | 第23页 |
| 3.17 挑取单细胞克隆 | 第23-24页 |
| 3.18 SA-β-gal衰老染色 | 第24页 |
| 4 结果 | 第24-30页 |
| 4.1 成功构建重组质粒 | 第24-26页 |
| 4.2 重组慢病毒质粒的包装及滴度测定 | 第26-28页 |
| 4.3 慢病毒感染C2CL2细胞后的衰老特征 | 第28-30页 |
| 第二部分 腺相关病毒介导FAT10基因过表达对C57BL/6J小鼠衰老作用 | 第30-47页 |
| 1 引言 | 第30页 |
| 2 研究目的 | 第30页 |
| 3 材料与方法 | 第30-35页 |
| 3.1 重组质粒 | 第30页 |
| 3.2 实验动物 | 第30页 |
| 3.3 主要材料和试剂 | 第30-31页 |
| 3.4 主要仪器 | 第31页 |
| 3.5 所需试剂配制 | 第31页 |
| 3.6 动物饲养 | 第31-32页 |
| 3.7 转基因转入方法 | 第32页 |
| 3.8 衰老指标的测定 | 第32-33页 |
| 3.9 小鼠血清收集和组织处理 | 第33页 |
| 3.10 ELISA法测定小鼠中炎症因子 | 第33-35页 |
| 3.11 统计学分析 | 第35页 |
| 4 结果 | 第35-42页 |
| 4.1 FAT10过表达促进C57BL/6J小鼠外观衰老 | 第35-36页 |
| 4.2 FAT10过表达降低C57BL/6J小鼠活动能力 | 第36-37页 |
| 4.3 FAT10过表达促进C57BL/6J衰弱 | 第37-38页 |
| 4.4 FAT10过表达降低C57BL/6J小鼠代谢调节能力 | 第38-40页 |
| 4.5 FAT10过表达促进C57BL/6J炎症衰老 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-45页 |
| 6 结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 文献综述 | 第52-63页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
