摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩写词 | 第9-17页 |
第1章 绪论 | 第17-31页 |
1.1 MicroRNA简介 | 第17-19页 |
1.1.1 MicroRNA的作用机制 | 第17页 |
1.1.2 MicroRNA在癌症治疗中的应用 | 第17-19页 |
1.2 宫颈癌简介 | 第19-21页 |
1.2.1 宫颈癌的分布及病理类型 | 第19-20页 |
1.2.2 宫颈癌的病因及诊疗 | 第20页 |
1.2.3 宫颈癌与MicroRNA | 第20-21页 |
1.3 肺癌简介 | 第21-25页 |
1.3.1 肺癌的分布及病理类型 | 第21页 |
1.3.2 肺癌的病因及诊疗 | 第21-22页 |
1.3.3 肺癌与microRNA-34家族 | 第22-25页 |
1.4 抗癌药物载体研究现状 | 第25-28页 |
1.4.1 抗癌药物载体的种类 | 第25-26页 |
1.4.2 纳米材料载体概述 | 第26-27页 |
1.4.3 主动靶向载体概述 | 第27-28页 |
1.5 本文的研究内容及意义 | 第28-31页 |
第2章 miR-124在宫颈癌中的功能研究 | 第31-57页 |
2.1 实验材料及溶液配制 | 第31-32页 |
2.1.1 实验材料 | 第31页 |
2.1.2 溶液配制 | 第31-32页 |
2.2 实验仪器 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-45页 |
2.3.1 Si Ha细胞的培养 | 第33-34页 |
2.3.2 pcDNA6.2-mi R-124载体构建 | 第34-36页 |
2.3.3 pcDNA6.2-mi R-124重组质粒的稳定转染 | 第36-39页 |
2.3.4 mi R-124转染效果检测 | 第39-41页 |
2.3.5 CCK8实验检测细胞增殖 | 第41-42页 |
2.3.6 Transwell实验检测细胞的转移与侵袭能力 | 第42-43页 |
2.3.7 伤.愈合实验 | 第43-44页 |
2.3.8 软琼脂集落形成实验 | 第44页 |
2.3.9 裸鼠体内实验 | 第44-45页 |
2.3.10 统计学分析 | 第45页 |
2.4 实验结果 | 第45-52页 |
2.4.1 pcDNA6.2-mi R-124重组质粒的鉴定 | 第45-46页 |
2.4.2 mi R-124在人宫颈癌细胞中的表达明显调低 | 第46-47页 |
2.4.3 Si Ha/miR-124细胞中miR-124的表达检测 | 第47-48页 |
2.4.4 mi R-124对宫颈癌细胞增殖能力的影响 | 第48-49页 |
2.4.5 mi R-124对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响 | 第49-51页 |
2.4.6 mi R-124对Si Ha细胞克隆形成的影响 | 第51-52页 |
2.4.7 mi R-124对裸鼠体内肿瘤形成抑制作用 | 第52页 |
2.5 讨论 | 第52-54页 |
2.6 本章小结 | 第54-57页 |
第3章 miR-124靶基因的鉴定 | 第57-79页 |
3.1 实验材料及溶液配制 | 第57页 |
3.1.1 实验材料 | 第57页 |
3.1.2 溶液配制 | 第57页 |
3.2 实验仪器 | 第57-58页 |
3.3 实验方法 | 第58-71页 |
3.3.1 通过数据库预测miR-124靶基因 | 第58-60页 |
3.3.2 双荧光素酶报告基因载体的构建 | 第60-65页 |
3.3.3 双荧光素酶报告基因实验 | 第65-66页 |
3.3.4 Western Blot检测CDCP1蛋白表达水平 | 第66-68页 |
3.3.5 mi R-124对CDCP1蛋白水平的影响 | 第68-71页 |
3.3.6 统计学分析 | 第71页 |
3.4 实验结果 | 第71-75页 |
3.4.1 mi R-124靶基因的预测 | 第71-72页 |
3.4.2 Cdcp1基因在SiHa/miR-124细胞中的表达 | 第72页 |
3.4.3 mi R-124的靶点检测 | 第72-74页 |
3.4.4 恢复CDCP1表达对肿瘤抑制的影响 | 第74-75页 |
3.5 讨论 | 第75-76页 |
3.6 本章小结 | 第76-79页 |
第4章 AMNPs的制备与表征 | 第79-89页 |
4.1 实验材料及溶液配制 | 第79-80页 |
4.1.1 实验材料 | 第79页 |
4.1.2 溶液配制 | 第79-80页 |
4.2 实验仪器 | 第80页 |
4.3 实验方法 | 第80-82页 |
4.3.1 SPDP交联剂修饰mi R-34a | 第80-81页 |
4.3.2 MNPs的制备 | 第81页 |
4.3.3 AMNPs的制备 | 第81页 |
4.3.4 NPs,MNPs和AMNPs粒径、表面电位的检测 | 第81页 |
4.3.5 MNPs与AMNPs的形态观察 | 第81-82页 |
4.3.6 凝胶电泳检测Aptamer-miR-34a嵌合体的连接 | 第82页 |
4.3.7 统计学分析 | 第82页 |
4.4 实验结果 | 第82-86页 |
4.4.1 MNPs的合成结果检验 | 第83-84页 |
4.4.2 AMNPs的合成结果检验 | 第84页 |
4.4.3 NPs,MNPs和AMNPs表征 | 第84-85页 |
4.4.4 MNPs与AMNPs的形态观察 | 第85-86页 |
4.5 讨论 | 第86-87页 |
4.6 本章小结 | 第87-89页 |
第5章 AMPNs在肺癌细胞中的转运与作用研究 | 第89-105页 |
5.1 实验材料及溶液配制 | 第89-90页 |
5.1.1 实验材料 | 第89页 |
5.1.2 溶液配制 | 第89-90页 |
5.2 实验仪器 | 第90-91页 |
5.3 实验方法 | 第91-98页 |
5.3.1 A549细胞的传代培养 | 第91页 |
5.3.2 共聚焦显微镜检验AMPNs摄取能力 | 第91-92页 |
5.3.3 Real-time PCR检测miR-34a的表达 | 第92-94页 |
5.3.4 Western Blot检测SIRT1蛋白的表达 | 第94-96页 |
5.3.5 Transwell实验检测A549细胞转移能力 | 第96-97页 |
5.3.6 Annexin V-PI检测细胞凋亡 | 第97-98页 |
5.3.7 统计学分析 | 第98页 |
5.4 实验结果 | 第98-102页 |
5.4.1 共聚焦显微镜观察AMPNs摄取能力 | 第98-99页 |
5.4.2 mi R-34a的表达检测 | 第99-100页 |
5.4.3 SIRT1蛋白的表达检测 | 第100-101页 |
5.4.4 Transwell实验检测A549细胞转移能力结果 | 第101页 |
5.4.5 Annexin V-PI检测细胞凋亡情况 | 第101-102页 |
5.5 讨论 | 第102-103页 |
5.6 本章小结 | 第103-105页 |
结论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-119页 |
附录 | 第119-127页 |
攻读博士学位期间所发表的学术论文 | 第127-129页 |
致谢 | 第129页 |