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MicroRNA及基于microRNA的新型靶向纳米药物的抗肿瘤活性及机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩写词第9-17页
第1章 绪论第17-31页
    1.1 MicroRNA简介第17-19页
        1.1.1 MicroRNA的作用机制第17页
        1.1.2 MicroRNA在癌症治疗中的应用第17-19页
    1.2 宫颈癌简介第19-21页
        1.2.1 宫颈癌的分布及病理类型第19-20页
        1.2.2 宫颈癌的病因及诊疗第20页
        1.2.3 宫颈癌与MicroRNA第20-21页
    1.3 肺癌简介第21-25页
        1.3.1 肺癌的分布及病理类型第21页
        1.3.2 肺癌的病因及诊疗第21-22页
        1.3.3 肺癌与microRNA-34家族第22-25页
    1.4 抗癌药物载体研究现状第25-28页
        1.4.1 抗癌药物载体的种类第25-26页
        1.4.2 纳米材料载体概述第26-27页
        1.4.3 主动靶向载体概述第27-28页
    1.5 本文的研究内容及意义第28-31页
第2章 miR-124在宫颈癌中的功能研究第31-57页
    2.1 实验材料及溶液配制第31-32页
        2.1.1 实验材料第31页
        2.1.2 溶液配制第31-32页
    2.2 实验仪器第32-33页
    2.3 实验方法第33-45页
        2.3.1 Si Ha细胞的培养第33-34页
        2.3.2 pcDNA6.2-mi R-124载体构建第34-36页
        2.3.3 pcDNA6.2-mi R-124重组质粒的稳定转染第36-39页
        2.3.4 mi R-124转染效果检测第39-41页
        2.3.5 CCK8实验检测细胞增殖第41-42页
        2.3.6 Transwell实验检测细胞的转移与侵袭能力第42-43页
        2.3.7 伤.愈合实验第43-44页
        2.3.8 软琼脂集落形成实验第44页
        2.3.9 裸鼠体内实验第44-45页
        2.3.10 统计学分析第45页
    2.4 实验结果第45-52页
        2.4.1 pcDNA6.2-mi R-124重组质粒的鉴定第45-46页
        2.4.2 mi R-124在人宫颈癌细胞中的表达明显调低第46-47页
        2.4.3 Si Ha/miR-124细胞中miR-124的表达检测第47-48页
        2.4.4 mi R-124对宫颈癌细胞增殖能力的影响第48-49页
        2.4.5 mi R-124对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响第49-51页
        2.4.6 mi R-124对Si Ha细胞克隆形成的影响第51-52页
        2.4.7 mi R-124对裸鼠体内肿瘤形成抑制作用第52页
    2.5 讨论第52-54页
    2.6 本章小结第54-57页
第3章 miR-124靶基因的鉴定第57-79页
    3.1 实验材料及溶液配制第57页
        3.1.1 实验材料第57页
        3.1.2 溶液配制第57页
    3.2 实验仪器第57-58页
    3.3 实验方法第58-71页
        3.3.1 通过数据库预测miR-124靶基因第58-60页
        3.3.2 双荧光素酶报告基因载体的构建第60-65页
        3.3.3 双荧光素酶报告基因实验第65-66页
        3.3.4 Western Blot检测CDCP1蛋白表达水平第66-68页
        3.3.5 mi R-124对CDCP1蛋白水平的影响第68-71页
        3.3.6 统计学分析第71页
    3.4 实验结果第71-75页
        3.4.1 mi R-124靶基因的预测第71-72页
        3.4.2 Cdcp1基因在SiHa/miR-124细胞中的表达第72页
        3.4.3 mi R-124的靶点检测第72-74页
        3.4.4 恢复CDCP1表达对肿瘤抑制的影响第74-75页
    3.5 讨论第75-76页
    3.6 本章小结第76-79页
第4章 AMNPs的制备与表征第79-89页
    4.1 实验材料及溶液配制第79-80页
        4.1.1 实验材料第79页
        4.1.2 溶液配制第79-80页
    4.2 实验仪器第80页
    4.3 实验方法第80-82页
        4.3.1 SPDP交联剂修饰mi R-34a第80-81页
        4.3.2 MNPs的制备第81页
        4.3.3 AMNPs的制备第81页
        4.3.4 NPs,MNPs和AMNPs粒径、表面电位的检测第81页
        4.3.5 MNPs与AMNPs的形态观察第81-82页
        4.3.6 凝胶电泳检测Aptamer-miR-34a嵌合体的连接第82页
        4.3.7 统计学分析第82页
    4.4 实验结果第82-86页
        4.4.1 MNPs的合成结果检验第83-84页
        4.4.2 AMNPs的合成结果检验第84页
        4.4.3 NPs,MNPs和AMNPs表征第84-85页
        4.4.4 MNPs与AMNPs的形态观察第85-86页
    4.5 讨论第86-87页
    4.6 本章小结第87-89页
第5章 AMPNs在肺癌细胞中的转运与作用研究第89-105页
    5.1 实验材料及溶液配制第89-90页
        5.1.1 实验材料第89页
        5.1.2 溶液配制第89-90页
    5.2 实验仪器第90-91页
    5.3 实验方法第91-98页
        5.3.1 A549细胞的传代培养第91页
        5.3.2 共聚焦显微镜检验AMPNs摄取能力第91-92页
        5.3.3 Real-time PCR检测miR-34a的表达第92-94页
        5.3.4 Western Blot检测SIRT1蛋白的表达第94-96页
        5.3.5 Transwell实验检测A549细胞转移能力第96-97页
        5.3.6 Annexin V-PI检测细胞凋亡第97-98页
        5.3.7 统计学分析第98页
    5.4 实验结果第98-102页
        5.4.1 共聚焦显微镜观察AMPNs摄取能力第98-99页
        5.4.2 mi R-34a的表达检测第99-100页
        5.4.3 SIRT1蛋白的表达检测第100-101页
        5.4.4 Transwell实验检测A549细胞转移能力结果第101页
        5.4.5 Annexin V-PI检测细胞凋亡情况第101-102页
    5.5 讨论第102-103页
    5.6 本章小结第103-105页
结论第105-107页
参考文献第107-119页
附录第119-127页
攻读博士学位期间所发表的学术论文第127-129页
致谢第129页

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