| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第13-22页 |
| 0.1 A型流感病毒 | 第13-16页 |
| 0.1.1 A型流感病毒的流行病学 | 第13-14页 |
| 0.1.2 禽流感的基因组结构和生物学特征 | 第14-15页 |
| 0.1.3 禽流感病毒的感染复制周期 | 第15-16页 |
| 0.2 NS1蛋白的功能 | 第16-19页 |
| 0.3 NOLC1在细胞中的功能 | 第19-20页 |
| 0.4 研究NS1与NOCL1相互作用的意义 | 第20页 |
| 0.5 本项目研究的内容和目的 | 第20-22页 |
| 第1章 稳转细胞株的构建及鉴定 | 第22-28页 |
| 1.1 前言 | 第22页 |
| 1.2 材料与试剂 | 第22-24页 |
| 1.2.1 细胞株 | 第22-23页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第23页 |
| 1.2.3 溶液配制 | 第23页 |
| 1.2.4 仪器及耗材 | 第23-24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-26页 |
| 1.3.1 稳转株的免疫荧光鉴定 | 第24页 |
| 1.3.2 稳转株的Western Blot鉴定 | 第24-26页 |
| 1.4 实验结果 | 第26-28页 |
| 1.4.1 稳转株的免疫荧光鉴定结果 | 第26-27页 |
| 1.4.2 稳转株的Western Blot鉴定结果 | 第27-28页 |
| 第2章 NS1蛋白与NOLC1相互作用对细胞凋亡的影响 | 第28-42页 |
| 2.1 前言 | 第28-29页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第29页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第29页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第29页 |
| 2.2.4 仪器及耗材 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.3.1 ELISA检测CK2的水平 | 第29-32页 |
| 2.3.2 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NOLC1 mRNA水平的影响 | 第32-34页 |
| 2.3.3 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NOLC1蛋白水平的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.4 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NF-κB mRNA水平的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.5 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NF-κB蛋白水平的影响 | 第36-37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-40页 |
| 2.4.1 CK2水平的检测结果 | 第37页 |
| 2.4.2 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NOLC1 mRNA水平的影响 | 第37-38页 |
| 2.4.3 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NOLC1蛋白水平的影响 | 第38-39页 |
| 2.4.4 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NF-κB mRNA水平的影响 | 第39页 |
| 2.4.5 NS1蛋白与NOLC1相互作用对NF-κB蛋白水平的影响 | 第39-40页 |
| 2.5 结果讨论 | 第40-42页 |
| 第3章 NS1蛋白与NOLC1相互作用对宿主细胞内病毒的复制和细胞增殖的影响 | 第42-50页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.1 引物合成 | 第42页 |
| 3.2.2 细胞株、病毒毒株 | 第42-43页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第43页 |
| 3.2.4 溶液配制 | 第43页 |
| 3.2.5 仪器及耗材 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.3.1 A型禽流感病毒H3N2的扩增及效价测定 | 第43-45页 |
| 3.3.2 NS1与NOLC1相互作用对病毒复制的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.3 NS1与NOLC1相互作用对细胞增殖能力的影响 | 第46页 |
| 3.4 实验结果 | 第46-48页 |
| 3.4.1 NS1与NOLC1相互作用对病毒复制的影响 | 第46-48页 |
| 3.4.2 NS1与NOLC1相互作用对细胞增殖能力的影响 | 第48页 |
| 3.5 结果讨论 | 第48-50页 |
| 第4章 NS1蛋白与NOLC1相互作用的相关细胞通路的初步研究 | 第50-58页 |
| 4.1 前言 | 第50-51页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第51页 |
| 4.2.1 引物合成 | 第51页 |
| 4.2.2 细胞株 | 第51页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第51页 |
| 4.2.4 溶液配制 | 第51页 |
| 4.2.5 仪器及耗材 | 第51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-55页 |
| 4.3.1 NS1蛋白与NOLC1相互作用对 β-catenin mRNA水平的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.2 NS1蛋白与NOLC1相互作用对cyclinD mRNA水平的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.3 NS1蛋白与NOLC1相互作用对Bcl2 mRNA水平的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.4 NS1蛋白与NOLC1相互作用对CDK4 mRNA水平的影响 | 第54-55页 |
| 4.4 实验结果 | 第55-57页 |
| 4.4.1 NS1蛋白与NOLC1相互作用对 β-catenin mRNA水平的影响 | 第55页 |
| 4.4.2 NS1蛋白与NOLC1相互作用对cyclinD mRNA水平的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.3 NS1蛋白与NOLC1相互作用对Bcl2 mRNA水平的影响 | 第56页 |
| 4.4.4 NS1蛋白与NOLC1相互作用对CDK4 mRNA水平的影响 | 第56-57页 |
| 4.5 结果讨论 | 第57-58页 |
| 第5章 结论与展望 | 第58-61页 |
| 5.1 结论 | 第58-59页 |
| 5.2 进一步工作的方向 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录A 试剂及其配制一览表 | 第67-70页 |
| 附录B 主要仪器与耗材一览表 | 第70-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第72-73页 |
