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禾谷镰刀菌AREA基因的功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 前言第12-28页
    1.1 禾谷镰刀菌第12-15页
        1.1.1 禾谷镰刀菌的危害第12页
        1.1.2 禾谷镰刀菌的生物学特征第12-13页
        1.1.3 禾谷镰刀菌生理及寄主范围第13-14页
        1.1.4 禾谷镰刀菌的病害循环第14页
        1.1.5 禾谷镰刀菌作为分子遗传学研究的优点第14-15页
        1.1.6 禾谷镰刀菌致病性的分子机制研究第15页
    1.2 禾谷镰刀菌真菌毒素DON生物合成系统的研究进展第15-17页
        1.2.1 禾谷镰刀菌的真菌毒素第15页
        1.2.2 DON的生物合成系统第15-17页
        1.2.3 DON生物合成的调控机制第17页
    1.3 真菌氮代谢的研究进展第17-18页
    1.4 真菌氮代谢对致病性的影响第18-21页
        1.4.1 氮源缺乏能够触发效应子的表达第19页
        1.4.2 GATA转录因子对致病力的影响第19-21页
        1.4.3 其它氮代谢调节因子对致病力的影响第21页
    1.5 真菌氮代谢对次生代谢产物合成的影响第21-25页
        1.5.1 GATA转录因子对次生代谢产物合成的影响第22-23页
        1.5.2 其它氮代谢调节因子对次生代谢产物合成的影响第23-24页
        1.5.3 信号通路对氮源的感应和对次生代谢产物合成的影响第24-25页
    1.6 真菌对铵态氮源的感应和转运机制第25-27页
        1.6.1 酵母对铵态氮源的感应和转运机制第25-26页
        1.6.2 其它真菌对铵态氮源的感应和转运机制第26-27页
    1.7 禾谷镰刀菌的GATA转录因子AreA第27-28页
第二章AREA基因结构预测和功能分析第28-31页
    2.1 材料与方法第28页
        2.1.1 材料第28页
        2.1.2 实验方法第28页
    2.2 结果第28-30页
        2.2.1 子囊菌AreA/Nit-2 的进化及禾谷镰刀菌AREA基因的预测第28-29页
        2.2.2 禾谷镰刀菌AreA的结构和功能分析预测第29-30页
    2.3 讨论第30-31页
第三章 禾谷镰刀菌AREA基因敲除和功能回复验证第31-48页
    3.1 材料和方法第31-44页
        3.1.1 材料第31-37页
        3.1.2 实验方法第37-44页
    3.2 结果第44-46页
        3.2.1 AREA基因敲除转化子的验证第44-45页
        3.2.2 ΔareA突变体的功能回复验证第45-46页
    3.3 讨论第46-48页
第四章 ΔareA突变体基本表现鉴定及致病力检测第48-59页
    4.1 材料和方法第48-51页
        4.1.1 材料第48-49页
        4.1.2 实验方法第49-51页
    4.2 结果第51-57页
        4.2.1 菌落形态的观察及生长速度测定第51-52页
        4.2.2 菌落边缘菌丝形态的观察第52页
        4.2.3 产孢率的测定第52-53页
        4.2.4 分生孢子萌发及菌丝形态的观察第53-54页
        4.2.5 子囊壳形态和数量第54页
        4.2.6 子囊及子囊孢子形态第54-55页
        4.2.7 ΔareA突变体对过氧化氢敏感第55-56页
        4.2.8 ΔareA突变体致病力下降第56-57页
    4.3 讨论第57-59页
第五章AREA基因的表达及其在氮代谢途径中的作用第59-67页
    5.1 材料和方法第59-63页
        5.1.1 材料第59-60页
        5.1.2 实验方法第60-63页
    5.2 结果第63-66页
        5.2.1 AREA基因的表达水平第63-64页
        5.2.2 AREA基因在氮代谢中的调控机制第64-66页
    5.3 讨论第66-67页
第六章AREA基因核定位信号的鉴定第67-77页
    6.1 材料与方法第67-72页
        6.1.1 材料第67-69页
        6.1.2 实验方法第69-72页
    6.2 结果第72-76页
        6.2.1 AREAΔNLS1/2/3敲除菌株第72页
        6.2.2 AREAΔNLS1/2转化子的生长速率和亚细胞定位第72-73页
        6.2.3 AREAΔNLS3转化子的生长速率和亚细胞定位第73-75页
        6.2.4 AREAΔNLS1/2/3转化子的致病力和毒素DON检测第75-76页
    6.3 讨论第76-77页
第七章AREA基因在DON生物合成中的作用第77-90页
    7.1 材料和方法第77-84页
        7.1.1 材料第77-79页
        7.1.2 实验方法第79-84页
    7.2 结果第84-89页
        7.2.1 AreA在TRI家族启动区的潜在结合位点第84-85页
        7.2.2 AREA基因对TRI5 和TRI6 基因的调控第85-87页
        7.2.3 AREA基因影响精氨酸对毒素DON合成的诱导第87-88页
        7.2.4 AreA与Tri10 互作第88-89页
    7.3 讨论第89-90页
第八章AREA基因与PKA和MAPK通路的关系第90-100页
    8.1 材料和方法第90-93页
        8.1.1 材料第90-91页
        8.1.2 实验方法第91-93页
    8.2 结果第93-98页
        8.2.1 AREAΔS874、AREAΔS657-658 和AREAS874A敲除或点突变菌株第93页
        8.2.2 AREAΔS874、AREAΔS657-658和AREAS874A转化子的生长速率、致病力和毒素DON检测第93-95页
        8.2.3 AREAΔS874和AREAΔS874A转化子蛋白的活性第95页
        8.2.4 AREA基因对铵通透酶MEP基因的调控第95-97页
        8.2.5 AREA基因的磷酸化水平和PKA活性第97-98页
    8.3 讨论第98-100页
第九章 总结和展望第100-102页
参考文献第102-115页
英文缩写表第115-116页
致谢第116-117页
作者简介第117页

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