| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 背景研究 | 第10-13页 |
| 1.1 口腔黏膜病变的危害 | 第10-11页 |
| 1.2 人口腔上皮细胞的体外培养 | 第11页 |
| 1.3 永生化的机制 | 第11页 |
| 1.4 永生化的方法 | 第11-12页 |
| 1.5 本文的研究思路 | 第12-13页 |
| 第二章 HTERT-PLVX重组慢病毒载体的构建及慢病毒包装 | 第13-27页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第13-15页 |
| 2.1.1 主要试剂和仪器 | 第13-14页 |
| 2.1.2 主要溶液及配置 | 第14-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-21页 |
| 2.2.1 p LVX-puro-hTERT慢载体的构建 | 第15-20页 |
| 2.2.2 hTERT-p LVX慢病毒包装 | 第20-21页 |
| 2.3 实验结果 | 第21-26页 |
| 2.3.1 hTERT基因的克隆 | 第21页 |
| 2.3.2 hTERT重组质粒双酶切鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3.3 测序结果 | 第22-25页 |
| 2.3.4 hTERT-p LVX慢病毒包装 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 人口腔上皮细胞的培养与鉴定 | 第27-32页 |
| 3.1 实验材料和仪器 | 第27-28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-29页 |
| 3.2.1 口腔粘膜上皮细胞的分离和原代培养 | 第28页 |
| 3.2.2 口腔粘膜上皮细胞的传代培养 | 第28页 |
| 3.2.3 口腔粘膜上皮细胞的冻存 | 第28-29页 |
| 3.3 实验结果 | 第29-30页 |
| 3.3.1 口腔粘膜上皮细胞的分离培养结果 | 第29-30页 |
| 3.3.2 口腔粘膜上皮细胞的传代培养 | 第30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第四章 过表达HTERT人口腔上皮稳细胞系的筛选及鉴定 | 第32-42页 |
| 4.1 实验材料和仪器 | 第32-34页 |
| 4.1.1 主要材料和试剂 | 第32页 |
| 4.1.2 主要溶液及配置 | 第32-34页 |
| 4.2 实验方法 | 第34-39页 |
| 4.2.1 过表达hTERT口腔上皮稳定细胞系的筛选 | 第34页 |
| 4.2.2 qRT-PCR检测hTERT基因表达 | 第34-37页 |
| 4.2.3 Western Blot检测hTERT蛋白表达 | 第37-39页 |
| 4.3 实验结果 | 第39-41页 |
| 4.3.1 转染后细胞形态及表型 | 第39页 |
| 4.3.2 qRT-PCR检测hTERT基因表达结果 | 第39-41页 |
| 4.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 结论与展望 | 第42-45页 |
| 5.1 结论 | 第42页 |
| 5.2 展望 | 第42-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 在学期间主要研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
