| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩写符号对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 五氯酚 | 第15-18页 |
| 1.2.1 五氯酚的理化性质和应用 | 第15-16页 |
| 1.2.2 五氯酚的毒性 | 第16页 |
| 1.2.3 五氯酚的降解 | 第16-17页 |
| 1.2.4 四氯苯醌的理化性质和应用 | 第17-18页 |
| 1.3 DNA损伤类型及应答机制 | 第18-19页 |
| 1.3.1 DNA损伤类型 | 第18页 |
| 1.3.2 DNA双链损伤 | 第18页 |
| 1.3.3 DNA损伤应答机制 | 第18-19页 |
| 1.4 DNA损伤修复机制 | 第19-22页 |
| 1.4.1 直接修复通路 | 第19-20页 |
| 1.4.2 碱基切除修复通路 | 第20-21页 |
| 1.4.3 核苷酸切除修复通路 | 第21页 |
| 1.4.4 错配修复通路 | 第21页 |
| 1.4.5 DNA双链断裂修复通路 | 第21-22页 |
| 1.5 重组酶RAD51简介 | 第22页 |
| 1.6 p53对细胞凋亡和DNA损伤修复的调控 | 第22-23页 |
| 1.6.1 p53对细胞凋亡的调控作用 | 第22-23页 |
| 1.6.2 p53对DNA损伤修复的调控作用 | 第23页 |
| 1.6.3 p53与RAD51的关系 | 第23页 |
| 1.7 立题依据及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 TCBQ诱导细胞DNA损伤及调控RAD51表达 | 第25-45页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.2.1 细胞株 | 第25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.4 抗体信息 | 第27页 |
| 2.2.5 常用溶液配制 | 第27-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-35页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第29页 |
| 2.3.2 细胞存活率测定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 蛋白质的提取和定量 | 第30-31页 |
| 2.3.4 Western blot实验 | 第31页 |
| 2.3.5 免疫荧光实验 | 第31-32页 |
| 2.3.6 碱性彗星实验 | 第32-33页 |
| 2.3.7 流式细胞术测定细胞凋亡实验 | 第33页 |
| 2.3.8 实时荧光定量PCR实验 | 第33-35页 |
| 2.3.9 统计分析 | 第35页 |
| 2.4 实验结果 | 第35-42页 |
| 2.4.1 TCBQ对MDA-MB-231 细胞存活率的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.2 TCBQ诱导MAD-MB-231 细胞DNA双链断裂 | 第36-37页 |
| 2.4.3 TCBQ诱导MDA-MB-231 细胞凋亡 | 第37-39页 |
| 2.4.4 TCBQ影响RAD51蛋白和mRNA的表达 | 第39-40页 |
| 2.4.5 TCBQ在不同细胞系中对RAD51蛋白表达的调节作用 | 第40页 |
| 2.4.6 TCBQ影响RAD51在细胞核和细胞质中的分布 | 第40-41页 |
| 2.4.7 TCBQ影响RAD51焦点的形成 | 第41-42页 |
| 2.5 讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 TCBQ下调RAD51表达的机制分析 | 第45-55页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第45页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.3 抗体信息 | 第46页 |
| 3.2.4 常用溶液配制 | 第46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第46页 |
| 3.3.2 免疫共沉淀实验 | 第46-47页 |
| 3.3.3 RT-PCR实验 | 第47页 |
| 3.3.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第47-48页 |
| 3.3.5 瞬时转染siRNA实验 | 第48页 |
| 3.3.6 其他实验方法 | 第48页 |
| 3.4 实验结果 | 第48-53页 |
| 3.4.1 TCBQ对RAD51泛素化水平的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.2 TCBQ对RAD51蛋白和mRNA稳定性的影响 | 第49页 |
| 3.4.3 TCBQ诱导p53和p38 MAPK通路相关蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 3.4.4 p53和p38 MAPK相关抑制剂对细胞存活率及RAD51表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.5 p53基因对TCBQ下调RAD51表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.6 转染p53 siRNA后检测TCBQ对MDA-MB-231 细胞的毒性情况 | 第52-53页 |
| 3.4.7 Ac-DEVD-CHO对细胞存活率及RAD51表达的影响 | 第53页 |
| 3.5 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 RAD51基因在TCBQ诱导细胞毒性中的作用 | 第55-61页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料 | 第55页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第55页 |
| 4.2.2 常用溶液配制 | 第55页 |
| 4.3 实验方法 | 第55-57页 |
| 4.3.1 转化 | 第55-56页 |
| 4.3.2 质粒提取 | 第56-57页 |
| 4.3.3 质粒转染 | 第57页 |
| 4.3.4 其他实验方法 | 第57页 |
| 4.4 实验结果 | 第57-60页 |
| 4.4.1 转染RAD51 siRNA和过表达质粒对TCBQ激活p53通路的影响 | 第57-58页 |
| 4.4.2 RAD51基因在TCBQ诱导DNA损伤中的作用 | 第58-59页 |
| 4.4.3 RAD51基因对细胞存活率的影响 | 第59-60页 |
| 4.5 讨论 | 第60-61页 |
| 全文总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 作者攻读硕士学位期间已发表科研成果 | 第75-76页 |
